负载肝素酶复制缺陷型腺病毒的包装及鉴定

目的包装负载人肝素酶(hpa)全长cDNA的复制缺陷型腺病毒载体(Adhpa)。方法将肝素酶正义腺病毒穿梭质粒pDC315hpa与腺病毒包装质粒pBHGloxDeltaE1,3Cre共转染人胚肾293细胞(HEK293),包装Adhpa,并大量扩增,收集纯化。对纯化后的Adhpa进行滴度测定、感染性鉴定、电镜鉴定及双引物PCR鉴定。结果包装成功的腺病毒载体具有良好的感染性,纯化浓缩后的病毒滴度可达5×1010pfu/ml。电镜证实病毒浓缩液中存在病毒颗粒,并可见病毒在HEK293细胞中复制。PCR双引物鉴定Adhpa可扩增出Ad及hpa特异片段,而对照则不能扩增出hpa片段。结论成功包装了负盘。     

F68及其联合DMSO对脐血造血细胞的低温保护作用

目的研究普鲁兰尼克(F68)及其联合DMSO在-80℃条件下对脐血造血干细胞的低温保护作用,为临床应用提供依据.方法脐血造血细胞冻存30、60、90 d后复苏,应用台盼蓝拒染率、集落形成试验、3H-TdR掺入率等,测定经F68保护体系冻存的脐血活力,并与目前通用的冷冻保护剂二甲亚砜及CP-1进行了对比研究.结果在-80℃条件下,F68对脐血造血细胞具有明显的冷冻保护作用,并与DMSO具有协同保护效果,联合F68及DMSO的保护体系可使MNC、CFU-GM的平均回收率及台盼蓝拒染率在第90天时分别达到(83.4±6.3)%,(68.8±7.9)%, (92.5±5.1)%,优于目前通用的细胞冻害保护液CP-1及DMSO.90 d的冻存期内,脐血细胞活力无明显下降.结论 F68及其与DMSO组成的冻存方案对脐血造血干细胞具有良好的冻存保护效果.     

乙酰肝素酶在肿瘤发生、发展、转移及康复预后中的作用

细胞外基质(extrcellular matrix，ECM)和基底膜(Basement membrance,BM)是肿瘤细胞侵袭及转移的屏障。糖氨聚糖是此屏障的主要成分之一，它的主要成分为硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparin sulphate proteoglycan,HSPGs)。肝素酶是近年来发现并克隆成功的酶，与肿瘤侵袭和转移相关，是裂解连接于HSPGs核心分子上硫酸肝素的一类葡糖苷酸内切酶。肝素酶在转移性肿瘤组织中表达程度与患的预后具有相关性，癌症患检测肝素酶的表达将对手术范围的选择有参考价值，术后监测肝素酶的表达水平，有望成为判断患的复发、预后、生活质量的一个新的指标。因此，对乙减肝素酶的结构、功能、基因定位、分子生物学特征在正常组织和肿瘤组织中的表达及其作用机制等方面进行详细综述。对肝素酶抑制剂及其临床应用前景进行简要概括。     

腹水脱落细胞中肝素酶的表达对良恶性腹水鉴别诊断的价值

肝素酶是近年来发现的能够降解基底膜及细胞外基质的关键酶．具有促进肿瘤细胞向周围组织间隙侵袭的作用。我们前期研究表明，肝素酶在胃癌组织中高表达，能够促进胃癌的血管生成，浸润与转移，是胃癌患者预后不良的一个指标。在腹水脱落细胞中肝素酶是否表达，能否用于鉴别腹水的性质鲜见报道。我们采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测肝素酶在腹水脱落细胞中的表达，探讨肝素酶在良恶性腹水鉴别诊断中的意义。     

胃癌组织c-met蛋白表达的意义及其与微血管密度的关系

目的探讨c-met蛋白在胃癌组织中的表达与胃癌临床病理特征及其肿瘤微血管密度的关系。方法对47例手术切除的胃癌组织采用免疫组织化学法检测c-met蛋白的表达及其肿瘤微血管密度。结果胃癌组织中c-met蛋白表达阳性率为85．1％，c-met阳性率与胃癌肿瘤的直径、有无淋巴结转移、浸润深度、TNM分期、是否有淋巴管及静脉癌栓有关；c-met阳性组胃癌微血管密度高于对照组。结论c-met蛋白的表达促进了胃癌的生长、浸润及转移，并促进胃癌的血管生成，与胃癌预后不良及临床病理特征有重要关系。     

猫贲门失弛缓症模型肌间神经丛的超微结构研究

目的应用苯基二甲基十四烷氯化铵(BAC)建立猫贲门失弛缓症模型,研究其下食管括约肌(LES)肌间神经丛的微观结构。方法10只猫随机分为两组,模型组胃镜下LES处环形注射BAC,对照组注射生理盐水,8周后检测食管动力学变化,然后应用电子显微镜观察LES肌间神经丛的形态学变化。结果模型组LES压力较对照组明显升高(P<0.01),两组食管收缩幅度无显著性差异;神经终末内有多种不同类型的突触小泡,两组神经末梢内清亮小泡的数量无显著差异(P>0.05),模型组突触小泡的数量较对照组明显减少(P<0.05)。结论肌间神经丛的突触小泡的减少可能是贲门失弛缓症的发病原因之一。