Zeste基因增强子同源物2抑制剂GSK126体外对急性白血病和淋巴瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨Zeste基因增强子同源物2(EZH2)抑制剂GSK126体外对急性白血病和淋巴瘤细胞增殖和细胞凋亡的作用。方法采用CCK-8法测定不同浓度GSK126作用不同时间对人T淋巴细胞白血病CEM细胞、人急性单核细胞白血病U937细胞和人伯基特淋巴瘤Raji细胞增殖的影响,采用Annexin V/PI双染法测定GSK126对细胞凋亡的影响,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测GSK126对EZH2、bcl-2、bcl-xL基因表达的影响。结果作用24、48、72 h后,与相应阴性对照组(0 μmol/L)比较,5、10、15、20、25 μmol/L GSK126对CEM细胞,5、10、15、20 μmol/L GSK126对U937细胞和5、10、15、20、25、30 μmol/L GSK126对Raji细胞的增殖均具有抑制作用,且呈浓度和时间依赖性(均P<0.05)。GSK126作用于CEM、U937、Raji细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为(13.46±0.83)、(11.65±1.02)、(15.00±0.19)μmol/L。与相应阴性对照组(0 μmol/L)比较,8、12、16 μmol/L GSK126均可不同程度促进CEM、U937细胞凋亡,凋亡率差异均有统计学意义(F=167.995,P<0.01;F=158.400,P<0.01);而Raji细胞,16 μmol/L GSK126较阴性对照组有更高的细胞凋亡率,差异有统计学意义(t=47.998,P<0.05)。8、12、16 μmol/L GSK126均较阴性对照组降低CEM、U937、Raji细胞EZH2 mRNA的表达水平(F=82.035,P<0.05;F=252.712,P<0.05;F=690.536,P<0.01)和凋亡相关基因bcl-2、bcl-xL mRNA的表达水平(bcl-2:F=1 900.525,P<0.01;F=431.324,P<0.01;F=216.184,P<0.01;bcl-xL:F=256.751,P<0.01;F=147.019,P<0.01;F=209.325,P<0.01)。结论 EZH2对急性白血病和淋巴瘤的发生发展有重要作用,GSK126作为EZH2高选择性小分子抑制剂之一,可为血液系统恶性肿瘤临床用药提供新的可能。     

三氧化二砷、地塞米松和沙利度胺对骨髓瘤细胞U266凋亡及胞浆内Ca2+浓度的影响

为了探讨三氧化二砷(As2O3)、地塞米松(dexamethasone,Dex)和沙利度胺(thalidomide,Thal)诱导骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡时对胞浆内Ca2 浓度([Ca2 ]i)的影响,用含15?S的RPMI1640培养液培养U266细胞并按5×105/(ml.well)接种于24孔板中,分别用不同浓度的As2O3、Dex和Thal干预8小时后收集U266细胞,用荧光显微镜观察细胞凋亡,以AnnexinV-FITC/PI双参数流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,负载Fluo-3/AM荧光素FCM检测[Ca2 ]i。结果显示:①随As2O3、Dex和Thal浓度增加,荧光显微镜下带有荧光信号的凋亡细胞逐渐增多;②As2O3、Dex和Thal作用U266细胞后FCM测得凋亡细胞比例从对照组的0.56%分别升至31.54%、28.35%、21.97%;③As2O3、Dex诱导U266细胞凋亡时[Ca2 ]i升高,升高的程度与药物浓度成正比关系;④Thal诱导细胞凋亡时未观察到[Ca2 ]i有明显改变。结论:[Ca2 ]i的升高是As2O3、Dex诱导U266细胞凋亡的机制之一,Thal诱导U266细胞凋亡与[Ca2 ]i的变化无明显关系。     

