雌二醇对苯并(a)芘致雄性小鼠肺癌抑制作用

目的 建立苯并(a)芘[B(a)P]诱发雄性昆明小鼠肺癌的动物模型,探讨雌二醇(E2)在该模型中对B(a)P致肺癌作用的影响.方法 将不同组的雄性昆明小鼠分别给予B(a)P、E2干预,每周1次,持续8周,恢复8周后处死,进行形态学观察和病理学诊断,并检测血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平.结果 B(a)P组小鼠的肺癌发病率和肿瘤数分别为36.0%和1.154±0.54,明显高于对照组和E2组(P＜0.05);B(a)P E2组小鼠的肺癌发病率和肿瘤数分别为32.0%和0.88±0.33,明显高于对照组和E2组(P＜0.05);B(a)P组小鼠的肺癌发病率和肿鬃瘤数高于B(a)P E2组,肿瘤数差异有统计学意义(P＜0.05),而发病率差异无统计学意义(P＞0.05).血清MDA水平以B(a)P组最高,B(a)P E2组及E2组次之,对照组最低;SOD与MDA的趋势相反.结论 建立了灌胃B(a)P诱发雄性昆明小鼠肺癌的动物模型,E2可能通过抗氧化作用减少B(a)P诱发的肺癌肿瘤数.     

二羟环氧苯并芘致肺癌相关基因筛选

目的 筛选与二羟环氧苯并芘,(BPDE)引发肺癌相关基因的DNA片段,为进一步探讨BPDE致癌机制提供研究依据.方法 应用扩增片段长度多态性(AFLP)结合免疫磁珠分离等技术对与BPDE相互作用的DNA片段进行富集、扩增,经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示差异片段,并对其回收、克隆、测序及同源相似性比对分析.结果 成功回收了差异片段,经测序得到其碱基序列,基因同源相似性比对分析发现,有8条序列与已知基因同源,另有1条序列未找到同源序列,将该序列向GenBank提交注册,GenBalak已接受并给予登录号为:EF176681.结论 AFLP结合免疫磁珠分离等技术可以用于化学致癌BPDE肿瘤易感基因的筛选,所得9条基因片段可能与BPDE引发肺癌有关.     

鸡血藤提取物抗柯萨奇B3病毒活性组分研究

目的 研究鸡血藤提取物不同组分的抗柯萨奇B3病毒活性和性质.方法 通过不同溶剂提取鸡血藤活性成分,细胞病变效应法和四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定不同提取组分的体外抗柯萨奇B3病毒活性.结果 通过初步分离纯化得到有效成分具有抗柯萨奇B3病毒活性.用MTT法研究了鸡血藤水提物和有效成分的细胞毒性和抗柯萨奇B3病毒活性,CC50分别为725.88,179.17 μg/ml,IC50分别为87.17,9.14 μg/ ml,TI 分别为8.32,19.60.阳性对照为利巴韦林(Ribavirin)的CC50为4 900 μg/ml,IC50为156.2 μg/ml,其TI为31.4.结论 鸡血藤有效成分在体外能明显抑制柯萨奇B3病毒的致细胞病变作用.     

用AFLP结合免疫纳米磁珠技术富集分离BPDE-DNA片段

目的应用AFLP结合免疫纳米磁珠分离技术富集、分离与BPDE相互作用的DNA片段,从而为筛选BPDE致癌相关基因提供条件。方法应用AFLP技术和免疫纳米磁珠分离相结合技术获得差异片段,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳及硝酸银染色观察。结果不同的选择性扩增引物组合均可得到清晰的多态性电泳图谱,以P1T2、P1T4、P1T3、P2T1、P3T4、P4T1、P5T2等组合扩增出的条带最多,均在60条左右,多态性丰富。对差异片段进行回收和PCR再扩增,再经琼脂糖凝胶电泳证实有回收产物出现,回收PCR再扩增片段与回收前的片段大小一致,成功富集、回收了差异片段。结论AFLP结合免疫磁珠分离技术可以分离富集BPDE-DNA片段,可作为筛选BPDE致癌相关的特异或易感基因的一种方法。     

珠江水域微生物的分布特征

目的 了解珠江水域指示菌和常见致病菌的时空分布规律以及相关性.方法 分别于2010年7月(丰水期)和2011年3月(枯水期)采集珠江水域上游、中游和下游5个断面的岸边和中心共20个水样,分别对水样中5种卫生指示菌(菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希菌和肠球菌)和4种常见致病菌(沙门菌、志贺菌、弧菌和大肠杆菌O157∶H7)进行检测和分析.结果 珠江水域中除菌落总数和肠球菌外,各项指示微生物指标均呈现下游＞中游＞上游的规律.水体上、中和下游总大肠菌群(4.20× 103～9.49× 104 cfu/ml)、粪大肠菌群(1.84×103～3.09×104 cfu/ml)和大肠埃希菌(6.45× 102～ 1.30× 104 cfu/ml)均存在统计学差异(P＜0.05).珠江岸边指示菌和致病菌均高于中心,丰水期的指示菌和致病菌均不低于枯水期,但差异均无统计学意义(P＞0.05).除菌落总数外,总大肠菌(P＜0.05)、粪大肠菌群(P＜0.01)、大肠埃希菌(P＜0.01)和肠球菌(P＜0.01)均与致病菌总数呈正相关.结论 珠江水域从上游至下游其微生物污染逐渐加重,指示菌与致病菌呈一定的相关性.     

