精子蛋白Sp32/OY-TES-1基因mRNA表达的探讨

目的了解精子蛋白Sp32／OY—TES-1基因mRNA的表达特点,研制癌-睾丸抗原（CTA）的肿瘤疫苗。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测95例正常人组织及125例人肿瘤组织中Sp32／OY—TES-1 mRNA的表达,随机选取RT-PCR阳性产物12份进行DNA测序;对所得数据进行统计学分析。结果Spa2／OY—TES-1在正常和肿瘤组织中的表达频率分别为68．4％（65／95）和44．00％（55／125）,两者比较有统计学意义（P〈0．05）。在24种不同器官的正常组织中,21种表达Sp32／OY—TES—1基因mRNA（87．50％）。DNA测序结果证实,RT-PCR产物为Sp32／OY—TES-1基因。结论Sp32／OY—TES-1基因的mRNA在正常组织中广泛表达,它是否可归为睾丸和肿瘤限制性表达的基因尚需进一步研究。     

精子蛋白sp32/OY-TES-1mRNA及其蛋白在正常组织表达的探讨

目的 了解正常组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的表达量是否存在差异以及该蛋白的表达情况,为sp32/OY-TES-1表达谱增加更多信息.方法 提取40例(19种)正常组织总RNA,逆转录-聚合酶合成cDNA,普通PCR检测cDNA质量;构建目的 基因sp32/OY-FES-1及看家基因HPRT质粒,制备标准品,绘制标准曲线,建立实时定量PCR(TaqMan)方法和优化反应体系,检测组织中sp32/OY-TES-1和HPRT的表达,sp32/OY-TES-1mRNA的表达量以OY-TES-1/HPRT表示.通过制备的OY-TES-1多克隆抗体,结合免疫组织化学检测sp32/OY-TES-1蛋白在多种正常组织中的表达.结果 正常组织中sp32/OY-TES-1mRNA阳性率为72.50%(29/40);2.非睾丸正常组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的相对表达量值(目的 基因/看家基因)为0.000 1～0.495 0,呈对数正态分布;3.睾丸组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的相对表达量为44.9,是其他正常组织的91～1 000倍;4.免疫组织化学(IHC)显示在所检测的多种正常组织和细胞中(10例睾丸组织、8例结肠、7例肝、6例骨骼肌、5例胃、5例晶状体、4例精子、3例外周血白细胞和1例肾),除4例精子和1例肾组织中的肾小管外,其余均未见OY-TES-1蛋白阳性反应.结论 sp32/OY-TES-1 mRNA广泛地表达在各种正常组织,表达量因组织不同而异;睾丸组织是所检测的正常组织中其mRNA表达量最高的组织.而sp32/OY-TES-1蛋白比其mRNA更具有限制性表达的特点.     

人肝癌相关抗原SMP-30在肝癌中的表达及意义

目的：通过免疫组化方法检测人肝癌（HCC）中衰老标记蛋白-30（SMP-30）的表达,探讨其在HCC发生、发展中的作用及临床意义。方法：制备48例人HCC及相应的癌旁组织、6例正常人肝组织和1例正常人肾组织的石蜡切片。采用免疫组化SABC法,检测SMP-30在HCC和癌旁组织中的表达,结合临床资料进行统计分析。结果：初步发现HCC癌旁组织的SMP-30表达高于HCC组织（P〈0．05）。SMP30的表达与HCC患者性别、年龄、肿瘤大小、病理分级、肝硬化背景、HBsAg和AFP检测情况未见相关性（P〉0．05）。结论：SMP-30与HCC的发生、发展有关,其过度表达可能是HCC的早期性、保护性事件。     

人脑胶质瘤中MAGE-D4和CANX mRNA的表达及其相关性分析

目的 探讨人脑胶质瘤中黑色素瘤相关抗原(MAGE)-D4和钙联蛋白(CANX)mRNA的表达水平,分析其相关性及临床意义.方法 应用基因表达谱交互式分析(GEPIA)数据库数据[胶质母细胞瘤(GBM)组织163例,低级别胶质瘤(LGG)组织518例,正常脑组织207例]分析MAGE-D4和CANX mRNA在人脑胶质瘤...     

