In vitro effect of p21^WAF-1／CIPI gene on growth of human glioma cells mediated by EGFR targeted non-viral vector GE7 system

To construct the EGFR targeted non-viral vector GE7 system and explore the in vitro effect of p21^WAF-1/CIP1 gene on growth of human glioma cells mediated by the GE7 system. Methods: The EGFR targeted non-vi-ral vector GET gene delivery system was constructed. The malignant human glioma cell llne U251MG was transfected in vitro with β-galactosidase gene( reporter gene) and p21^WAF-1/CIP1 gene (therapeutic gene) using the GET system. By means of X-gal staining, MTS and FACS, the transfection efficiency of exogenous gene and apoptosis rate of tumor cells were examined. The expression of p21^WAF-1/CIP1 gene in transfected U251MG cell was examined by immunohistochemitry staining. Results: The highest transfer rate of exogenous gene was 70%. After transfection with p21^WAF-l/CIP1 gene,the expression of WAF-1 increased remarkably and steadily; the growth of U251MG cells were inhibited evidently.FACS examination showed G1 arrest. The average apoptosis rate was 25.2%. Conclusion: GE7 system has the ability to transfer exogenous gene to targeted cells efficiently, and expression of p21^WAF-l/CIP1 gene can induce apoptosis of glio-ma cell and inhibit its growth.     

含大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶基因的假型逆转录病毒的构建及包装

研究将大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因应用于基因治疗。构建，包装含ＣＤ基因的假型逆转录病毒。构建含ＣＤ基因的逆转录病毒重组表达载体ＰＬＣＤＳＮ基础上，以重组表达载体ＰＬＣＤＳＮ转染包装细胞ＰＡ３１７，ＰＬＣＤＳＮ整合人ＰＡ３１７染色 。结果：ＣＤ基因获得表达且包装出具有感染能力的假型逆转录病毒。以该假型逆转录病毒染ＮＩＨ／３Ｔ３细胞，逆转录病毒重组表达载体ＰＬＣＤＳＮ整合入ＮＩＨ／３Ｔ３细胞染色体     

含人N-ras反意基因的假型逆转录病毒对裸小鼠体内人肝癌移植瘤生长和N-ras表达的作用

含人反意基因的假型逆转录病毒已在许多实验室构建,并用于抑制病毒的或细胞的基因表达。抑制基因活性是一个新的遗传分析方法,其机制是通过一条互补于正常RNA的反意链与有意义链的结合而影响其功能,它的优点是能根据目的基因的转录产物设制有效的反意RNA,研究该基因在细胞中的生物学作用。RNA逆转录病毒因其独特性结构和繁衍形式,已成为理想的基因转移载体。含人     

5—FC对经基因修饰而表达胞嘧啶脱氨酶的哺乳类细胞杀伤作用

为获得５┐氟胞嘧啶（５┐ｆｌｕｏｒｏｃｙｔｏｓｉｎｅ，５┐ＦＣ）对含ＣＤ基因哺乳类细胞的“诱导”杀伤表型数据。方法小鼠成纤维细胞ＮＩＨ／３Ｔ３、大鼠神经胶质瘤细胞Ｃ６和包装细胞ＰＡ３１７，经基因修饰而表达非哺乳类酶－胞嘧啶脱氨酶（ｃｙ┐ｔｏｓｉｎｅｄｅａｍｉｎａｓｅ，ＣＤ）。结果体外，ＣＤ基因的表达几乎不影响细胞的生长速率。薄层层析分析（ＴＬＣ）表明，被含有重组逆转录病毒载体ｐＬＣＤＳＮ的假型病毒感染的哺乳类细胞及包装细胞的抽提液可将胞嘧啶代谢成脲嘧啶。５┐ＦＣ对有ＣＤ活性的细胞产生致死性细胞毒性。结论本实验支持了在５┐ＦＣ参与下，于肿瘤细胞内选择性表达ＣＤ的基因治疗方案。     

卵巢癌药物敏感基因治疗实验研究——(Ⅰ)体外实验

为探索Ⅰ型单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因／羟甲基无环鸟苷（ＨＳＶ１－ｔｋ／ＧＣＶ）药物敏感基因治疗系统应用于卵巢癌,本文进行了一系列实验研究,这里先介绍体外实验结果。材料与方法１．卵巢上皮癌细胞系ＡＯ来自中国科学院上海细胞库;病毒生产细胞（ＶＰＣ）...     

