Mer免疫球蛋白样区原核蛋白表达和单克隆抗体制备

目的利用原核蛋白表达载体,体外表达Mer的IgG样区,并利用此重组蛋白制备抗Mer的单克隆抗体。方法从K562细胞中抽提总RNA,利用RT-PCR扩增Mer的IgG样区片断。经过测序将所得片断与PQE30原核表达载体连接并转化到大肠杆菌M15中,挑选阳性克隆,经诱导和纯化后获得原核蛋白。利用所得的重组蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾脏和小鼠杂交瘤细胞融合制备针对Mer的IgG样区的特异性抗体。利用ELISA方法筛选阳性克隆,Westernblot方法进行验证。结果体外成功表达MerIgG样区的原核蛋白,片断大小经修饰后约为26kd,表达量占菌体总蛋白的15%,经Ni-NTAagrose柱纯化后得到纯化蛋白并免疫Balb/c小鼠。将小鼠脾脏细胞和杂交瘤细胞融合后得到1株特异性抗MerIgG样区的单克隆抗体——SZ-128,Westernblot显示此单抗可以和表达的重组蛋白和Mer胞外区真核蛋白反应。结论成功制备1株抗MerIgG样区的特异性单克隆抗体,为研究Mer的功能提供了有力的工具。     

组合探针荧光原位杂交检测慢性淋巴细胞白血病分子遗传学异常

目的 探讨中国人慢性淋巴细胞白血病(CLL)的分子遗传学特性及其在CLL预后判断中的价值.方法 运用组合探针(LSI D13S319、LSI p53、LSI ATM、CEP 12、LSI MYB、LSI IGHC/IGHV)和间期荧光原位杂交(FISH)技术,前瞻性研究106例CLL患者的的分子遗传学特征.生存分析采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线和Log-rank检验.结果 106例患者中79例(74.5%)存在一种及以上细胞遗传学异常,35例(33.0%)同时检测出2种及以上的异常.其中del(13q14)异常最常见(45.3%),其他依次为+12(25.5%)、IgH基因重排(23.6%)、del(17p13,16.0%)、del(11q23,10.5%)和del(6q23,4.7%)异常.del(13q14)异常的发生率在年龄＜60岁的患者中明显高于≥60岁的患者,差异具有统计学意义(P=0.033);分子遗传学异常与患者性别、Binet分期无明显相关性(P＞0.05).生存分析显示,伴有del(17p13)或del(11q22)异常组患者的生存期最短,单纯具有del(13q14)异常组的生存期最长,差异具有统计学意义(P=0.003).结论 中国人CLL的分子遗传学特性与西方国家的相似,组合探针FISH技术提高了CLL异常染色体的检出率,del(13q14)异常是CLL最常见的染色体异常.     

MDT结合OCM入路人工股骨头置换术治疗高龄股骨颈骨折的临床价值

目的 探讨多学科综合诊疗(multi-disciplinary team, MDT)结合慕尼黑骨外科(orthopdische chirurgie München, OCM)入路人工股骨头置换术治疗高龄股骨颈骨折患者的临床价值。方法 回顾性分析2017年1月~2018年12月南京医科大学第二附属医院收治的高龄股骨颈骨折患者60例,年龄82~94岁,合并两种以上内科疾病,根据治疗方法不同将其分为观察组和对照组,每组各30例。观察组采用MDT结合OCM入路人工股骨头置换术治疗,对照组采用后外侧入路人工股骨头置换术治疗。比较两组的手术时间、Harris评分、疼痛视觉模拟量表(visual analogue scales, VAS)、术中出血量、住院天数、术后并发症等。结果 观察组的住院天数,术后1、6周髋关节Harris评分,术后1、7天疼痛VAS评分分别为8.3±2.7天、66.4±8.8分、80.4±11.5分、2.7±0.8分、1.0±0.4分,均优于对照组(12.4±3.4天、50.1±12.5分、72.5±8.2分、3.6±0.9分、1.5±0.3分),差异均有统计学意义(P均＜0.05),但术后12周两组患者Harris评分比较,差异无统计学意义;手术时间和出血量比较差异无统计学意义。术后观察组出现2例小转子处骨折;对照组有3例假体后脱位以及1例深静脉血栓。结论 MDT结合OCM入路人工股骨头置换术治疗高龄股骨颈骨折患者,具有提高救治效率、降低并发症发生率以及缩短住院天数的优点,具有良好的临床疗效和社会价值。     

丹红注射液对颞叶癫痫大鼠海马可塑性的影响

目的研究丹红注射液对氯化锂-匹罗卡品点燃慢性颞叶癫痫（temporal lobe epilepsy,TLE）大鼠海马神经元及GFAP表达的干预作用。方法建立氯化锂-匹罗卡品点燃颞叶癫痫大鼠模型,将50只造模成功的颞叶癫痫大鼠随机分为颞叶癫痫组（生理盐水10ml/kg腹腔注射）及丹红治疗组（丹红注射液10ml/kg腹腔注射）,另选10只大鼠作为正常对照组;每组大鼠随机分为5个不同时间点：24h、3d、7d、15d及30d。采用尼氏染色及免疫组化染色,检测每组大鼠不同时间点海马CA1区神经元存活数目及GFAP表达。结果与正常对照组相比,颞叶癫痫组大鼠海马CA1区存活神经元数目明显减少,海马GFAP表达显著增多（P〈0.05）;与颞叶癫痫组相比,丹红治疗组大鼠海马CA1区存活神经元数目明显增多,海马GFAP表达显著减少（P〈0.05）。结论丹红注射液可以减轻颞叶癫痫大鼠海马神经元脱失及减少GFAP表达,有助于减轻大鼠发作程度及阻断慢性颞叶癫痫的形成和发展。     

