新型双启动子表达质粒pCMVnir的构建及其促进基因免疫效果的研究

目的 构建一种新型双启动子表达载体pCMVnir，研究其与胞内寄生菌联合应用促进基因免疫效果的作用。方法细菌硝酸盐还原酶基因B启动子nirB为厌氧诱导启动子，根据nirB启动子的结构，设计合成改良的nirB，置换三启动子载体pTriEx-4中的T7Lac和P10启动子，而保留其CMVie启动子，获得携带CMVie和nirB双种启动子的新型载体pCMVnir，或称为pCN。构建pCN-EGFP和pCN-DsRed两种报告质粒，分别转化S．SL3261、E．coil DH-15a和CHO等细胞，检测报告基因的表达情况以确定两种启动子的活性。pCN-EGFP转化S．SL3261，接种BALB／c小鼠，定期解剖小鼠收集黏膜相关淋巴组织，观察重组细菌和载体DNA在细胞中的定植及稳定性。免疫接种小鼠，并定期收集小鼠血清和阴道分泌物，以重组rEGFP为抗原，用EEISA方法研究其增强免疫应答的能力。并构建人乳头瘤病毒L1E7双启动子pCN-16L1E7及对照单启动子载体pCMV-16L1E7和pNir-16L1E7，对比三者涛导黏膜免疫的差别。结果双启动子表达载体pCMVnir可在细菌和真核细胞中有效表达报告基因，在细菌中可形成肉眼可见的荧光菌落和沉淀，转染CHO等真核细胞能够表达荧光蛋白，表明pC-MVnir载体的两种启动子都有活性，其中nirB活性是受兼性厌氧调控的。pCMVnir与细菌有较好的相容性，重组细菌可在动物体内有限复制和定植达6周，质粒可在细菌中稳定存在。以rEGFP为抗原检测发现pCN-EGFP诱导的免疫反应高于常用的单启动子载体pCMV-EGFP。人乳头瘤病毒双启动子载体pCN-16L1E7诱导的免疫反应也高于其他单启动子载体。结论双启动子表达载体pcMVnir与减毒胞内寄生菌匹配应用，能够提高抗原表达量及增强基因免疫反应的强度。并可作为一般基因克隆和表达载体，特别是作为原核表达载体，不用添加诱导物，即可获得大量表达。     

不同护理预防方法对前列腺电切术后血栓事件的影响

目的探讨不同护理预防方法对前列腺电切术后血栓事件的影响。方法以2015年2月至2016年3月我院收治的600例行前列腺电切术患者为研究对象,随机数字表法分为对照组和研究组各300例,2组分别实施常规护理干预及综合性护理干预措施,观察两组凝血功能[活化部分凝血活酶时间(a PTT)、纤维蛋白原(Fbg)、凝血酶原时间(PT)]、血栓事件发生率及术后生活质量[排尿症状对生活质量影响(QOL)评分]。结果护理干预后研究组凝血功能正常,而对照组呈高凝状态,护理干预后研究组血栓事件发生率5.00%较对照组16.67%显著低(P0.05)。结论综合性护理干预措施可明显缩短前列腺电切术后患者康复相关时间,有效调节机体凝血功能,降低术后血栓事件发生率的同时提高患者预后生活质量。     

穴位贴敷联合穴位埋线治疗脾胃虚寒型慢性非萎缩性胃炎的临床研究

目的:探讨穴位贴敷联合穴位埋线治疗脾胃虚寒型慢性非萎缩性胃炎的临床疗效。方法:选取2018年8月—2019年12月接受治疗的80例慢性非萎缩性胃炎(中医证型属于脾胃虚寒型)患者,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组40例。对照组采用常规西医治疗,观察组在对照组基础上联合穴位贴敷、穴位埋线治疗。比较两组治疗前后的免疫功能、各项评分以及疗效。结果:观察组治疗后CD4⁺和CD4⁺/CD8⁺水平均高于对照组,而CD8⁺水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组患者内镜评分和中医症候评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组总有效率(85.0%)高于对照组(60.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:穴位贴敷联合穴位埋线治疗慢性非萎缩性胃炎患者(脾胃虚寒型),可显著提高患者免疫功能,改善胃黏膜状态。     