多发性骨髓瘤合并JAK2阳性原发性骨髓纤维化1例报告并文献复习

<正>多发性骨髓瘤(MM)是以浆细胞及其前体在骨髓中异常增殖为特征的恶性肿瘤,起源于B细胞生发中心,并具有分化为浆细胞的能力^[1]。原发性骨髓纤维化 (PMF) 是一种Ph染色体阴性骨髓增殖性肿瘤(MPN),起源于可分化的多能骨髓造血干细胞^[2]。临床上MM合并骨髓纤维化(MF)的病人并不少见,但多数为继发性MF(SMF),其发生率为 20.5%^[3]。     

老年人急性淋巴细胞白血病的特点及预后

目的 分析老年急性淋巴细胞白血病(ALL)患者同非老年成年ALL患者临床特征及分子遗传学等方面的差异,进一步探讨老年ALL患者不良预后因子.方法 将收治的279例ALL患者分为老年组(60～79岁)及非老年组(14～ 59岁),分析两组患者的临床特征、实验室指标及相关基因IKZF1、PAX5、NOTCH1、PHF6、SH2B3、LEF1、JAK1的分子遗传学异常,并分析这些指标与临床预后的关系.结果 老年组男性患者比例低于非老年组[42.9 ％(21/49)比61.7％(142/230),P=0.015).老年组B-ALL发生率、费城染色体阳性(Ph+)率及髓系标记CD33阳性率均明显高于非老年组[87.8 ％(43/49)比70.4％(162/230),P=0.009;47.8％(22/49)比27.4％(58/230),P=0.007;56.8％(21/49)比39.0 ％(64/230),P=0.049].老年组ALL患者的淋巴结肿大发生率、总完全缓解(CR)率低于非老年组[20.0 ％(9/49)比38.9 ％(81/230),P=0.016;68.3 ％(28/41)比91.3 ％(178/195),P＜ 0.001].老年组ALL患者3、6、12、24个月总生存(OS)率均低于非老年组(64.6％比84.4％,P=0.001;50.0％比73.8％,P=0.001;29.2％比52.4％,P=0.003;6.2％比26.2％,P=0.003).两组患者的PAX5、NOTCH1、PHF6、SH2B3、LEF1、JAK1基因突变率差异均无统计学意义(均P＞ 0.05).结论 老年ALL患者临床及实验室指标同非老年成年ALL患者存在差异,老年组预后更差,需要个体化治疗,以改善预后.     

格列卫治疗加速期、急变期慢性粒细胞白血病6例报道

2002年4月～2003年3月我院使用格列卫治疗慢性粒细胞白血病(CML)患者加速期2例及急变期4例,取得较好疗效。现将治疗情况总结如下。1 资料和方法1.1 一般资料 6例CML患者中男性4例,女性2例;中位年龄46岁。均为本院门诊及住院患者,经细胞形态学及细胞遗传学或分     

自体外周血造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤4例临床观察

目的:初步探讨自体外周血造血干细胞移植(APBSCT)治疗多发性骨髓瘤(MM)干细胞采集时机,观察其疗效和安全性。方法:4例MM,化疗2～7次后动员。1例复发型,1例并发甲亢,另2例肾小球滤过率减低。动员方案为环磷酰胺(CTX)加重组人粒系集落刺激因子(G-CSF),CTX 2.0 g每日1次,用2天,G-CSF5～10μg/kg,每日1次,WBC≥4.0 × 109/L时开始采集。单个核细胞(MNC)平均为4.09×103/kg,CD34+细胞平均为3.48×10e/kg。造血干细胞冻存采用-80℃低温冰箱直接冻存法。预处理方案为美法仑180 mg/m2分次口服。结果:移植后WBC和血小板计数(BPC)低谷时问平均分别为+7.0天和+8.5天。中性粒细胞绝对计数(ANC)>0.5×109/L和BPC>20 × 109/L,平均为+10.75天。除3例发生呼吸道感染以外,无其他严重的移植相关并发症。移植后骨髓原幼浆细胞、M蛋白、β2-微球蛋白(MG)和C反应蛋白(CRP)多有改善,仅复发型的1例M蛋白反而增高。结论:MM病程早期及避免用美法仑是提高采集效果的重要因素。移植前疾病的状态影响移植效果,病情进展期移植可能疗效差。APBSCT造血重建快,疗效好,无严重的移植相关并发症,MM伴肾损者并非禁忌证。     