靶向性非病毒载体GE7系统治疗人脑胶质瘤的体内外研究

目的：研究EGFR介导的靶向性非病毒载体GE7系统治疗人脑胶质瘤的体内外效应。方法：组建GE7基因转移系统，分别与βgal报道基因、p21WAF1/CIP1基因组成复合物，体外转导U251MG细胞，分析GE7系统导入效率；MTS法观察细胞生长曲线；FACS分析细胞周期变化。建立裸鼠皮下荷瘤模型，分别经瘤内和尾静脉注射导入DNA载体复合物，观察肿瘤生长抑制率。结果：GE7系统体外导入率最高达70%，细胞生长曲线呈低平型，细胞周期阻滞于G1期，平均凋亡指数为25.2%；瘤内注射和尾静脉注射抑瘤率分别为56.5%和60.2%。结论：GE7系统具有较高效率和靶向性，经肿瘤局部和全身途径导入p21WAF1/CIP1基因，均可诱导凋亡，抑制肿瘤生长。     

外源基因在在体周围神经的表达

我们应用浸泡过含外源基因质粒溶液的医用缝线,缝合兔坐骨神经,旨在探讨应用外源基因缝线法将外源基因直接转染入在体周围神经并得以表达的可行性,现报道如下。一、材料与方法1.动物:大耳白兔64只,雌雄不限,体重2.0～2.5ｋｇ,随机分为对照组和实验组各32只。2.质粒的提取和纯化:应用的质粒为带有Ｅ.ｃｏｌｉｌａｃＺ基因(编码β半乳糖苷酶)的真核表达载体ＰＣＭＶβ。质粒的提取与纯化依据Ｓａｍｂｒｏｏｋ等[1]方法进行,以大规模碱裂解法提取质粒,聚乙二醇沉淀法纯化质粒ＤＮＡ,依据260ｎｍ和280ｎｍ的光吸收,应用分光光度法测定质粒ＤＮＡ…     

固崩汤治疗功能性子宫出血的临床观察

功能性子宫出血是妇科常见病、多发病之一,属中医“崩漏”范畴。从1986～1998年我们采用自拟固崩汤治疗本病210例,取得了满意疗效,并设对照组47例进行观察,现总结如下。1 一般资料 将257例患者随机分为治疗组和对照组。治疗组210例,其中年龄20～35岁37例,36～45岁79例,46～55岁94例;对照组47例,其中20～35岁6例,36～45岁13例,46～55岁28例。均根据病史、妇科检查、诊刮和刮出物的病理学检查,确     

个体化护理干预对高风险孕妇产前诊断依从性的影响

目的 研究给予唐氏筛查高风险孕妇个体化护理干预对诊断依从性的影响。方法 选取 2021 年 1 月至 2022 年 12 月在我 院产前诊断中心就诊的唐氏筛查高风险孕妇 60 例为研究对象。按照就诊时间段的不同，将孕妇分为对照组（31 例）和试验组 （29 例）。对照组采用常规护理干预方法；试验组采用个体化护理干预方法。分析对比两组的产前诊断实施、预约情况，不良 结局以及护理满意度。结果 试验组的产前诊断预约率、产前诊断实施率及护理满意度均显著高于对照组（P<0.05）。试验组不 良结局发生率显著低于对照组（P<. 05）。结论 个体化护理干预应用于唐氏筛查高风险孕妇的产前诊断，能提高孕妇的产前诊 断依从性，改善孕妇不良妊娠结局，提高护理满意度。