内皮祖细胞培养上清对高氧暴露下Ⅱ型肺泡上皮细胞增殖和分化的影响

 目的: 研究高氧暴露对内皮祖细胞(EPCs)旁分泌功能的影响,并探索EPCs旁分泌因子对高氧暴露下Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)功能的影响。方法: 分离大鼠骨髓来源的单个核细胞,EGM-2MV培养基培养7~10 d获取EPCs,并对其进行鉴定。分别在空气条件下及60%的氧浓度条件下培养EPCs,收集空气组EPCs培养上清(E-CM-RA)和高氧组EPCs培养上清(E-CM-O₂),ELISA法检测2组上清中VEGF、FGF10、EGF及PDGF-BB的表达水平。分离纯化培养成年大鼠的AECⅡ,常规培养至第2 天,分为4组:(1)RA组:空气条件下培养;(2) O₂组:60%的氧浓度条件下培养;(3) O₂+E-CM-RA组:在O₂组的基础上,在培养基中加入E-CM-RA;(4) O₂+E-CM-O₂组:在O₂组的基础上,在培养基中加入E-CM-O₂。分别在干预12 h、24 h、2 d和3 d,用MTT法及细胞计数法检测4组AECⅡ的增殖情况;在24 h、2 d和3 d用real-time PCR法检测4组AECⅡ中SP-C和AQP5的mRNA表达量。结果: E-CM-RA中VEGF及FGF10的表达水平明显高于E-CM-O₂(P<0.05)。干预不同时间,各组间AECⅡ的活力及数量均有明显差异(P<0.01)。与RA组相比,O₂组AECⅡ各时点的活力明显下降,数量明显减少(P<0.05);与O₂组相比,各时点O₂+E-CM-RA组AECⅡ的活力明显增高,数量明显增加(P<0.05);但O₂+E-CM-O₂组与O₂组AECⅡ的活力及数量均无显著差异。干预24 h、2 d及3 d,4组间AECⅡ的SP-C与AQP5 mRNA的表达量均具有明显差异(P<0.01)。与RA组相比,O₂组AECⅡ中SP-C的mRNA表达量显著降低(P<0.01),AQP5的mRNA表达量显著升高(P<0.01)。与O₂组相比,在24 h、2 d及3 d时, O₂+E-CM-RA组和O₂+E-CM-O₂组AECⅡ中SP-C的mRNA表达量显著增高(P<0.05),而在2 d及3 d时,AQP5的mRNA表达量显著降低(P<0.01)。结论: EPCs可分泌肺发育相关生长因子VEGF和FGF10,高氧暴露抑制EPCs表达 VEGF和FGF10。高氧暴露抑制AECⅡ的增殖,降低AECⅡ表达SP-C mRNA,促进AECⅡ表达AQP5 mRNA。EPCs培养上清能够改善高氧暴露对AECⅡ增殖的抑制作用,维持AECⅡ本身特性,抑制AECⅡ向AECⅠ分化。而高氧暴露部分削弱了EPCs培养上清的这种作用,这可能与高氧暴露抑制EPCs表达肺发育相关因子VEGF和FGF10有关。     

罕见亚型大疱性表皮松解症3例及家系调查

【摘要】 目的 报道3例罕见亚型遗传性大疱性表皮松解症（EB）。方法 收集先证者及其亲属的临床资料,全外显子测序筛查先证者致病基因,采用Sanger或qPCR测序对患者及其亲属进行突变验证。结果 例1表现为背部线状红色瘢痕,患者及有相似临床表现的母亲、无症状女儿均携带COL7A1基因c.4573G>A（p.Gly1525Arg）突变。例2表现为全身网状色素沉着,偶伴手足水疱,携带KRT5基因c.74C>T（p.Pro25Leu）新发突变。例3表现为曝光部位为主的色素异常伴左手不完全并指,先证者携带FERMT1基因2-6号外显子纯合缺失突变,分别来自无症状父母。例1诊断为显性痒疹型营养不良型 EB, 例2诊断为斑驳色素型单纯型EB, 例3诊断为Kindler EB。结论 EB临床异质性高,基因检测对于罕见亚型EB的明确诊断非常重要。     

气囊尿管留置导尿52例护理体会

自1999年以来，我们应用气囊尿管为52例患者行留置导尿，效果满意。现将护理体会报告如下。     

血吸虫病粪便孵化法装置改进——集蚴试管法

为了提高粪便孵化法的检出率,便于观察毛蚴,我们研制了一种浓集毛蚴试管。 一、浓集毛蚴试管的构造及装置 (一)浓集毛蚴试管由二根管组成。浓集管长70mm,直径13mm,管底呈锥形。在浓集管的中部连接一根弧形管与孵化瓶相接,此管上部尖细弯曲,(与浓集管相通处孔径为6mm);下部垂直,接孵化瓶端管径为16mm,通过带孔的橡皮塞插入250ml的三角烧瓶内。     

中西医结合治疗门脉高压——痔出血23例

痔疮是临床常见病、多发病，出血是其常见的症状之一。痔出血常与其他疾病，比如肝硬化——门脉高压症并存。Hartck（1986）根据门静脉及其属支无静脉瓣的特点，指出任何可能引起门静脉内压增高的因素均可导致痔静脉曲张而形成痔。Simanowski（1997）指出，门脉高压合并痔病患者由于其凝血机制异常，其出血的严重程度远高于非肝硬化人群，也可能由于门静脉循环供血增加，导致出血增多。它出血的特征是，第一次出血经止血后，半年内定会复发出血，而且第二次出血发生率要比第一次高。有鉴于此，在临床上对于门脉高压——痔出血的患者，必须给予相应的关注。     

腹腔镜下根治性全膀胱切除术治疗膀胱癌32例

膀胱癌是临床常见的肿瘤之一,在我国男性膀胱癌发病率居全身肿瘤第八位,女性排在第十二位以后。近年来发病率有逐渐升高的趋势,目前以手术治疗为主。腹腔镜技术是近几年临床应用极为广泛的技术,但由于该术式操作复杂,难度高,     

ELISA定量测定AFP试剂盒的线性及标准问题

ＥＬＩＳＡ定量测定ＡＦＰ试剂盒的线性及标准问题毛爱珍许斌（江苏省肿瘤医院检验科，南京２１０００９）关键词线性标准酶联免疫吸附法甲胎蛋白我们对市场上７种国产、进口ＡＦＰ定量ＥＬＩＳＡ试剂盒进行了比较，发现各试剂盒的线性及所设标准存在差异。１试剂及来源７...