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目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(KDR)双靶向阻断对人膀胱癌T24细胞和裸鼠膀胱癌移植瘤生长的抑制作用.方法 构建VEGF siRNA和可溶性KDR(sKDR)表达质粒的共转染细胞系,采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪测定T24细胞的增殖和凋亡,采用免疫组化法检测裸鼠移植瘤组织中VEGF的表达、瘤间质微血管密度(MVD)和细胞DNA拓扑异构酶(Topo)Ⅱα的表达,采用原位末端标记(TUNEL)法检测裸鼠移植瘤中肿瘤细胞的凋亡.结果 MTT法检测结果显示,VEGF siRNA、sKDR和联合应用组细胞的生存率分别为56.3%±8.3%、42.6%±13.8%和32.5%±4.3%,均明显低于阴性对照组(97.3%±11.6%,P<0.0001).流式细胞仪分析显示,VEGF siRNA、sKDR和联合应用组在G.期前均出现亚二倍体凋亡峰,凋亡率分别为5.1%±0.9%、4.2%±0.5%和8.8%±0.7%,均高于阴性对照组(0.9%±0.4%,P<0.05),而且联合应用组的凋亡率还明显高于VEGF siRNA和sKDR组(P<0.01).体内实验结果显示,VEGF siRNA、sKDR和联合应用组的肿瘤生长均受到不同程度的抑制,联合应用组从16 d开始肿瘤体积即明显小于阴性对照组(P<0.05),28 d起肿瘤生长几乎处于停滞状态.免疫组化分析显示,联合应用组肿瘤组织中VEGF的表达水平为54.37±5.28,显著低于阴性对照组(141.66±8.59,P<0.0001);瘤间质MVD仅为8.22±3.79,明显低于阴性对照组(61.76±5.28,P<0.0001)和sKDR组(19.46±4.16,P=0.0089);瘤细胞增殖指数为1.5%±0.7%,显著低于阴性对照组(11.8%±5.2%,P<0.0001);而凋亡率达到67.2%±8.5%,明显高于阴性对照组(8.7%±2.7%,P<0.0001)、VEGF siRNA组(54.3%±4.8%,P=0.0492)和sKDR组(52.3%±6.4%,P=0.0293).结论 VEGF siRNA与sKDR单独应用均可不同程度地抑制肿瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡,但二者联合应用时靶向双位点的治疗效果更为显著. 相似文献
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优选和冻融对精子顶体反应及顶体反应释放的顶体酶活性影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究优选和冻融对人精子顶体反应(acrosome reaction,AR)和AR释放的顶体酶活性影响。方法:10例健康生育男子精液,用Percoll密度梯度分离法和上游法优选精子;用3种冷冻保护剂进行冷冻;用孕酮诱导AR;采用FITC-PSA荧光染色法分析AR;采用分光光度比色法测定顶体酶活性。结果:Percoll法和上游法优选后,顶体反应率和AR释放的顶体酶活性均较优选前显著升高(P<0·05),但Percoll法和上游法优选组间比较差异不显著(P>0·05)。精子冻融后甘油组和GYC组顶体反应率和AR释放的顶体酶活性均下降,与冷冻前比较差异均有显著性(P<0·01),GYCG组与冻融前组比较,差异不显著(P>0·05)。结论:优选后顶体反应率及AR释放的顶体酶活性增加,GYCG对精子顶体反应和AR释放的顶体酶活性有保护作用。 相似文献
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活性氧、白细胞和精子凋亡关系的探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨活性氧与精子凋亡的相关性及其影响.方法 分析21例男性不育患者样本,活性氧含量采用分光光度比色法检测,瑞-姬染色检测精子凋亡率,采用Percoll法进行精子优选.结果 本底水平活性氧含量、白细胞受激发后产生活性氧含量、白细胞和精子受激发后产生活性氧含量与精子凋亡率均有显著正相关性(P<0.05,P<0.01);Percoll优选后,加入H2O2组精子凋亡率显著高于对照组(P<0.001),且0.2 mM过氧化氢组精子凋亡率均高于相应的0.02 mM过氧化氢组(P<0.05).结论 精子凋亡率与ROS浓度有正相关关系,外加H2O2增高,精子凋亡率增高. 相似文献
