大肠埃希菌O157:H7的胶体金免疫渗滤法检测

肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli，O157：H7)是新出现的肠道致病菌，它可引起人腹泻、出血性肠炎、血栓性血小板减少性紫癜和溶血性尿毒综合征。自1982年在美国报道出现此菌引起的食物中毒以来，已在世界范围内多次暴发流行，我国也于1986年在徐州发现感染病人。近年来，由该菌引起的食物中毒有明显上升趋势，建立一种快速、特异性强、     

天津某小区生活饮用水中胞外耐药基因污染分析

目的 研究天津某小区生活饮用水中胞外耐药基因的污染特征,阐明生活饮用水中胞外耐药基因污染规律.方法 于2015年12月至2016年11月,利用自行研制的核酸吸附柱富集生活饮用水中的游离核酸,采用实时荧光定量PCR技术检测tetC、ermB、ampC、sul1、qnrA、aadA、catA1和katG 8种胞外耐药基因的浓度.结果与结论在12份水样中,tetC的检出率最高,约为66.7%;其次为sul1和qnrA(41.7%)、ampC(33.3%)、aadA(16.7%)、catA1和katG(均为8.33%),ermB未检测出.生活饮用水中以sul1胞外耐药基因的污染最严重,达(1.27±0.04)×105 GC/L.各胞外耐药基因出现最大浓度的时间主要集中在6月,且3月和6月检测出的胞外耐药基因种类最多,达5种.天津某小区生活饮用水中存在多种胞外耐药基因的污染.     

嗜肺军团菌的银加强滴金免疫法测定

嗜肺军团菌（Legionella pneumophilla，Lp）是军团菌属（Legionella）的代表种。该菌为兼性细胞内致病菌，主要感染肺组织。由于发病症状和体征没有特异性，很难与普通肺炎相鉴别，而难以诊断。分离培养是军团菌检测的金标准，但培养条件苛刻。因此，建立军团菌的快速检测方法具有重要的现实意义。目前，嗜肺军团菌的快速检测主要是基于PCR的方法和血清学方法。PCR方法特异性强，快速，但需要昂贵的仪器（PCR仪），影响在基层的应用普及；血清学方法如ELISA、RIA等多为操作繁琐，费时费力。针对以上不足。本实验室建立一套嗜肺军团菌的滴金免疫测定法（dot immunogold filtration assay，DIGFA）。现报告如下。     

二氧化氯后接游离氯顺序消毒对大肠杆菌的灭活研究

目的 探究低浓度二氧化氯预处理对游离氯灭活大肠杆菌的协同机制,为改进现有消毒工艺,提高消毒效果提供理论依据.方法 以大肠杆菌为指示生物,磷酸盐缓冲液为介质,二氧化氯及游离氯为消毒剂,分别研究单一消毒剂消毒(0.005～0.05 mg/L二氧化氯作用30 min或0.05 mg/L游离氯作用120 min)、顺序消毒(0.02 mg/L二氧化氯作用5min,0.5 mg/L游离氯作用120 min)、传统顺序消毒(0.02 mg/L二氧化氯作用5 min后,离心重悬,0.5 mg/L游离氯作用120min)以及混合消毒方式(同时加入0.02 mg/L二氧化氯和0.5 mg/L游离氯作用120 min)对大肠杆菌的杀灭效果.结果 大肠杆菌的细胞壁通透性在0.02 mg/L二氧化氯作用后增加,但其可培养性未见改变.在pH 7.1、20℃条件下,CT值小于0.46 mg/L·min时,灭活大肠杆菌的效果依次为:顺序消毒＞传统顺序消毒＞混合消毒＞单一消毒;而当CT值大于0.46mg/L· min时,消毒效果依次为顺序消毒＞混合消毒＞传统顺序消毒＞单一消毒.当CT值大于1.4 mg/L· min时,顺序消毒、传统顺序消毒以及混合消毒方式的消毒效果无明显改变.顺序消毒灭活大肠杆菌效果随温度升高而升高;在酸性及中性条件下对大肠杆菌的灭活效果差别不明显,但都强于碱性条件下的消毒效果.结论 低浓度二氧化氯的作用增加了大肠杆菌细胞壁通透性,从而加快了后续游离氯进入细胞内的速率,提高了对大肠杆菌的灭活效果.     

多重耐药质粒RP4在膜生物反应器中的水平转移

目的研究多重耐药质粒RP4在膜生物反应器(MBR)中水平转移情况,进而预测MBR处理含有耐药基因污水的生态风险。方法向正常运行的MBR中接种E.coli K12(RP4)Rif,利用含有不同抗生素的营养琼脂培养基选择性平板计数,得出可培养接合子数量和接合转移率;并利用实时定量PCR方法检测污泥中耐药质粒RP4;同时监测MBR对NH4+-N、CODCr的去除效率和污泥浓度(MLSS),以评价MBR运行效能。结果接种供体菌后,可培养接合子数量、转移频率由0逐渐升高,接种供体菌后第9 d,接合子数量增加到3.38×104cfu/ml、接合转移率达1.70×10-3/cell;随后,可培养接合子数量、接合转移率都呈现波动下降(于第23天分别下降至2.55×102cfu/ml、3.20×10-5/cell);与实时定量PCR检测结果基本一致。供体菌的引入对MBR去除NH4+-N、CODCr的效率都有一定影响,即先降低后逐渐升高,污泥浓度由2200 mg/L逐渐降低至约1100 mg/L。结论实验过程中,RP4质粒在反应器中发生了较高频率的接合转移,并对反应器NH4+-N、CODCr的去除效率都产生影响。     

