pTAT—HA质粒转化菌保存效果的实验研究

目的探讨保存pTAT—HA质粒转化菌简单有效的方法。方法配制LB细菌培养基,将pTAT—HA质粒转化至DH50α感受态细胞,筛选成功转化子并扩增培养,将转化菌接种在不同浓度甘油菌液和新鲜牛奶中,-70℃保存6个月和1年后分别复苏,计算存活率,分析保存效果。结果保存6个月以30％甘油、40％甘油和新鲜牛奶保存效果较好,保存1年仅见30％甘油、40％甘油和新鲜牛奶冻存管有存活菌。结论pTAT-HA质粒转化菌宜使用30％-40％甘油菌液或新鲜牛奶保存。     

翼点入路对Heubner‘s回返动脉的显微解剖及临床意义

目的：探讨翼点入路对Heubner's回返动脉的显微解剖及临床意义。方法：对10具（20侧）红色乳胶颈内动脉和椎动脉灌注头颈部标本Heubner's回返动脉在手术显微镜下解剖观测。结果：Heubner's回返动脉起始部多位于大脑前动脉的前交通动脉平面之远、近侧2mm范围内，而后依次是发自A1和A2。起始部常与大脑前动脉平行伴行，其行程多位于大脑前动脉的上方。其管径及走行方向的变异易被误认为大脑前动脉。结论：Heubner's回返动脉出现恒定，但管径、数目及走行可有变异。经翼点入路在大脑前动脉下臂解剖可减少损伤Heubner's回返动脉。     

锁骨下动脉的分支类型(并讨论颈横动脉、颈浅动脉和肩胛背动脉的命名问题)

我们用解剖的方法对82具成人尸体锁骨下动脉及其分支进行了观察,得出以下初步结果。 1.锁骨下动脉起点非常恒定。 2.锁骨下动脉分型以第Ⅱ型(四支型)为最多见,其次是第Ⅲ型(五支型)。各亚型中又以Ⅱ_1型为多。 3.椎动脉恒起于锁骨下动脉第一段最内侧(3例来自主动脉引。胸廓内动脉在三段中均可发出,但以自第一段甲颈干相对缘起始者多见。少数与甲颈干共干起始。甲颈干基本由颈横动脉、肩胛上动脉、甲状腺下动脉合干而成,但其分支型式变异较大。甲状颈干分裂而缺如的情况少见。肋颈干在三段中均可发出,但左侧第一段发出者较多,右侧多起于第二段。 4.颈横动脉自甲颈干起始者最多。亦可直接从锁骨下动脉第二、第三段发出。颈横动脉不存在的情况约占30％。肩胛上动脉多起于甲颈干,其次是锁骨下动脉。亦有自胸廓内动脉发出者。 5.颈浅动脉以起自颈横动脉者多见,不发自颈横动脉者约占1/3,直接从锁骨下动脉发出者很少见。颈浅动脉发支供应斜方肌上部及肩胛提肌。 6.肩胛背动脉多自颈横动脉发出。其次是起于锁骨下动脉第二、第三段。单独自锁骨下动脉起始的情况在国人约近1/3,其分支主要供应菱形肌及斜方肌下部。 7.为了避免供应斜方肌、菱形肌的血管在命名上的混乱和重复,建议将颈横动脉的浅支称为颈浅动脉,深支称为肩胛背动脉,而不用浅、深支或升、降支的名称。如果颈浅和肩胛背动脉分别起始则无颈横动脉。     

