基因芯片技术及其应用

基因芯片的产生仅10年左右的时间,但在制备方法及应用方面都得到了极快的发展。本对基因芯片的产生及发展、主要制备原理以及应用作了概括的介绍。目前,基因芯片最常用的介质是表面修饰了特殊基团的玻片,使DNA分子通过共价键同玻片相连。通常被固定的元素是DNA片段或寡核苷酸。最常用的制备技术是直接点样法,即以针点或喷点的方式制备微矩阵基因芯片;此外,还有原位合成法及电定位法等制备芯片。基因芯片的应用概括起来有两大用处;检测基因的量及检测基因的结构（质）,前主要用于大规模检测基因表达的改变情况;后主要指DNA的序列分析,包括测序及再测序、SNP分析、突变检测等,因此在后基因组研究、分子诊断及分子检测方面具有广阔的应用前景。     

微矩阵基因芯片筛选喉鳞癌相关基因的研究

目的：应用基因微矩阵方法筛选喉鳞癌相关基因。方法：按一步法抽提喉鳞癌和对照喉正常组织的总ＤＮＡ并纯化ｍＲＮＡ;将４０９６种人类基因ＰＣＲ产物用ＣａｒｔｅｓｉａｎＰｉｘｓｙｓ７５００点样仪按微矩阵排列点样于化学涂层的载玻片上,制成基因芯片;将等量的对照组织和喉鳞癌组织ｍＲＮＡ分别逆转录合成荧光分子掺入的ｃＮＤＡ－链做探针,混合后杂交上述基因芯片,经严格洗片后用ＳｃａｎＡｒｒａｙ３０００扫描仪扫描芯片     

基因表达谱芯片在胰腺癌相关基因筛选中的应用研究

目的：探讨基因表达谱芯片技术在高通量筛查肿瘤相关基因群及研究胰腺癌分子病理变化中的应用价值。方法：应用含有４０９６条人类全长基因的ｃＮＤＡ表达谱芯片,对３例临床切除的胰腺癌及正常胰腺标本的基因表达谱进行分析。结果：在３例胰腺癌和正常胰腺组织中均有差异表达的基因３９８条,其中新基因２８９条,老基因１０９条。从老基因中筛选出有显著表达差异基因３７条,其中在胰腺癌组织中上调基因２０条,下调基因１７条。结     

基因芯片对PMA激活的血管内皮细胞早期反应基因的研究

目的 :用基因芯片研究 PMA激活的血管内皮细胞的早期反应基因 (imm ediate early response gene,ERG)。方法 :以包含 40 96条人类基因的 DNA芯片检测血管内皮细胞受代谢增强剂 PMA(phorbol myristate acetate)激活后早期的基因表达谱 ,并从中筛查出 ERG。结果 :血管内皮细胞受 PMA作用 6 h后 ,17条基因上调 ,11条下调。数据处理聚类分析表明 17条上调基因中多数 (13/ 17)属蛋白质磷酸酶和转录调控因子基因 ,而下调基因中多数 (9/ 11)为细胞分裂相关基因。结论 :证明PMA激活的人血管内皮细胞早期反应基因主要是转录调控因子和蛋白质磷酸酶基因。     

中老年男性雄激素部分缺乏中医证型分析

中老年男性雄激素部分缺乏(Partial Androgen Defi-ciency in Aging Men,PADAM)属中医学“不寐”、“郁证”、“阳痿”、“心悸”等范畴。目前,学术界对其定义、发生机理等还存在许多分歧,诊断上也不尽相同。笔者参考伊斯坦布尔Bosphorus心理科使用的“男性更年期自我评定量表”及其他PADAM问卷,并根据自己的临床体会设计问卷进行症状筛选,以期对该病证的辨证论治提供参考。     

复发性卵巢癌的治疗选择——手术还是化疗

复发性卵巢癌的治疗是妇科肿瘤中棘手的问题，一般包括再次手术和挽救化疗。对铂类敏感的复发性卵巢癌。可以在二次肿瘤细胞减灭术的基础上，再使用铂类为基础的联合化疗方案。对铂类耐药的复发性卵巢癌，根据患者的具体睛况，权衡手术和化疗的利弊，挽救化疗时宜选择其他二线化疗药物进行单药序贯化疗。对复发性卵巢癌手术。要严格选择、充分准备，尽可能完全切除复发癌灶，为挽救化疔创造有利条件。     

2种不同微创手术方法治疗良性前列腺增生症的临床观察

目的:观察经尿道前列腺等离子双极电切(TUPKP)与经尿道前列腺单极电切术(TURP)治疗良性前列腺增生症患者的临床效果。方法:回顾性分析我院自2009年10月～2011年10月住院的130例良性前列腺增生症患者,随机分为实验组和对照组,每组各65例。实验组采用TUPKP,对照组采用TURP。结果:实验组和对照组术中、术后手术时间、术中出血量、术后平均住院天数、膀胱冲洗时间以及留置尿管时间,差异有统计学意义(P<0.05);实验组和对照组术后半年IPSS评分、QOL评分、残余尿和并发症等指标,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TUPKP与TURP治疗良性前列腺增生症患者的临床效果相当,经尿道前列腺等离子双极电切术相对更安全,值得临床推广应用。     