鸡胚心室小梁发生过程中室腔容量与室壁体积的变化

光镜观察第１５、１７和１９期鸡胚连续切片（Ｈ—Ｈ分期法），计算机数字化仪测量心室部位，并计算心室腔平均容量，心室壁各层平均体积和心室平均总体积。结果显示，第１５期鸡胚的心室内尚未能辨认小梁结构，第１７期时出现小粱结构，第１９期小梁已完全形成。在小梁形成期间，随着心胶质逐渐减少，心室腔容量和心肌膜体积的构成比逐渐增大，心室腔容量的增加则小于心肌膜体积的增加。     

多形性胶质母细胞瘤Pten/MMAC1/Tep1基因的表达研究

目的：探讨肿瘤抑制基因Pten/MMAC1/Tep1在多形性胶质母细胞瘤中的作用,方法：用免疫组化ABC法检测20例多形性胶质母细胞瘤中Pten/MMAC1/Tep1基因的表达。结果：60%（12/20）病例该基因表达丢失;40%（8/20）表达低下;无一例表达正常。结论：Pten/MMAC1/Tep1表达异常可能与多形性胶质母细胞瘤的发生有关。     

特异性siRNA对卵巢癌SKOV3细胞中OY-TES-1蛋白表达的抑制作用

目的:探讨特异性siRNA对卵巢癌SKOV3细胞中肿瘤-睾丸抗原OY-TES-1蛋白表达的影响。方法:针对OY-TES-1基因设计、化学方法合成的siRNA通过脂质体转染体外培养的卵巢癌SKOV3细胞,在转染后24、36、48、72 h,通过免疫细胞化学检测OY-TES-1蛋白的表达水平。结果:靶向OY-TES-1基因siRNA转染SKOV3细胞后,OY-TES-1蛋白的表达明显降低,其抑制作用在转染后24 h出现,转染后36 h几乎完全被抑制,转染后72 h开始出现RNAi衰减现象。结论:OY-TES-1特异性siRNA(1 486～1 504)序列可在体外有效地干扰SKOV3细胞中OY-TES-1基因的表达。     

癌睾丸抗原基因的表观遗传改变及意义

引言肿瘤的发病和死亡率呈逐年上升趋势。多年的临床实践证明,传统的肿瘤治疗模式仍有很大的局限性。人们在对传统的肿瘤治疗模式进行反思的同时,开始探索新的肿瘤治疗模式,运用肿瘤细胞所特有的抗原进行免疫治疗就是其中的研究热点之一。在目前已知的众多肿瘤相关抗原中,癌睾丸抗原(CancerTestisAntigen,CTA)由于其表达的特异性而适于作为肿瘤免疫治疗的靶抗原。本文仅从CTA的特点和表观遗传改变对CTA基因表达的调控及其意义做一综述。1CTA的特点CTA是90年代以来发现的一类较新的肿瘤抗原,它们能在多种组织来源的肿瘤中表达,但在正常组织中的表达仅限于睾丸的生殖细胞,偶尔可在胎盘中表达。因为生殖细胞不表达HLA分子以及血睾屏障的存在,CTA在产生抗肿瘤免疫的同时不会对正常组织及生殖细胞产生危害,因此这类抗原又被视为具有肿瘤特异性。利用这一表达特性,目前一些CTA的疫苗已用于临床实验,如NY ESO1[1]、MAGE[2]。归纳来看,CTA具有以下几方面的特点:(1)仅限于配子发育系统组织和肿瘤组织中表达;(2)其编码基因主要位于X染色体上;(3)多数CTA为多基因家族;(4)在肿瘤病人中具有免疫原性;(5)...