经络穴位电刺激在急性白血病化疗中的应用

目的评价经络穴位电刺激(SPW型白细胞增长仪)辅助急性白血病化疗的有效性及安全性。方法对17例急性白血病患者在化疗的同时采用SPW型白细胞增长仪配合治疗 ,每天一次 ,8d为一疗程。并与34例非白细胞增长仪组作对照,观察两组化疗前后外周血白细胞计数及分类的变化。并观察其对人体的影响。结果白细胞增长仪组52.9 % (9/17)的病例白细胞仅轻度下降 ,而47.1% (8/17)的病例白细胞反而有不同程度的回升。对照组白细胞均下降 ,其白细胞数与治疗组比及自身对照均有显著性差异(P<0.001)。另外 ,患者的食欲、精神状态也有一定的改善 ,且无任何不良反应。结论该仪器升白血球效果满意 ,具有设备简单、易于操作、无创伤、无痛及副作用、花费少、负担轻等优点。在急性白血病的临床治疗上有很大的辅助作用和实用价值     

结核分枝杆菌Rv2450蛋白诱导小鼠免疫应答的实验研究

目的:以原核表达的结核分枝杆菌Rv2450蛋白在小鼠体内诱导体液和细胞免疫应答。方法:采用皮下包埋的方法,以预先转移到硝酸纤维素膜上的原核表达的Rv2450蛋白免疫小鼠(10只)3次,每次间隔2周。用间接ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗体的滴度。末次免疫完成后4周,处死3只免疫小鼠并分离脾淋巴细胞,体外经PPD(2μg/孔)刺激后,用MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖指数。用ELISA法检测脾淋巴细胞悬液中IFN-γ、IL-10及IL-12的水平。结果:Rv2450蛋白免疫小鼠血清特异性抗体的滴度为1∶3200,淋巴细胞增殖指数为3.76±0.19。免疫小鼠脾淋巴细胞培养液中IFN-γ、IL-10及IL-12的含量,分别为(1740±19)ng/L、(678±15)ng/L、(469±13)ng/L,均高于各组的生理盐水对照组(P<0.05)。结论:Rv2450有可能作为新型结核疫苗的候选组分。     

人骨形态发生蛋白2基因重组腺病毒表达载体转染兔骨髓间充质干细胞*

背景：采用GatewayTM技术构建腺病毒载体,显著弥补了外源性细胞因子局部应用的缺陷。 目的：观察人骨形态发生蛋白2重组腺病毒表达载体(Ad-BMP-2/GFP)转染兔骨髓间充质干细胞后骨形态发生蛋白2的表达情况。 方法：密度梯度离心联合贴壁培养法,分离、培养、纯化兔骨髓间充质干细胞;GatewayTM技术构建的Ad-BMP-2/GFP腺病毒载体转染兔骨髓间充质干细胞。 结果与结论：RT-PCR检测转染诱导后的细胞表达成骨细胞特异性产物骨钙素;转染后兔骨髓间充质干细胞在mRNA水平和蛋白水平均有人骨形态发生蛋白2的表达。结果表明构建的Ad-BMP-2/GFP可高效转染兔骨髓间充质干细胞,骨形态发生蛋白2在细胞中能高效表达。     

MicroRNA-125a质粒表达载体的构建及其表达活性

背景：pSuper是一种非编码RNA的真核表达载体,可在细胞质内表达miRNA前体,经过细胞自身的Dicer酶切后形成miRNA成熟体,其过程能够完全模仿细胞内源性miRNA形成过程。因此,利用pSuper表达载体构建一种肝癌抑制性miRNA：miR-125a的表达载体,为下一步研究其抗癌机制奠定了基础。 目的：构建miR-125a的真核表达质粒pSuper-miR-125a,并验证其表达miR-125a的效率和特异性。 方法：PCR扩增miR-125a前体(Pre-miR-125a)的目的片段,将其T-A克隆入pMD18-T过渡质粒载体,限制性内切酶切下目的片段,连接入pSuper质粒表达载体得到pSuper-miR-125a重组质粒;将重组质粒转染Hela细胞,miRNA定量PCR检测重组质粒表达miR-125a的效率和特异性。 结果与结论：成功将miR-125a前体(Pre-miR-125a)片段克隆入真核表达质粒pSuper H1启动子下游,获得pSuper-miR-125a重组表达质粒,转染该质粒进入Hela细胞后能够在细胞内高效和特异的表达miR-125a,进一步证明 pSuper真核表达质粒适合miRNA的表达研究。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导为肝细胞样细胞

