2例异体手移植术后受者T细胞亚群与CD3~+HLA-DR~+细胞水平的动态观察

目的　研究异体复合组织移植 手移植术后病人外周血T淋巴细胞亚群及CD3+ HLA DR +T细水平的动态变化。方法　用流式细胞术测定了 2例异体手移植术后不同时间外周血CD3+ 、CD3+ CD4+ 、CD3+ CD8+ 、CD3+ HLA DR+ (活化T细胞 )细胞百分率 ,及CD4/CD8比值 ,以病人术前一周结果作对照。结果　使用免疫抑制剂后 ,于术后第 1日CD3+ 、CD3+ CD4+ 、CD3+CD8+ 、CD3+ HLA DR+ 细胞水平 ,CD4/CD8比值都开始降低 ,以 3～ 5日为最低水平。术后 8日 ,上述指标逐渐回升 ,至 15日后基本趋于平稳 ,但CD3+ 、CD3+ CD4+ 细胞及CD4/CD8比值仍明显低于术前 ,而CD3+ CD8+ 、CD3+ HLA DR+ 细胞水平则高于术前。结论　异体复合组织 手移植术后病人外周血T淋巴细胞亚群及CD3+ HLA DR+ 细胞水平的变化与单一组织器官移植 (肾移植 )术后稳定期的变化一致 ,也与病人术后的稳定病情相吻合。     

时间分辨免疫荧光法定量检测癌胚抗原(CEA)试剂临床应用研究

目的对自制时间分辨免疫荧光法定量检测癌胚抗原(CEA)试剂盒进行临床应用研究,为该试剂盒临床应用及临床疗效评价提供科学依据。方法收集血清标本326份,用自制试剂盒按试剂盒操作说明书对血样进行测定,并以化学发光法(R oche)为对照方法,W ALLAC公司的CEA时间分辨免疫测定药盒(A u toDELF IATMhCEA)作为复核试验,获取相关目标实验数据,并计算得“真实性”和“可靠性”等统计学数据。结果以化学发光法为对照试验,其阳性符合率为95.83%,阴性符合率为98.73%,检验无显著性差异;自制试剂盒的定量测定值与化学发光法的测定值较为一致,相关系数达0.93,相关性好。结论试剂盒检测性能与现在临床广泛应用的方法相仿,能满足临床应用的需要。     

共刺激信号动态监测在异体双手移植中的临床意义

背景:异体手移植已经从实验室走向临床。目的:探讨异体双手移植中共刺激信号动态监测的临床意义。设计:病例-对照观察。单位:南方医科大学南方医院创伤骨科。对象:于2001-09/12选取南方医科大学南方医院创伤骨科收治的异体双手移植患者1例,并选择15例健康成人为对照组。方法:患者术前未用免疫抑制剂采血1次;术前使用免疫抑制剂后采血2次;术中接动静脉前各采血1次;术后第1周每日采血1次,第2周隔日采血1次,三,四周每周两次,后每周1次共2个月。其中术后1周为诱导期,余为维持期。对照组健康成人抽取外周静脉血2mL,20g/L乙二胺四乙酸抗凝,应用流式细胞仪动态监测T细胞表面共刺激分子(CD28,CD54,CD11a)变化。主要观察指标:移植前后T淋巴细胞表面共刺激分子的变化。结果:异体双手移植患者的3种共刺激分子(CD28,CD54,CD11a)变化一致,诱导期较术前下降[(9.84±5.28)%,(55.50±3.62)%;(71.03±5.33)%,(95.10±1.26)%;(9.40±9.17)%,(29.70±3.23)%],维持期维持于较低水平[(22.54±6.56)%,(91.28±8.12)%,(11.22±4.08)%]。结论:动态监测异体肢体移植患者外周血中共刺激信号可以帮助观察肢体移植术后患者的免疫反应强度,对于指导免疫抑制药物的应用以及预测和诊断排斥反应具有重要参考价值。同时,通过处理共刺激信号的方法诱导免疫耐受在异体手移植中具有一定的应用前景。     

临床分离细菌的分布特征及耐药性分析

目的:了解本院临床分离细菌的分布特征及耐药谱,为合理使用抗生素提供依据。方法:大多数分离细菌的鉴定和药物敏感试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工鉴定和Kirby-Bauer法。数据分析用WHONET5.4软件。结果:共分离出3 094株细菌,前3位为铜绿假单胞菌(11.2%)、大肠埃希菌(11.1%)和金黄色葡萄球菌(8.4%)。肠杆菌科耐药率<10%的为亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦,非发酵菌耐药率<10%的为头孢哌酮/舒巴坦。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的检出率为47.5%和55.6%。革兰阳性球菌对万古霉素敏感率100%。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌甲氧西林耐药率为52.1%和74.8%。结论:本院细菌耐药率居高不下,应加强抗生素的合理使用以降低耐药率。     

