非清髓性外周造血干细胞移植后早期急性肾损伤的多中心临床研究

目的 观察白血病患者非清髓性外周造血干细胞移植后早期急性肾损伤（AKI）的患病率、危险因素及对生存的影响。 方法 对象为2002年1月至2007年5月,在东南大学附属中大医院、南京医科大学附属淮安医院、江苏大学附属镇江第一人民医院3个移植中心接受非清髓性外周造血干细胞移植的白血病患者。观察移植前、移植后100 d内肾功能改变情况及并发症,并随访观察1年。AKI分为3期：1期,Scr升高 ≥26.5 μmol/L,或升高50%~200%;2期,Scr升高>200%~300%;3期,Scr升高>300%,或升高>353.6 μmol/L（急性升高≥44.2 μmol/L）。 结果 62例患者移植后造血均顺利恢复。18例（29%）患者出现不同程度的AKI,其中1期11例,2期6例,3期1例。Logistic多因素回归分析表明,人类白细胞抗原（HLA）不完全匹配、移植后并发症（感染、肝静脉闭塞病、急性移植物抗宿主病）是AKI的独立危险因素,其优势比OR（95% CI）分别为3.6（1.1~13.0）、12.1（2.4~62.4）。移植后1年患者总的病死率为27.4%,且病死率随着AKI的严重程度逐渐增加（log-rank检验,P < 0.01）。 结论 AKI是非清髓性外周造血干细胞移植后的常见并发症之一。HLA不完全匹配、移植后并发症是发生AKI的独立危险因素。AKI对患者移植后1年生存率有重要影响。     

急性白血病颅内出血危险因素探讨

感染和颅内出血为急性白血病的严重合并症。近年来 ,抗感染措施不断加强 ,而颅内出血的治疗尚缺乏有效手段 ,使之成为急性白血病的主要死因。故分析颅内出血的危险因素 ,降低颅内出血的发生率 ,意义重大。本文分析了我科 1979～ 1998年收治的急性白血病 16 0例 ,其中 2 3例并发颅内出血 ,我们探讨了其危险因素 ,并提出一些防治措施。1　资料和方法1.1　病例资料　我科 1979～ 1998年收治急性白血病16 0例 ,其中男性 96例 ,女性 6 4例 ;年龄 7～ 76岁 ,其中≥ 6 0岁 32例 ,<6 0岁 12 8例。并发颅内出血 2 3例 ,其中男性 15例 ,女性 8例 ;年龄…     

长链非编码RNA DSCAM-AS1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨长链非编码RNA DSCAM-AS1在乳腺癌患者组织中的表达差异及临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR法检测60例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织中DSCAM-AS1的表达水平,同时分析乳腺癌组织中DSCAM-AS1水平与临床病理参数的相关性;采用生物信息学分析Kaplan-Meier Plotter网站在线分析差异表达的DSCAM-AS1对乳腺癌患者总体生存率的影响;采用受试者工作特征曲线 (ROC) 评价组织中DSCAM-AS1水平在乳腺癌诊断中的敏感度和特异性。结果 乳腺癌组织DSCAM-AS1 (0.473±0.073) 水平高于癌旁组织 (0.057±0.008,P=0.000),组织中DSCAM-AS1的表达水平与患者淋巴结转移、雌激素受体(ER)、HER-2、TNM分期及ki-67表达存在相关性 (P分别为0.022、0.029、0.014、0.043、0.013),而与年龄和孕激素受体(PR)无显著相关性。生存曲线分析提示高表达DSCAM-AS1的乳腺癌患者总体生存率降低,特别是ER阳性的乳腺癌患者,总体生存率显著下降 (P=0.007)。ROC曲线分析组织中DSCAM-AS1对乳腺癌的诊断价值结果显示,DSCAM-AS1的曲线下面积均>0.5,且特异性>98%。结论 DSCAM-AS1在乳腺癌患者组织中表达上调,且与淋巴结转移、TNM分期、ER、HER-2及ki-67表达水平有关,对乳腺癌有较高的诊断价值。     

5溴汉防己甲素逆转多药耐药的体内体外研究

本研究旨在探讨5一溴汉防己甲素（BrTet）和汉防己甲素（Tet）对K562／A02细胞多药耐药性的逆转作用。采用MTT法检测阿霉素（ADM）联合应用BrTet、TeL,对K562／A02细胞和K562细胞增殖的影响;采用流式细胞术（FCM）检测细胞内ADM浓度和P糖蛋白（P—gp）的表达;采用RT—PCR测定细胞mdrl基因mRNA表达水平。建立裸鼠皮下移植瘤模型,比较BrTet、Tet在体内的逆转耐药作用。结果发现,BrTet在0．25、0．5以及1μmol／L浓度条件下对K562／A02细胞多药耐药性的逆转作用呈剂量依赖性。流式细胞术检测提示,BrTet显著增加K562／A02细胞内ADM浓度,并呈剂量依赖性,同时抑制P—gp的表达,下调mdrl mRNA的表达。在荷瘤鼠模型中,BrTet明显增加ADM对K562／A02移植瘤的抗肿瘤作用,从单用ADM的5．8％上升至26．1％,而在K562移植瘤中没有显著差异。结论：BrTet在体内体外试验中均显示出显著的逆转MDR作用,其活性可能与抑制P—gp的过度表达和增加抗肿瘤药物的积聚有关。     