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精液pH值直接影响到精液质量[1 ,2 ] ,但有关精液pH值对男性不育的影响报道较少。本研究对40 2 2例男性不育门诊就诊者进行精液pH值检测,并与精液液化时间进行分析,以探讨精液pH值与精液液化时间关系。现报告如下。1 材料与方法1·1 临床资料 40 2 2例男性不育就诊患者均来自1995~2 0 0 2年吉林大学临床特种疾病检测站不育诊室就诊患者,年龄2 4~40岁,身体健康,婚后正常性生活2年以上不育患者,无外伤及遗传性疾病家族史,无性功能障碍病史,体检未发现明显睾丸、附睾及输精管异常者。1·2 标本采集 禁欲3~7d后来我室手淫或用取精器取… 相似文献
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目的:研究短期糖尿病雄性大鼠前列腺氧自由基和抗氧化物酶的动态变化。方法:48只Wistar雄性大鼠随机分为6组(每组8只)。1组腹腔注射枸椽酸缓冲液作为正常对照组, 其余5组腹腔注射链脲菌素(STZ)制成糖尿病模型, 分别观察1d(D1)、3d(D3)、5d(D5)、7d(D7)和14d(D14), 取前列腺组织制备组织匀浆, 分别测定组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的水平。结果:糖尿病组前列腺MDA, GSH-px和NO水平显著高于正常组;SOD、GSH、GST和NOS水平呈现先升高后下降的趋势。结论:短期糖尿病雄性大鼠前列腺组织处于氧化应激状态。 相似文献
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青春期糖尿病雄鼠血清和心、肝、肾组织细胞酶活力变化比较 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 :探讨糖尿病对青春发育期大鼠血清和心、肝、肾组织细胞代谢的影响。方法 :分糖尿病 ( D)、胰岛素及时治疗 ( DCIR)、胰岛素延迟治疗 ( DDIR)、对照 ( C)组。采用日本日立牌 71 50型生化自动分析仪测试。结果 :D组显著升高的有 GPT,AKP,GOT,LAP和 CK,心、肾组织中显著下降的有 GOT,ICDH,CK,心组织中还有 GPT和 GLDH,肾组织中还有 LAP,肝组织中显著下降有GOT,LAP和 CK,胰岛素替代治疗上述指标有明显改善。结论 :糖尿病对青春期大鼠血清及心、肝、肾组织多种细胞酶代谢有显著影响 ,胰岛素及时治疗效果显著优于延迟治疗。 相似文献
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目的:研究精子核成熟度与精液参数关系。方法:49例精液标本,其中生育组15例,不育组34例。应用精子质量自动检测系统(CASA)进行精子密度、活力分析,伊红染色进行活率分析,联苯胺染色评价精液白细胞,采用精子形态检测系统下人工修正方法分析精子形态,用苯胺蓝染色评价精子核成熟度。结果:不育组苯胺蓝染色阳性率显著高于生育组(P<0.05)。形态异常精子组中头部异常、颈部异常、尾部异常、无定型、其它畸形精子组苯胺蓝染色阳性率均显著高于形态正常精子组(P<0.05)。苯胺蓝染色阳性精子率与形态正常精子率、活力、活率均呈显著负相关(P<0.05);苯胺蓝染色阳性精子率与精子密度、精液白细胞浓度均无显著相关性。结论:精子核成熟度异常可导致男性生育力下降,精子核成熟度是评价男性生育力重要参考指标。 相似文献
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目的:观察精索静脉曲张(VC)患者精子形态学参数改变。方法:106例VC患者精液样本及对照组26例健康男性精液样本,均按严格标准,采用计算机辅助分析系统下人工修正的方法对精子形态进行分析。结果:VC组形态正常精子百分率显著低于对照组(P<0.001),头部缺陷精子百分率、含胞质小滴精子百分率均显著高于对照组(P<0.001,P<0.05);与对照组相比,VCⅡ度和Ⅲ度组形态正常精子百分率均显著降低(P<0.05,P<0.001),而对照组与VCⅠ度组形态正常精子百分率差异无显著性(P>0.05)。VCⅢ度组形态正常精子百分率显著低于Ⅱ度组(P<0.001);与VCⅠ度组相比,VCⅡ度、Ⅲ度组形态正常精子百分率均显著降低(P<0.05,P<0.001);VC组畸形精子指数和精子缺陷指数也显著高于对照组(P<0.001)。结论: VC可导致精子形态改变,使精子畸形程度加深。形态正常精子百分率随VC程度加深而降低。 相似文献
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1077例男性不育患者精子顶体酶活性及其影响因素分析 总被引:4,自引:2,他引:2
本研究对1077 例不育门诊病人的精子进行顶体酶活性检测,并分析了某些因素对顶体酶活性的影响。研究发现,精子顶体酶活性呈正偏态分布,65 .5 % 低于正常值(18 μ I U/106 精子) ;相关检验表明,顶体酶活性与精子活率、活力呈显著正相关,与精子畸形率和镜下精液白细胞呈显著负相关;卡方检验表明,顶体酶活性与支原体感染、精浆抗精子抗体无关;秩和检验表明,顶体酶活性降低组精液粘度高于顶体酶活性正常组( P< 0 .0005) 。 相似文献