基于功能化纳米粒子的大肠杆菌O157:H7检测技术研究

目的建立一种无需增菌即能快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7的新方法。方法制备一种表面包被大肠杆菌O157:H7单克隆抗体的纳米级免疫磁颗粒,用于样品中菌体的富集和分离;制备一种表面分别标记有大肠杆菌O157:H7多克隆抗体和生物素化核酸探针的胶体金颗粒;利用生物素-亲和素-酶系统信号放大作用,达到对目标菌的快速、灵敏检测。结果该方法可在1h内完成菌体的分离和检测,检测限为10cfu/ml。结论该检测体系基于功能化纳米粒子进行菌体分离及信号放大,具有检测时间短、灵敏度高、操作简便等优点,在环境、食品检测,临床诊断和流行病监测中具有广泛的应用前景。     

促细菌快速生长培养基的研究

目的在大肠杆菌生长的培养基中加入某些促生长作用的物质,确定其最适浓度,最终获得促进大肠杆菌快速生长的复合培养基。方法采用平板计数法对各促细菌生长物质(A,B,C,D,E)的浓度进行筛选,采用正交法确定各筛选物质促生长作用的适宜浓度,进一步采用平板计数法研究促细菌生长培养基的促生长作用。结果正交法确定的复合培养基成分配方为A:0.3%;B:0.3%;C:0.5mmol/L;D:0.5mmol/L;E:0.1mmol/L;与对照组相比,大肠杆菌在复合培养基中各生长期菌数明显增加,在连续培养6、8、10、12h后,细菌生长菌落数分别达到对照组的7.80、6.00、6.74、4.19倍;同时,在金黄色葡萄球菌培养及某河水的细菌总数检测过程中,复合培养基也显示出有明显促细菌生长作用。结论本研究配制的3种复合培养基具有明显的促细菌生长作用。     

汶川映秀镇灾后终末消毒效果评估

目的评估映秀镇灾后终末消毒效果和消杀药物残留对当地环境所造成的影响。方法采用现场感官检查、采样检测等方法,对消杀处理后的环境卫生、空气微生物含量、蚊蝇密度、鼠密度、土壤中残留消杀药物等指标进行了评估。结果镇内空气质量较好,空气中微生物含量明显低于镇外居民安居点,无明显异味。蚊、蝇、鼠密度均低于国家环境标准;土壤中未检测到余氯和杀虫药残留。镇周8个水源的水质全部达到国家生活饮用水水源水质二级标准。结论汶川地震重灾区在开展了大规模消毒、杀虫和灭鼠之后,废墟内多数部位没有异常气味;空气中微生物和蚊、蝇、鼠密度均控制在国家标准之内,环境中无消杀药物残留。     

葡聚糖纳米磁颗粒的制备及表征

目的制备一种性能良好的葡聚糖纳米磁颗粒,为磁颗粒的进一步应用奠定基础。方法采取化学沉降法制备6种磁颗粒,利用透射电镜和扫描电镜、光子相关光谱法、Benedict实验及红外吸收光谱法等仪器和方法对磁颗粒的理化性质进行了检测。结果制备出一种粒径约为50nm,磁性核心为5nm,大小均一,具有核壳结构和超顺磁性颗粒(剩磁Br=0.375emu·g-1);在pH4~10范围内颗粒结构都能保持稳定,保存1年检测结果无明显变化。结论成功制备出葡聚糖纳米磁颗粒,该磁颗粒具有很好的悬浮稳定性和磁响应性。     

1994-2003年我国766起细菌性食物中毒分析

目的 探讨我国细菌性食物中毒的发生规律和流行特点，为预防细菌性食物中毒的发生提供参考。方法 将检索的1994—2003年766起细菌性食物中毒个案按照中毒种类、中毒人数、死亡人数、中毒时间、地域分布、中毒场所、中毒食物、中毒原因等方面从其中提取信息，然后将相关内容逐一归类详细分析。结果 766起细菌性食物中毒以副溶血性弧菌发生的起数最多，占20．2％；中毒人数以沙门菌所占比例最大，占20．4％；肉毒梭菌引起的死亡人数最多，占70．5％，引起的死亡率也最高，达16．5％；大多数细菌性食物中毒发生在5月至10月，但肉毒梭菌引起的食物中毒主要发生在1月和2月；766起细菌性食物中毒有31．2％发生在餐饮服务场所，但每种细菌的多发场所有着显著的不同；沿海省份以副溶血性弧菌为主，占24．4％，内陆省份以沙门菌最多，占22．4％。食物载体难以确定。结论 细菌性食物中毒有其规律性，根据其内在的特点，采取相应的预防措施，将有助于预防其发生。