院前急救揿针内关穴对不稳定性心绞痛硝酸甘油用量的影响

目的 观测院前急救时采用揿针内关穴治疗对不稳定型心绞痛的临床疗效和安全性。方法 将符合纳入标准的病例随机分为2组,治疗组纳入19例,对照组21例。对照组采用不稳定型心绞痛常规治疗方法;治疗组给予对照组的基础治疗后,立即加用揿针针刺双侧内关穴,维持带针状态。当入院诊治病情稳定后,即对患者心绞痛发作持续时间、治疗后持续时间及硝酸甘油最终用量进行记录,进行组间比较。结果 治疗后组间患者比较,心绞痛发作持续时间和治疗后持续时间差异无统计学意义（P>0.05）;但硝酸甘油最终用量上,治疗组少于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 揿针内关穴治疗可以有效减少不稳定型心绞痛硝酸甘油的用量,起到缓解心肌缺血的作用,并具备操作安全、简便和长效的作用。     

对深圳市光明区婚检孕检夫妻地中海贫血基因检测结果的分析

目的:分析深圳市光明区婚检孕检夫妻地中海贫血基因检测的结果,以降低重型地中海贫血儿的出生率,为该地区的优生优育工作提供科学依据.方法:采用PCR+导流杂交法对在中国科学院大学深圳医院东院区接受免费婚检、孕检的疑似患有地中海贫血的夫妻(共1860人)进行地中海贫血基因检测,观察并分析其检测结果.结果:对1860例疑似患有...     

银杏内酯B自微乳化释药系统的制备及质量评价

目的:制备银杏内酯B自微乳化制剂,并对其质量进行评价。方法:通过高效液相-电喷雾-质谱(HPLC-ESI-MS)方法测定银杏内酯B在不同油相、表面活性剂、助表面活性剂中的溶解度,结合伪三元相图,筛选银杏内酯B自微乳化制剂的处方。考察药物含量和分散介质对制剂稳定性的影响以及经0.1 mol.L-1HCl稀释后形成微乳的形态、粒径和成乳稳定性。结果:自微乳化介质处方为油酸乙酯-(cremophor EL-大豆磷脂-无水乙醇,40∶60),其中cremophor EL-大豆磷脂-无水乙醇(4∶1∶2),GB的载药量为2.5%。乳化介质(H2O和0.1 mol.L-1HCl)对制剂自微乳化效率影响不大。银杏内酯B自微乳制剂经0.1 mol.L-1HCl稀释100倍后透射电镜下呈圆球形,分布均匀,粒径(41.6±1.11)nm,自微乳化时间大约在2 min。8 h内制剂稳定,粒径变化不大,无药物析出。结论:银杏内酯B自微乳化制剂制备简单,质量稳定,可以显著提高药物的溶解度。     

慢性胃炎患者应用摩罗丹联合奥美拉唑对炎症因子及胃蛋白酶原水平的影响

目的:探讨慢性胃炎患者应用摩罗丹联合奥美拉唑对炎症因子与胃蛋白酶原水平的影响.方法:2019年9月-2020年9月收治慢性胃炎患者100例,随机分为两组,各50例.对照组仅口服奥美拉唑治疗;观察组应用摩罗丹联合奥美拉唑治疗.比较两组临床疗效、炎症因子水平及胃蛋白酶原亚群水平.结果:观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统...     

氧化应激对胎盘生命的影响

氧化应激不仅是氧化剂的产生与抗氧化剂防御系统之间的不平衡状态,也是众多细胞功能障碍和组织损伤的原因。氧化应激相关因子在多种疾病中发挥重要作用,通过多种途径调节细胞内环境稳定,维持细胞存活。近年研究发现,氧化应激与相关的氧化损伤是导致多种疾病的主要因素,氧化应激相关指标在妊娠特有疾病(如子痫前期、胎儿生长受限)孕妇的血清及胎盘滋养细胞中高度表达。氧化应激同时与肿瘤、高血压等多种慢性疾病有关,与多种疾病的发生、发展密切相关。氧化应激作为妊娠期特有疾病的"共同通路"被深入研究,其中氧化应激对胎盘功能的影响备受关注。分析与总结胎盘在不同缺氧状态下与妊娠相关疾病的关系,探索氧化应激相关因子是否具有预测作用,为围生期相关疾病的预防及诊疗提供新方向、新思路。     

血清肌酸激酶及同工酶在急性万灵中毒中的临床意义

近年来,我地区周边农村因家庭纠纷,出现口服万灵自杀现象.我们在抢救急性万灵中毒的患者时,发现不少重症病人血清CK及CK-MB亦升高,且与中毒程度和预后有关,现报道如下.