中华多宝抗动脉粥样硬化和抗衰老作用的初步观察

对中老年正常血脂者、高胆固醇血症、高甘油三酯血症和复合型高脂血症患者共88例服中华多宝6个月。结果显示中华多宝一方面能降低导致动脉粥样硬化的TC和TG水平,同时增高抗动脉粥样硬化的HDL-c水平;另一方面又能增强体内抗氧化能力,降低脂质过氧化物含量。因此认为中华多宝可能是防治动脉粥样硬化和抗衰老的一种较好保健型药品。     

正常人LDL受体基因PvuⅡ多态性与血脂水平的关系探讨

用限制性内切酶PvuⅡ研究了115名血脂正常者低密度脂蛋白(LDL)受体基因的多态性。结果显示存在P_1和P_2两种等位基因,构成P_1P_1、P_1P_2和P_2P_2三种基因型。其间的血清胆固醇(TC)水平存在明显差异,提示LDL受体座位的多态性可能与正常人群中TC水平的差异有关。与国外资料比较,我国的P_1等位基因相对频率较高,而P_2则较低,表明LDL受体基因的多态性存在地区和民族差异。     

在兔近端小管ATP缺乏时部分肌动蛋白与非肌动蛋白相结合

目的：研究的目的是阐明在ATP缺乏的兔近端小管(PT)中，自微绒毛内肌动蛋白细胞骨架上崩解的肌动蛋白是否与非肌动蛋白结合。方法：首先用DTSSP交联存在于ATP缺乏的Pr不溶组分中肌动蛋白和非肌动蛋白结合的方法，交联复合物进一步用二维电泳及免疫印迹法分析。结果：分析被交联的肌动蛋白复合物发现肌动蛋白与非肌动蛋白结合，而并非与绒毛蛋白结合。结论：本结果首次提示：在ATP缺乏的兔PT中，源于肌动蛋白细胞骨架的部分肌动蛋白是与非肌动蛋白相结合，而不与绒毛蛋白直接结合或以疏水性共聚体与核共存的。     

Expression of Lecithin: Cholesterol Acyltransferase and/or apoA-I Mediated by Recombinant Adeno-associated Virus in Myogenic Cell

Ａｓａｋｅｙｐａｒｔｉｃｉｐａｎｔｉｎｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｒｅｖｅｒｓｅｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ (ＲＣＴ)ａｎｄｐｌａｙｉｎｇａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎｏｆＨＤＬａｎｄｍａｉｎｔａｉｎｉｎｇ     

巨噬细胞集落刺激因子对小鼠腹腔巨噬细胞清道夫受体途径和细胞内胆固醇酯积聚的影响

为探索巨噬细胞集落刺激因子，清道夫受体、氧化型低密度脂蛋白与动脉粥样硬化的关系，观察了重组人巨噬细胞集落刺激因子对小鼠腹腔巨噬细胞清道夫受体途径的影响以及重组人巨细胞内胆固醇酯积聚的影响。结果发现重组人巨噬细胞集落刺激因子能增加培养小鼠的腹腔巨噬细胞表面的清道夫受体数目，使之对氧化型低密度脂蛋白的结合和降解呈现剂量和时间依赖性增加，并使细胞内胆固醇酯积聚增多。     

囊泡单胺类转运体功能抑制在帕金森病发病机制中作用的研究

帕金森病（PD）发病机制有多种学说，近年的科学研究从帕金森病黑质多巴胺能神经元选择性受损出发，发现黑质纹状体系统自身的多巴胺递质囊泡转运体（VMAT２）受到抑制而触发的多巴胺内源性毒性可能在帕金森病发病机制中起了关键的作用犤１，２犦。２０００～２００２年，本课题组通过研究加入VMAT特异性抑制剂利血平（RE）后犤３犦，cDNACHO细胞（转PC１２细胞含VMAT２基因的转基因中国仓鼠卵细胞）和野生株中国仓鼠卵细胞（wtCHO细胞）的死亡方式及多巴胺毒性在大鼠嗜铬瘤细胞（PC１２）细胞的作用途径，探讨了PD的发病机制…     