TAT-XIAP融合蛋白对学习记忆障碍大鼠的影响及其机制

目的 探讨TAT-XIAP融合蛋白对学习记忆障碍大鼠的影响及其与大脑海马神经元凋亡的关系,为学习记忆的深入研究提供实验依据.方法 利用基因工程技术制备具有生物学活性的TAT-XIAP融合蛋白,通过D-半乳糖(D-Gal)腹腔注射和Aβ1-42海马注射建立学习记忆障碍大鼠模型,将大鼠随机分为TAT-XIAP组(左侧脑室注射TAT-XIAP融合蛋白,每天80 mg/kg,共3d)和模型组(侧脑室注射等体积PBS)各30只,采用水迷宫评价大鼠的学习记忆能力,TUNEL法检测大鼠海马神经元凋亡.结果 1TAT-XIAP组大鼠在各象限入水至爬上平台的时间均明显缩短,平均值为(48.31±9.44)s,明显低于模型组的(87.80±10.32)s(P＜0.05);TAT-XIAP组大鼠穿越平台的次数、在原平台象限游程百分比、在原平台象限时间百分比均明显增加,分别为(4.78±0.93)次、(47.39±5.84)％、(48.43±5.75)％,与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).2 TAT-XIAP组大鼠海马凋亡神经元明显减少,凋亡神经元计数为(16.37±3.15)个/mm2,模型组为(54.66±7.20)个/mm2,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TAT-XIAP融合蛋白可明显改善学习记忆障碍大鼠学习记忆功能,其机制可能与大鼠海马神经元凋亡减少有关.     

pTAT-XIAP融合蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

目的构建pTAT-XIAP原核表达载体,以获得pTAT-XIAP融合蛋白;为其用于神经系统疾病的治疗奠定基础。方法体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,转入大肠杆菌表达菌株BL21plysS进行诱导表达。SDS-PAGE及Western blot法鉴定融合蛋白。结果表达产物经SDS-PAGE及Western blot分析后,于64 kD处有一明显表达条带,与理论结果相符。结论成功构建了pTAT-XIAP原核表达载体并成功表达出目的融合蛋白,该载体成功表达pTAT-XIAP融合蛋白,有望用于临床神经系统疾病的治疗。     

XIAP在鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2和5-8F中的表达与研究

目的比较CNE1、CNE2及5-8F鼻咽癌细胞株中X链锁调亡抑制蛋白(XIAP)的表达差异。方法体外培养鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2及5-8F,采用RT-PCR法检测CNE1、CNE2及5-8F细胞株中XIAP基因表达情况。结果 XIAP基因在CNE1低表达,而在CNE2和5-8F高表达。结论 XIAP与NPC的恶性程度和转移潜能有关。     

X-连锁凋亡抑制蛋白与肿瘤关系的研究进展

凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein．IAP）是一类在结构上具有同源性的细胞内源性凋亡抑制蛋白家族,它们能够对抗各种凋亡诱导因素,抵抗细胞凋亡。X-连锁凋亡抑制蛋白（X—linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP）是IAP家族中最有效的caspase抑制物,近年来发现XIAP在肿瘤中高表达,与肿瘤的分化程度及预后有关。已成为肿瘤基因治疗的新靶点和研究热点。本文就XIAP与肿瘤关系的研究进展作一综述。     

带筋膜血管的股方肌骨膜骨瓣移植的应用解剖研究

为了设计带筋膜的股方肌骨膜骨瓣，在３１侧下肢标本上对股方肌的形态及带筋膜的股方肌骨膜骨瓣的血管进行了解剖观察。股方肌的止点为肌性，止点宽４．５０±０．６４ｃｍ，肌蒂长３．５９±０．５８ｃｍ。股方肌骨膜骨瓣的血供主要来自旋股内侧动脉深支、臀下动脉的大转子支及筋膜的血管。根据解剖观察，带筋膜的股方肌骨膜骨瓣是治疗股骨颈骨折及股骨头缺血性坏死较理想的组织瓣。     

pTAT-XIAP重组表达载体的构建与酶切鉴定

目的 探索pTAT-XIAP融合表达载体的构建方法.方法 在体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-HA/XIAP融合表达载体,将pTAT-HA/XIAP质粒转化至DH5α感受态细胞, 筛选培养转化成功的单克隆,NcoI/XhoI双酶切后琼脂糖电泳鉴定.结果 转化pTAT-HA/XIAP质粒的DH5α在含氨苄青霉素的LB固体培养基上呈分散菌落生长.电泳结果显示重组pTAT-HA/XIAP质粒约4 500 bp,酶切后可观察到PTAT-HA质粒约3 000 bp,XIAP目的 基因条带1 494 bp,pTAT空质粒约3 000 bp,条带大小与质粒图谱一致.结论 将大鼠XIAP基因成功插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,提取的质粒可用于下游分子生物学实验.