临床微生物学检验实习生和进修生带教体会

南方医院是南方医科大学附属医院,检验医学科每年接收及培训40多名检验医学专业实习生和进修生。胜任临床微生物学检验室的工作需要掌握较多的基本技能,并灵活运用大量基本理论知识。每届实习生和进修生均反映临床微生物检验室临床分离细菌、真菌的属种繁多,不同类型标本的检验流程各异,难以记清,学习起来很吃力。近几年作者对实习生和进     

DC2.4表面分子与RelB基因表达的关系

目的 探讨DC2.4表面分子表达水平与RelB基因表达间的关系.方法 用RPMI 1640完全培养液培养DC2.4细胞系,光学显微镜观察培养细胞的形态特征;透射电镜观察DC2.4的细胞结构;流式细胞术分析DC2.4的表面标记(MHC-Ⅱ、CD86和CD40);RT-PCR检测DC2.4的RelB表达水平.结果 光镜观察DC2.4细胞表面有明显的树突状突起,形态极不规则;透射电镜显示DC2.4细胞内含许多质地均匀的脂滴,可见吞噬小泡样的结构.流式细胞术显示MHC-Ⅱ类分子和CD40呈低水平表达,而CD86分子却呈高水平表达;RT-PCR结果显示RelB呈低水平表达,与骨髓源性DC中的未成熟状态DC的RelB表达水平接近.结论 DC2.4具有强吞噬功能,其表面CD40分子和细胞内RelB基因均呈低水平表达,提示DC2.4是一种未成熟状态的细胞系.     

《临床微生物学检验》虚拟教学实验室建设及应用

紧密结合《临床微生物学检验》工作实际需求,应用3Dmax技术、视频拍摄、Flash动画技术,并整合相关文字、表格、图谱、电子讲稿和电子教材等材料,建立临床细菌学检验、临床真菌学检验和临床病毒学检验虚拟教学实验室,用于实验课教学、实习带教、交流与答疑。     

佛波酯对人外周血DNT细胞表面抗原检测的影响及检测方法的探讨

目的探讨佛波酯（PMA）对人外周血淋巴细胞中TCRαβ＋CD4-CD8-T细胞（DNT细胞）表面抗原检测的影响及检测方法的探讨。方法分离人外周血单个核细胞,分别在激活前后对细胞进行TCRαβ、CD4和CD8荧光单抗标记,流式细胞术计数DNT细胞。结果 A方法（先激活,再标记）,淋巴细胞表面抗原CD4分子显著下调,DNT细胞与TCRαβ＋CD4＋CD8＋T细胞、TCRαβ-CD4-CD8-T细胞和TCRαβ-CD4＋CD8＋T细胞间无法设门,与正常对照比较,DNT细胞计数显著增加;B方法（先标记,再激活）,DNT细胞与其他细胞群设门清晰,与正常对照比较,对DNT细胞计数无明显影响;C方法（先标记,再联合激活）,DNT细胞检测结果与B方法相同。结论采用A方法（常规方法）,不能对活化后的DNT细胞进行准确计数;采用B和C方法（改进方法）,可以对活化后的DNT细胞进行准确计数,避免了磁珠或（和）流式分选,为其计数和表面抗原检测提供了一种新的简便方法。     

加强检验与临床沟通，提高检验质量的体会

临床实验室的功能为在受控的情况下,收集、处理、分析血液、体液和其他组织标本并将结果报告给申请者。同时提供诊断和治疗有益的参考信息^[1]。实验室质量管理分为分析前、分析中、分析后三个阶段。分析前阶段是从医生选择检验项目提出检验申请直至将检验样本送至实验室,它包括临床医生正确的选择检验项目、患者的准备以及标本的采集、运送和保存,     

医院感染病人中段尿和血液中病原菌的种类及耐药性分析

目的了解医院感染病人中段尿和血液中分离细菌和念珠菌的种类及耐药性，为合理使用抗生素提供依据。方法大多数分离细菌的鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪，少数利用手工和K—B法鉴定。念珠菌利用显色平板分离和鉴定，K—B法药敏。结果分离于中段尿的1063株病原菌中最常见的是大肠埃希菌（39．6％）、粪肠球菌（9．2％）、肺炎型肺炎克雷伯菌（8．2％）、念珠菌属（11．6％）；G-杆菌中耐药率低于30％的为美洛培南、亚胺培南、头孢哌酮／舒巴坦、阿米卡星、头孢他啶和哌拉西林／他唑巴坦；G＋球菌中万古霉素和替考拉宁的敏感率均为100％：念珠菌中两性霉素B和制菌霉素的耐药率均为0，对其他药物也均低于10％。分离于血液的543株病原菌中最常见的是大肠埃希菌（16．6％）、凝固酶阴性葡萄球菌（16．4％）、铜绿假单胞菌（11．6％）、肺炎型肺炎克雷伯菌（8．3％）和金黄色葡萄球菌（7．6％）；G-杆菌中耐药率低于30％的为美洛培南、亚胺培南、头孢哌酮／舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林／他唑巴坦、头孢他啶和氨曲南；G＋球菌中万古霉素和替考拉宁的敏感率均为100％。结论应重视对怀疑泌尿系感染和败血症的病人进行细菌真菌培养鉴定及药敏试验，以合理使用抗生素。