大剂量足叶乙甙和G-CSF用于恶性血液病外周血造血干/祖细胞动员

为了观察大剂量足叶乙甙(VP16)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)在恶性血液病人动员采集自体外周血造血干/祖细胞的有效性和安全性,对10例恶性血液病患者(多发性骨髓瘤6例,非霍奇金淋巴瘤4例),第1天用足叶乙甙1.6g/m2静脉持续滴注10小时,第3天起给予G-CSF5μg/kg,每日1次,皮下注射,直至采集结束。结果显示:用VP16后平均第11(9-13)天开始外周血造血干/祖细胞单采,获CD34+细胞9.4×106/kg(4.2-17.3×106/kg),每例CD34+细胞>4.0×106/kg。平均采集次数2.6(1-4)次。1例发生口咽黏膜炎、2例尿道炎、咽喉炎。结论:足叶乙甙1.6g/m2和G-CSF5μg/kg是恶性血液病动员采集自体干祖细胞的有效安全方案。     

LEF1在成人急性淋巴细胞白血病中的突变和表达及其临床意义

淋巴增强因子1（1 ymphoid enhancer factor 1,LEF1 是Wingless-type （Wnt）信号通路中的重要转录因子.本研究旨在探讨成人急性淋巴细胞白血病（acute LymphocyticLeukemia,ALL）中LEF1基因突变、表达特征及其临床意义.采用基因组DNA扩增、测序和荧光定量PCR等方法研究131例初发成人ALL患者中LEF1基因突变和表达,及其与临床预后参数和生存时间的相关性.结果显示,本组131例成人ALL患者中LEF1突变率3.1％（4/131）,均为点突变（位于外显子2和3）;初诊时外周血中位白细胞计数和中位原始幼稚淋巴细胞百分比在LEFl高表达组明显高于低表达组（70.6×109/L vs 26.2×109/L,P=0.010;81.0％ vs 57.0％,P=0.014）;费城染色体阳性ALL和高危患者比例LEF1高表达组显著高于低表达组（66.7％ vs 36.5％,P=0.038;79.2％ vs 56.2％,P=0.044）.结论：LEF1高表达在成人ALL的发病机制中可能具有重要意义.     

基于数据挖掘分析 FOXO1在成熟 B细胞肿瘤中的表达及靶基因预测

目的：利用数据挖掘分析 FOXO1 在B细胞肿瘤中的表达情况,并进一步探讨 FOXO1对 B细胞肿瘤的影响。方法：利用 Oncomine 数据库分析 FOXO1 基因在B细胞肿瘤中 mRNA 水平的变化。通过 BIOGPS分析人体正常组织和其相应的肿瘤组织中 FOXO1 基因的表达差异。利用GEPIA做 FOXO1 基因的表达水平与B细胞肿瘤患者生存期的相关性分析。在 String?DB 数据库中探索 FOXO1 基因在细胞信号转导通路中的位置以及与其关系密切的上下游基因。结果：与正常组织相比,B细胞肿瘤组织中 FOXO1 基因在 mRNA 水平呈低表达,FOXO1 基因的表达水平与B细胞肿瘤患者的总体生存时间无明显相关性（Log?rank P=0.39）。EP300、JUN、MYC、STAT1、FOS、SPI1、E2F1等基因与 FOXO1 有明显或潜在的相互作用。结论：大样本数据挖掘能迅速获取B细胞肿瘤组织中 FOXO1 表达的相关信息,为探索FOXO1在B细胞肿瘤发生发展中的作用提供科学的理论基础。