针对VEGF自分泌链的白血病治疗策略

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)定位于人染色体6p21．3，由8个外显子和7个内含子组成，基因全长28kb，编码分子量为34～45kD的反向平行同型二聚体糖蛋白，属于胱氨酸结生长因子超家族。由于mRNA剪切方式的不同，VEGF至少可产生7种氨基酸数量不同的蛋白异构体，在胚胎发育、创伤愈合、炎症反应、肿瘤生长与转移等生理病理过程中起重要作用。VEGF有5种高亲和力特异性受体，分别是fms样酪氨酸激酶(Fit-1，又称VEGFR1)、     

宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中变异型分化抗原簇44(17)的表达及意义

目的 分析变异型分化抗原簇44(17)(CD44v17)在宫颈上皮内瘤变(CIN)向宫颈癌发生、发展中的表达及意义,探讨其与CIN及宫颈癌之间的关系.方法 实时荧光定量PCR检测CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ级和宫颈鳞状细胞癌组织中CD44v17、基质金属蛋白酶9(MMP9)和细胞核增殖相关抗原Ki67的表达;CD44v17siRNA干扰宫颈癌HeLa、SiHa细胞RNA后,检测CD44v17、MMP9和Ki67的表达;以CD44v17基因慢病毒颗粒作用于荷瘤裸鼠,分析CD44v17 siRNA对裸鼠成瘤能力的影响.结果 CD44v17的表达水平在CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ级和宫颈鳞状细胞癌组织中逐渐升高;以正常宫颈组织为对照,CD44v17、MMP9、Ki67表达水平在CIN Ⅰ级组织无明显上升(P＞0.05),在CIN Ⅱ、CIN Ⅲ级和宫颈鳞状细胞癌组织明显上升(P＜0.05);将CD44v17 siRNA转染宫颈癌细胞后,MMP9、Ki67的表达明显降低(P＜0.01);CD44v17基因慢病毒颗粒作用于荷瘤裸鼠后,肿瘤体积、质量均明显降低(P＜0.01),荷瘤裸鼠的成瘤能力降低.结论 CD44v17在CIN向宫颈癌发展的过程中可能有一定的促进作用,有望作为判定CIN是否具有恶变潜能的指标之一.     

YB-1对乳腺癌MCF-7细胞CD44表达和细胞侵袭及成球能力的影响

目的:观察Y-盒结合蛋白1(Y-box binding protein-1,YB-1)对乳腺癌MCF-7细胞CD44表达及细胞迁移、成球能力的影响.方法:应用基因重组技术将YB-1基因及其siRNA构建于腺病毒载体pADeasy-1,重组腺病毒及腺病毒空载体转染乳腺癌细胞株MCF-7;通过蛋白质印迹法,RT-PCR和免...     

CD44变异体(CD44v17)在食管癌中的表达及意义

目的:探讨CD44v17在食管癌中的表达及意义.方法:根据本实验室在MCF-7/Adr中发现的一种CD44剪切拼接变异体CD44v17(基国库序列号FJ216964)设计特异性引物,采用实时定量PCR法检测了73例食管癌组织及相应癌旁组织CD44v17 mRNA的表达情况,分析CD44v17 mRNA表达与食管癌临床生...     

靶向mdr-1基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定

本研究构建并鉴定靶向mdr-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体。根据Genbank数据库提供的mRNA序列,选择设计3个能转录短发夹RNA(shRNA)的DNA序列,体外分别合成3对互补并编码mRNA基因的特异性shRNA序列的寡核苷酸,克隆到经BamHI和HindⅢ双酶切线性化的pGCsilencer人U6启动子质粒载体中;为了确定利用酶切和测序鉴定所构建的重组载体是否正确,采用脂质体转染的方法将构建好的3个重组载体(pGY1-1,pGY1-2,pGY1-3)导入慢性髓系白血病耐药细胞株K562/A02,采用实时PCR方法检测转染细胞的mdr-1基因表达,Western-blot检测P-gp表达量的变化。结果表明:应用PCR电泳图谱和测序证实了克隆RNAi打靶序列完全正确,而且该载体又同时表达GFP标记基因,用于测定转染效率。分别转染pGY1-1,pGY1-2,pGY1-3后K562/A02细胞的mdr-1基因表达和P-gp表达水平下降,证明shRNA可以特异性沉默mdr-1基因。结论:靶向mdr-1基因shRNA真核表达载体构建成功,为进一步研究mdr-1基因在K562/A02细胞中的作用奠定了实验基础。