椎动脉先天发育不良致椎-基底动脉供血不足的影像学诊断

<正> 先天性椎动脉发育不良是一种少见的变异,可造成椎-基底动脉供血不足,患者表现出与椎动脉型颈椎病相似的临床症状。目前,国内尚未引起人们重视。本文就该病的影像学诊断进行一定讨论。1 解剖基础 椎动脉起源于锁骨下动脉第一段上壁,发出后经第6颈椎以上横突孔在寰椎侧块后方向内弯曲,穿经枕骨大孔进入颅腔,在脑桥后缘与对侧椎动脉形成椎-基动脉,和颈内动脉形成     

circ_0001246调节miRNA30a对骨肉瘤化疗敏感性影响的机制研究

目的：探讨circ_0001246调节miRNA30a及影响骨肉瘤化疗敏感性的机制。方法：将骨肉瘤细胞随机分为3组,分别置于6孔板中,包括未转染组（空白组）、siRNA阴性对照转染组（NC组）和siRNA转染组（circ_0001246 siRNA转染组）,转染后荧光倒置显微镜观察转染效率,检测各组细胞circ_0001246、miRNA30a的表达,用流式细胞AnnexinV/7AAD双染法检测各组细胞对化疗药物依托泊苷（etoposide ?VP16）的敏感性,荧光素酶报告基因实验验证circ_0001246对miRNA30a的“吸附”作用。结果：circ_0001246 siRNA转染组的细胞miRNA30a表达较NC组和空白组明显上调（P < 0.05）,骨肉瘤中circ_0001246和miRNA30a的表达呈现负反馈。circ_0001246 siRNA转染组细胞凋亡率较NC组和空白组明显升高（P < 0.05）。circ_0001246可以通过直接碱基配对吸附miRNA30a发挥调控作用。结论：circ_0001246是骨肉瘤相关癌基因,靶向抑制骨肉瘤中circ_0001246表达可以增强肿瘤细胞对化疗药物依托泊苷的敏感性,该作用可能是通过circ_0001246的吸附功能负调控miRNA30a表达而实现的。     

高原运动疲劳对大鼠学习记忆能力的影响

目的 研究高原环境下大鼠运动性疲劳后学习记忆能力的改变.方法 健康成年Wistar大鼠32只,随机分为兰州安静对照及运动疲劳组、高原安静对照及运动疲劳组.高原组由兰州引入到可可西里高原(4 767m),采用跑台方式建立重度疲劳模型;运用Morris水迷宫记录大鼠学习记忆能力;采用DNA原位末端标记法检测海马神经元凋亡.结果 高原低氧及重度疲劳均不同程度地影响大鼠学习记忆能力的改变;且高原组大鼠海马神经元凋亡数目明显多于兰州组.结论 高原环境重度疲劳可致大鼠海马神经元损伤,神经元凋亡数目增多,从而影响学习记忆能力的改变.     

帕金森病合并糖尿病患者的情绪与认知及肢体感觉异常的研究

目的：研究分析帕金森病合并2 型糖尿病患者情绪与认知及肢体感觉异常情况。方法：选取40 例帕金森病合并2 型糖尿病患者作为观察组,以及选择同期无糖尿病帕金森病患者40 例为对照组,分析帕金森病合并2 型糖尿病患者（H-Y 分级2~3 级）情绪与认知变化以及肢体感觉异常情况与无糖尿病的帕金森病患者的区别。结果：观察组情绪与认知的调查结果显示,记忆力减退,注意力不能集中以及淡漠等发生率明显增高,与对照组比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;对肢体感觉症状,观察组肢体疼痛、肢体寒凉发生率高于对照组,两组比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：帕金森病合并2 型糖尿病患者较无糖尿病的帕金森病患者情绪与认知功能受损发生率较高,肢体感觉出现麻凉症状发生率较高。     

北京市保健食品委托生产质量责任划分探析——北京药监房山分局制定保健食品委托加工协议指导性意见

近年来,我国保健食品行业快速发展,许多企业在自身不具备生产条件的情况下,纷纷采取委托加工的方式生产保健食品 目前,国内保健食品行业采取委托加工方式生产的保健食品企业占60%以上.保健食品委托加工对减少资源浪费,促进优势互补有着积极作用,但其所存在的质量责任难以界定,这给监管部门的案件查处工作带来了一些问题,那么,如何科学合理地划分委托加工双方的责任,成为药监部门亟待解决的主要难题之一.     

保健食品生产企业“证后监督”探微

2006年是北京市药品监督管理局保健食品监管组织、人员和工作落实后,各区县分局不断探索的一年,也是区县分局对保健食品生产企业实行“证后监督”的第一年。“证后监督”是指药品监管部门为保健食品生产企业换发卫生许可证后进行的监管。面对保健食品行业不规范的现状,药监部门更要加强“证后监督”,规范并引导企业行业健康发展。保健食品生产企业“证后监督”存在6大问题房山区良好的投资环境和地域优势,如发展较成熟的工业开发区,地域较宽阔,人力资源充足等,为保健食品生产企业形成较强优势提供了条件,目前辖区所属10家保健食品生产企业生…