氧化低密度脂蛋白循环免疫复合物诱导巨噬细胞胆固醇酯蓄积

目的:探讨氧化、天然低密度脂蛋白循环免疫复合物(Ox -LDL- IC)致动脉粥样硬化作用。　方法:采用人源的氧化、天然LDL与异源的抗载脂蛋白B(apoB)结合制备IC,观察不同浓度的Ox- LDL -IC对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯蓄积和泡沫细胞形成的影响。　结果:氧化、天然LDL- IC均可引起巨噬细胞内胆固醇酯大量堆积,其效果强于Ox -LDL(P<0. 001),而且随剂量的增加而升高,并转化为泡沫细胞;而天然LDL、抗apoB处理的巨噬细胞内未见胆固醇酯的堆积。　结论:LDL- IC可导致巨噬细胞转化为泡沫细胞,参与动脉粥样硬化的形成。     

成年大鼠心肌细胞的分离和培养技术

目的建立稳定的成年大鼠心肌细胞分离和培养方法,以便进行成年大鼠心肌细胞收缩功能的研究。方法将成年大鼠心脏挂于Langendorff装置上灌流,胶原酶消化分离成年大鼠心肌,无血清悬浮培养心肌细胞。光镜观察,结合形态学和收缩功能评价心肌细胞。结果新分离的心肌细胞的收获量为(4~6)×106个,杆状和圆形,其中长杆状细胞大于75%,横纹清晰,收缩幅度(12.00±2.68)%。无血清培养24 h后,细胞保持完整的形态结构,长杆状心肌细胞占总数的70%以上,收缩幅度(11.78±1.59)%,与刚培养时的细胞相比,无显著差别(P>0.05)。结论通过本方法可以对成年大鼠心肌细胞进行良好的分离培养。     

重组腺相关病毒载体介导的人载脂蛋白AⅠ及载脂蛋白AⅠMilano在肌源性细胞C2C12中的表达

目的以重组2型腺相关病毒为载体介导人载脂蛋白AⅠ及载脂蛋白AⅠ Milano在小鼠肌源性细胞C2C12中的表达,探索一种崭新的预防、治疗动脉粥样硬化性疾病的途径.方法以正常人肝组织中抽提的RNA为模板,用逆转录聚合酶链反应获得人载脂蛋白AⅠ cDNA,点突变制备载脂蛋白AⅠ Mihno cDNA.分别将载脂蛋白AⅠ、载脂蛋白AⅠ Milano的cDNA插入重组2型腺相关病毒载体质粒,并与辅助质粒共转染包装细胞293T获得编码人载脂蛋白AⅠ和载脂蛋白AⅠ Milano的重组腺相关病毒载体,粗提后以冰乙醇法进行浓缩.斑点杂交检测重组2型腺相关病毒载体滴度,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度.分别用含载脂蛋白AⅠ或载脂蛋白AⅠ MihnocDNA的编码人载脂蛋白AⅠ和载脂蛋白AⅠ Milano的重组腺相关病毒对小鼠肌源性细胞C2C12进行感染,酶联免疫吸附法检测蛋白表达情况.结果聚合酶链反应产物序列正确,点突变成功.编码人载脂蛋白AⅠ和载脂蛋白AⅠ Milano的重组腺相关病毒的滴度均在2×1014个/L左右.重组2型腺相关病毒纯度良好.载脂蛋白AⅠ及载脂蛋白AⅠ Milano分别获得0.39±0.04 mg/L和0.31±0.03mg/L的表达水平.结论成功制备表达载脂蛋白AⅠ或载脂蛋白AⅠ Mfiano的重组腺相关病毒载体,并在C2C12细胞中获得有效表达,为进一步探索方便、安全的预防和治疗动脉粥样硬化性疾病的方法打下了基础.     

丹参对LDL受体及apoA－Ⅰ mRNA水平的影响

研究了丹参对高脂喂饲大鼠的血清脂质水平、肝低来度脂蛋白（ＬＤＬ）受体ｍＲＮＡ和载脂蛋白（ａｐｏ）Ａ－ＩｍＲＮＡ水平的影响，以及对培养的人成纤维细胞上述两种ｍＲＮＡ水平的影响。发现丹参能升高鼠肝及人成纤维细胞ＬＤＬ受体ｍＲＮＡ水平，但降血清总胆固醇及ＬＤＬ胆固醇作用不明显。提示ＬＤＬ受体可能存在翻译或翻译后水平的调节。丹参对鼠肝及人成纤维细胞ａｐｏＡ－１ｍＲＮＡ水平未见有影响。