应用SEREX技术筛选与鉴定鼻咽癌相关抗原

目的:应用SEREX技术筛选与鉴定鼻咽癌相关抗原,为鼻咽癌的早期诊断、免疫治疗和预后监测提供候选的生物学指标和理论基础。方法:从鼻咽癌新鲜活检组织中提取mRNA,构建cDNA表达文库。用鼻咽癌患者的血清筛选所构建的cDNA表达文库,获得的阳性克隆经扩增后提取噬菌粒DNA进行测序。所得序列与GenBank数据库中已知基因进行同源比较,分析其生物学特性。结果:所构建的cDNA原始文库含1×106个重组体,蓝白斑试验显示重组率为93%。用鼻咽癌血清对表达文库进行筛选,共获得21个阳性克隆,分别代表14个不同的cDNA插入片段。12个插入片段的DNA序列分别与基因库上的基因有不同程度的同源性,其中6个基因与鼻咽癌或其它肿瘤的发生、发展关系密切;另6个基因的生理功能未见文献报道。2个插入片段未发现有同源基因,推测可能为新发现的基因。结论:SEREX技术是目前筛选肿瘤抗原最简便、有效的手段之一。本文研究发现的抗原将为鼻咽癌的研究提供进一步的理论基础。     

肝癌相关抗原Kinectin的多克隆抗体制备、鉴定及初步应用

目的制备本课题组报告的肝癌相关抗原Kinectin的多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性。方法以本课题组前期构建的人MBP-Kinectin融合片段重组质粒为基础,原核表达和亲和层析大量纯化MBP-Kinectin融合蛋白,并免疫新西兰兔制备多克隆抗体;用间接ELISA法测定抗体效价,用Western blot鉴定抗体的特异性。同时用Kinectin多克隆抗体检测Kinectin在正常成人肝细胞HL-7702和人肝癌细胞株SMMC-7721内的表达。结果通过免疫新西兰兔获得抗Kinectin抗体,ELISA测定纯化的Kinectin抗体效价最高为1∶12 800,Western blot结果显示Kinectin抗体具有较好的特异性。免疫细胞化学和western blot检测发现Kinectin蛋白在肝癌细胞株内的表达显著高于正常成人肝细胞株。结论制备的抗Kinectin抗体具有较高的效价和特异性,能满足Western blot和免疫细胞化学检测Kinectin蛋白的要求,为进一步深入研究Kinectin在肝癌发生发展中的作用奠定基础。     

肝细胞癌中OY-TES-1基因mRNA的表达

 目的：检测OY-TES-1基因mRNA在肝细胞癌(HCC)中的表达水平。方法:建立实时定量PCR方法,检测56例HCC及37例配对癌旁组织中目的基因OY-TES-1及看家基因HPRT的表达,OY-TES -1mRNA的表达量以OY-TES-1/HPRT表示,应用SPSS13.0统计分析软件进行数据分析。结果:（1）经实时定量PCR检测,HCC中OY-TES-1mRNA阳性率为73.21%（41/56）,癌旁组织阳性率为 64.86%（24/37）,有17对HCC及配对癌旁组织均表达阳性,OY-TES-1mRNA在HCC及癌旁组织中 的阳性表达率差异无统计学意义（P＞0.05）;（2）HCC中OY-TES-1mRNA水平明显高于对应的 癌旁组织（P＜0.05）,但与HCC患者的年龄、性别等临床资料无关。结论:OY-TES-1 mRNA在HCC中有较高的表达频率,其表达水平高于对应的癌旁组织,它有望作为用于HCC辅助诊断及免疫治疗的肿瘤抗原。OY-TES-1蛋白在HCC及癌旁组织中的表达及相关意义尚值得做进一步的研究。     

癌-睾丸抗原NY-ESO-1研究进展

近年来,肿瘤的发病率和病死率呈明显上升趋势,严重威胁着人类健康.传统的化疗、放疗和手术方法仍存在着各种问题,因此迫切要求寻找新的治疗手段,肿瘤免疫治疗亦是这些新的治疗手段之一.     

RNA和蛋白合成抑制剂对RXR基因转录表达的影响

目的：了解ＲＮＡ和蛋白质合成抑制剂对维甲酸Ｘ受体表达的影响。方法：常规培养人真皮成纤维细胞，用ａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ Ｄ及ｃｙｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ共同作用于细胞２，４，８ｈ，然后分离总ＲＮＡ，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法，与标记的ＲＸＲα、β探针进行杂交。结果：这些抑制剂对ＲＸＲα均无影响。虽然ａｃｔｉｎｏｍｙｘｉｎ Ｄ对ＲＸＲβ的表达无影响，但ａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ Ｄ和ｃｙｃｌｏ－ｈｅｘ     