背景：目前体外诱导骨髓间充质干细胞分化为肝细胞样细胞的研究主要集中在不同诱导因子的诱导作用,而微环境的诱导作用研究较少。 目的：观察肝细胞生长因子、胎肝细胞对骨髓间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞样细胞的影响。 方法：采用密度梯度离心法分离大鼠骨髓间充质干细胞,反复贴壁法纯化扩增骨髓间充质干细胞;采用Ⅰ型胶原酶消化法分离孕3周大鼠胚胎肝脏细胞,差速贴壁法纯化肝脏细胞;阴性对照组骨髓间充质干细胞只加入含体积分数为10%胎牛血清的L-DMEM培养基。诱导组在阴性对照组基础上加入一定浓度肝细胞生长因子或者与胎肝细胞共培养进行诱导分化。 结果与结论：诱导组白蛋白、甲胎蛋白水平均高于非诱导组(P < 0.01),诱导组糖原染色阳性,免疫细胞化学染色CK-18阳性,而非诱导组糖原染色、CK-18均阴性。结果显示肝细胞生长因子和胎肝细胞均可在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为具有肝细胞样细胞表型和功能的类肝细胞。     

单核-巨噬细胞的异质性及其对创面愈合的调控研究进展

单核吞噬细胞系统(MPS)主要由骨髓中单核细胞前体、外周血中的单核细胞、组织中的巨噬细胞和树突状细胞(DC)组成。其中,巨噬细胞和DC分布在机体的多个组织器官,发挥免疫监控和抵御病原体入侵的作用。然而,不同部位的这些细胞在组织形态和功能上存在一定差异,即使是同一器官中的巨噬细胞也不尽相同。皮肤中的单核-巨噬细胞主要包括表皮中的朗格汉斯细胞以及真皮中的巨噬细胞和真皮树突状细胞(dDC),它们共同参与调控创面愈合过程中的炎症反应、肉芽组织生成和组织重塑,达到促进创面愈合的作用。     

人源性抗HBs可变区单链抗体基因的构建及核酸序列测定

将通过噬菌体显示技术获得的一株人源性抗HBs Fab抗体基因重链和k轻链的可变区用编码柔性肽的Linker使其连接成单链,克隆入中间载体,并进行核酸序列测定,为其后的表达及双功能抗体的构建打下基础。     

干扰素-γ诱导蛋白10在子痫前期大鼠模型的表达

目的:检测子痫前期孕鼠子宫及胎盘中干扰素-γ诱导蛋白10(IP-10)的表达,探讨其与子痫前期发病的关系。方法:采用注射L-NAME方法制备子痫前期动物模型,将妊娠大鼠随机分为正常妊娠组、子痫前期组。同时采用免疫组化及Western blot法检测IP-10在正常妊娠组、子痫前期组孕鼠肝脏、肾脏、子宫及胎盘等组织中的表达。结果:免疫组化及Western blot结果显示在子痫前期组,孕鼠肝脏、肾脏中IP-10表达增加,与正常妊娠组差异有统计学意义(P<0.05)。正常妊娠组孕鼠子宫及胎盘IP-10表达不明显,而子痫前期组孕鼠子宫及胎盘IP-10表达大幅增高,差异有统计学意义(P<0.05)。同样在子痫前期组中,胎盘中IP-10表达量显著高于子宫中IP-10的表达量,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:子痫前期孕鼠子宫及胎盘IP-10表达升高可能与子痫前期的发病有关。     

肺表面活性物质治疗早产儿肺透明膜病临床观察

肺透明膜病(HMD),又称新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS),是早产儿常见的危重疾病,病死率高。其直接原因是缺乏肺表面活性物质(PS)。目前国内大中城市已普遍用PS替代治疗或预防NRDS,并取得较好疗效[1]。随着人民生活水平的提高,在基层医院选择使用PS的病例逐年增加。本院新生儿重症监护室(NICU)在2003年12月至2006年12月,采用PS加持续气道正压呼吸(CPAP)治疗早产儿肺透明膜病取得了较满意的效果,现总结如下。资料与方法一、一般资料临床诊断早产儿HMD的患儿40例,均符合《实用新生儿学》X线诊断标准[2]。且具以下特征:(1)早产儿生后6h…     

武警某支队2010~2014年度新兵心理状况调查分析

目的通过对武警某支队2010~2014年度新兵心理状况调查及影响因素分析,为新兵心理健康教育提供一定的科学依据。方法采用军人心理疾病预测量表对武警某支队2010~2014年度3250名新兵进行心理状况调查,比较新兵SCL-90评分与中国军人常模;采用多元Logistic回归分析对影响新兵心理状况的因素进行分析。结果 (1)本组3250名新兵与国内军人、新兵常模在成长经历、个性内向、应激源、心理防御不良、社会支持缺乏、精神病性、抑郁、躁狂、神经症及人格偏移方面的评分差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);(2)经Pearson单因素及多元Logistic回归分析,影响新兵的心理状况的因素包括:是否独生、成长经历、个性内向、应激源、心理防御不良、精神病性、神经症及人格偏移。结论新兵总体心理状况良好,但是应注重少数新兵存在的心理不良反应,注重心理健康教育,进行有针对性的心理指导。