细菌耐药基因在斑马鱼体内转移规律的初步研究

目的初步研究耐药基因在斑马鱼体内转移和扩增规律。方法构建RP4质粒介导的耐药基因在斑马鱼肠道内转移模型并采用选择性平板筛选和qPCR技术研究斑马鱼粪便中耐药菌和耐药基因的体外排出量随时间的变化规律。结果细菌培养结果显示,粪便中耐药菌的数量大于供体菌数量,接合子最多时可占粪便中全部可培养细菌总数的12%。qPCR检测结果显示,粪便中耐药基因的相对表达量大于供体耐药基因的相对表达量,产生的接合子的相对数量可高达15%。结论本研究条件下,粪便固有细菌可获得耐药基因,耐药基因在斑马鱼肠道内发生了转移和扩增。     

海河流域水体诺如病毒与新型指示微生物的相关性研究

目的探讨海河流域诺如病毒与新型指示微生物——通用拟杆菌的相关性。方法于2013年12月—2014年11月对天津海河流域水中的粪大肠菌群、F(+)噬菌体、通用拟杆菌3项指示微生物和沙门菌、诺如病毒2项致病微生物进行监测。结果粪大肠菌群浓度为0~6.85×10~4 CFU/100 ml,F(+)噬菌体浓度为0~7.70×103 PFU/L,通用拟杆菌浓度为0~6.07×10~6copies/ml,沙门氏菌检出率为30.95%,诺如病毒检出率为27.38%。统计学分析显示,粪大肠菌群与沙门菌具有相关性(r=0.243,P0.05),与诺如病毒没有相关性;通用拟杆菌与诺如病毒具有相关性(r=0.289,P0.01),与沙门菌没有相关性;F(+)噬菌体与沙门菌和诺如病毒均没有相关性。结论海河流域中诺如病毒与通用拟杆菌具有相关性,而与粪大肠菌群无相关性。     

生物防护服穿透性噬菌体指标筛选

目的研究PhiX-174、f2、MS2 3种噬菌体的生物学性质,为生物防护服抗微生物悬浮液穿透性能评价选择合适的指示噬菌体。方法从噬菌体形态大小、繁殖能力、耐压性及其所形成噬菌斑的特征等方面,对PhiX-174、f2、MS2 3种噬菌体的生物学性质进行观察。结果 PhiX-174形成噬菌斑最大、形成时间最短,培养5 h后,噬菌斑直径可达2.57 mm,繁殖能力最强,4 h即可迅速增殖到1.67×1010 PFU/mL,最终可达1012 PFU/mL以上,3种噬菌体大小相当,直径均为25 nm左右,远小于人类血源性病毒和呼吸道病毒,均有一定耐压力,在1.75、3.5、7、14、20 kPa下作用5 min后,均未见噬菌体滴度明显减少。结论噬菌体PhiX-174最适于作为生物防护服尤其高危生物污染环境作业人员防护服抗病毒效果评价的指示病毒。     

昆明系小鼠被动吸烟肺肿瘤模型的建立

目的参照国外采用吸烟导致小鼠肺肿瘤的实验模型程序和方法,应用昆明系小鼠,探索建立吸烟导致肺肿瘤模型的可行性以及应用此模型评价抗氧化剂对其干预效果。方法将200只小鼠随机分为正常对照组、烟草暴露组、槲皮素干预组和维生素E干预组,除正常对照组外,余3组均在染毒柜中被动吸烟染毒5个月,恢复4个月后处死,进行病理学和抗氧化指标的检测。槲皮素(80 mg.kg-1.d-1)和维生素E(1 00 mg.kg-1.d-1)分别加入饲料中摄入体内,连续喂养9个月。结果烟草暴露组小鼠肺肿瘤发病率为43.5%,每只肺表面的平均肿瘤结节数为1.00±0.29,明显高于对照组(11.8%,0.18±0.09)和维生素E干预组(17.9%,0.32±0.16),差异有显著性(P<0.05);维生素E干预效果最好。维生素E干预组血清中维生素E浓度明显高于其它各组,维生素E干预组活性氧(ROS)活性明显低于其它各组,差异均有显著性(P<0.05)。结论此次应用国产昆明系小鼠成功地建立了烟草暴露导致肺肿瘤模型,但其稳定性需进一步实验验证。应用昆明系小鼠所建立的肺肿瘤模型将为肺肿瘤发生过程及防治措施的研究提供了基础。     

Antiviral effects of aqueous extract from Spatholobus suberectus Dunn. against coxsackievirus B3 in mice

Objective  

To investigate the antiviral effects of the aqueous extract of Spatholobus suberectus Dunn. (A.E.), a Chinese medicinal herb, against coxsackievirus B3 (CVB3).