OY-TES-1在肝细胞癌中的表达及抗体血清学分析

目的:了解OY-TES-1在肝细胞癌(HCC)中的表达及其抗体出现情况,探讨将OY-TES-1用于肿瘤免疫诊疗的可能性.方法:利用实时定量PCR和免疫组织化学技术,从mRNA和蛋白质两个水平研究OY-TES-1在HcC中的表达特点;采用酶联免疫吸附实验检测HCC患者及正常人血清中相应的抗体,并对其临床意义做初步的分析.结果:经实时定量PCR检测,HCC中OY-TES-1mRNA阳性率为73.21%(41/56),癌旁阳性率为64.86%(24/37),有17对HCC及配对癌旁组织均表达阳性,OY-TES-1mRNA在HCC及癌旁组织两者的表达阳性率无差异(P>0.05);在37对HCC及配对癌旁组织中,HCC中OY-TES-1mRNA水平明显高于对应的癌旁组织,其差异与病理分级有关CP<0.05).HCC中OY-TES-1蛋白阳性率为40%(4/10).血清学检测未发现76例正常人和17例肝硬化患者血清中有相应抗体,HCC患者血清抗体阳性率为20%(12/58),OY-TES-1血清抗体的出现与HCC患者的年龄、性别等临床资料无相关.结论:OY-TES-1在HCC中有较高的表达频率及表达水平,该蛋白具有较强的免疫原性,他有望作为用于HCC辅助诊断及免疫治疗的肿瘤抗原.     

三种MAGE基因在广西肝细胞癌中的表达

目的检测癌-睾丸抗原(CTA)基因MAGE-1、-3和-4在广西地区肝细胞癌(HCC)中的表达,探讨CTA作为疫苗对HCC治疗的可行性.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对25例广西HCC患者癌组织中MAGE-1、-3和-4基因mRNA的表达进行检测;随机选择MAGE-1、-3和-4阳性的RT-PCR产物各2例进行DNA序列测定.结果 MAGE-1和-3表达率均为40%(10/25),MAGE-4表达率为16%(4/25).DNA测序结果表明RT-PCR产物为MAGE-1、-3和-4基因.统计学分析显示MAGE-1、-3和-4基因的表达与HCC组织分化程度及临床分期无相关性(P>0.05),与HBV感染有相关性(P<0.05);此外,MAGE-1和-3的表达与肿瘤大小及AFP水平均存在相关性(P<0.05).在所检测的标本中,56%的标本至少表达上述1种MAGE,24% 的标本至少表达2种MAGE;16% 的标本表达3种MAGE.结论 MAGE-1和-3在广西HCC中有一定频率的表达,能否用于HCC的免疫治疗值得深入探讨.     

专业英语选修课互动教学的探索与实践

选修课是本科生拓宽知识面的必要形式,在我校已实行多年,但开设专业英语选修课却是近年新的尝试。本科医学生的教学要逐步实现专业课程双语教学。这既是教育部对医学院校的要求,也是我校的努力方向。要从现行的全中文教学过渡到双语教学,开始试行时肯定有不少的困难,无论是教师方面还是学生方面。因此,开设专业英语选修课将是有益的尝试,这样可以让学生逐步适应专业学习的双语教学要求,减少推行双语教学所引起的学生在学习上的困难。在我国的英文教学模式(当然目前已有很大的改进)下,许多大学生学了多年英语,只能阅读普通英文文章,即便在完成学业后,对所学的专业英文资料、文献、论著等不能阅读或一知半解,对专业英文单词不懂发音,把专业性英文文献视为“天书”,“听不懂、讲不出、写不通”的那种“尴尬英语”的奇怪现象,更谈不上与外国人作学术交流。多年学习英语,多数人出现“尴尬英语”的奇怪现象,究其原因可谓多种多样:语言环境的缺乏、应试制度的制约、个人努力的程度不同……。我们都知道,语言的学习需要一种环境和氛围,创造一个良好的语言环境和氛围,可以大大地促进语言学习的效果。目前我国的医学本科教学基本上使用中文,在教学过程中,穿插一些专业英文名词,学生接触...     

ras超家族中的肿瘤抑制基因

 引言ras超家族是一类重要的功能蛋白。它们介导生长因子、细胞因子和多种细胞外信号的信息通路,对细胞生长、分化、存活、增殖等多种功能的调节发挥重要作用。尽管ras超家族各成员之间存在差异,但它们也具有一些共同特征:(1)都是单体小G蛋白,拥有高度保守的GTP结合域(G1 G5 ) ,能与GTP和GDP结合;(2 )都有内源性GTP酶活性,能水解GTP生成GDP ;(3)多数ras超家族成员通过翻译后的脂酰化修饰与膜结合[1] 。ras超家族在细胞信号转导中可作为信号转换器或分子开关,它们通过与GTP结合(激活态)和GDP结合(失活态)的转换导致信号的转导或终止[2 ] 。该家族许多成员是癌基因,当其被异常激活后会导致细胞无限制地增殖,引起肿瘤。近年来,研究发现ras超家族中包括一些独特的成员,作为生长负向调节者,具有肿瘤抑制作用,本文现予以概述。1　ARHI(AplysiarasHomologI)ARHI是ras超家族中第一个被报道的肿瘤抑制基因,它是美国德克萨斯大学Anderson癌症中心于1999年利用差异展示PCR (differentialdisplayPCR)发现,又名NOEY2或ras同源基因家...