微管相关蛋白样激酶 1在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的研究微管相关蛋白样激酶 1(doublecortin?like kinase 1,DCLK1)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法回顾性分析 2006年 5月至 2011年 7月在河南省人民医院住院治疗的 267例胃癌病人临床病理资料,免疫组化染色法检测 267例胃癌组织和 138例癌旁正常组织中 DCLK1的表达,分析 DCLK1表达与胃癌病人临床病理特征之间的关系, Cox风险回归模型回归分析影响胃癌病人预后生存的影响因素, Kaplan?Meier法绘制不同 DCLK1表达水平病人的 5年总体生存和无复发生存曲线, Log?rank法比较 5年总体生存和无复发生存的差异。结果 DCLK1在胃癌组织中的高表达率 71.9%(192/267)高于癌旁正常组织 26.1%(36/138)。单因素分析显示 DCLK1高表达与病人性别、年龄,肿瘤大小,位置等临床病理因素之间无显著关联(P＞0.05)与肿瘤分化程度、浸润深度、神经侵犯、脉管侵犯、淋巴转移及临床分期等临床病理因素之间有关( P＜0.05)。 Cox回归分析显示,DCLK1高表达、临床分期和肿瘤分化程度是胃癌病人总生存率和无复发生存率的独立影响因素( P＜0.05)。 Kaplan?Meier生存分析显示, DCLK1高表达的胃癌病人的总生存率和无复发生存率较低( P＜0.05)。结论 DCLK1在胃癌组织中高表达是胃癌病人预后生存的独立影响因素。     

平行重叠吻合法在3D腹腔镜右半结肠癌根治术中的应用价值

目的探讨平行重叠吻合法在3D腹腔镜右半结肠癌根治术中的应用价值。方法采用回顾性横断面研究方法。收集2016年7月至2019年7月河南省人民医院收治的138例行3D腹腔镜右半结肠癌根治术患者的临床病理资料;男83例,女55例;中位年龄为64岁,年龄范围为30~76岁。138例患者术前右半结肠肿瘤均经肠镜及病理学检查确诊为恶性肿瘤;所有患者按日本大肠癌协会第9版《大肠癌规约》进行淋巴结清扫,严格遵循无瘤原则行右半结肠切除术。观察指标:(1)手术情况。(2)术后情况。(3)随访情况。采用门诊或电话方式进行随访,了解患者生存和肿瘤复发转移情况。随访时间截至2019年9月。正态分布的计量资料以±s表示。偏态分布的计量资料以M(范围)表示。计数资料以绝对数或百分比表示。结果(1)手术情况:138例患者均行3D腹腔镜右半结肠癌根治术,消化道重建采用平行重叠吻合法,无1例中转开腹。138例患者手术时间为(151.0±54.0)min,平行重叠吻合时间为(20.1±2.0)min,术中出血量为(60±21)mL。(2)术后情况:138例患者术后首次肛门排气时间为(2.5±0.4)d,术后进食半流质食物时间为(4.0±1.3)d,手术辅助切口长度为(3.0±0.2)cm,术后并发症发生率为3.62%(5/138)。5例术后发生并发症的患者中,1例肠梗阻经胃肠减压、营养支持等保守治疗后痊愈;1例吻合口漏,经胃肠减压、局部通畅引流、控制感染、营养支持等保守治疗后痊愈;1例腹腔积液伴感染行CT引导下置管引流后痊愈;1例切口感染给予控制感染,加强换药,局部冲洗引流后痊愈;1例肺部感染,经抗感染治疗后痊愈。138例患者术后清扫淋巴结数目为(19±8)枚,术后住院时间为(7.2±4.1)d,治疗费用为(4.8±1.4)万元。138例患者术后病理学检查结果示结肠腺癌,其中低分化腺癌27例,中分化腺癌92例,高分化腺癌10例,黏液腺癌9例。(3)随访情况:138例患者中,133例获得随访,随访时间为2~38个月,中位随访时间为18个月。随访期间,2例患者死亡(1例术后16个月发现多发肝转移,术后21个月死亡;1例术后20个月发现多发肝转移,术后24个月死亡),8例出现肿瘤远处转移,其中肝转移5例,肺转移1例,腹腔转移2例,死亡及转移患者的术后病理学分期均为Ⅲ期。其余123例患者一般情况良好。结论平行重叠吻合法应用于3D腹腔镜右半结肠癌根治术中安全、有效。