泛素羧基末端水解酶L1 C90S和I93M点突变不影响小鼠卵母细胞成熟

目的 通过观察泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)点突变蛋白与野生型蛋白过量对小鼠卵母细胞成熟的影响,并分析其在小鼠卵母细胞离体成熟过程中的作用及作用方式.方法 通过原核重组蛋白技术制备UCHL1点突变(C90S和I93M)和野生型蛋白与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白,通过显微注射技术将UCHL1野生型蛋白与GST的融合蛋白、UCHL1点突变蛋白与GST的融合蛋白、GST、PBS分别注射到小鼠未成熟卵母细胞,或在体外培养基中添加UCHL1野生型蛋白与GST的融合蛋白,分析野生型UCHL1过量、UCHL1(I93M)点突变蛋白添加及泛素水解酶活性缺失的UCHL1(C90S)点突变蛋白添加对卵母细胞生发泡破裂(GVBD)率的影响.分离UCHL1(I93M)点突变小鼠与野生型小鼠的生发泡期卵母细胞,体外培养3 h后比较其GVBD率.结果 显微注射UCHL1野生型蛋白及其点突变体与GST的融合蛋白的各组之间、注射GST组、注射PBS组卵母细胞GVBD率差异均无统计学意义,在培养基中添加UCHL1蛋白与GST的融合蛋白组卵母细胞GVBD率与无注射无添加对照组相比差异也无统计学意义(P均>0.05).注射UCHL1(C90S)与GST的融合蛋白组有少量生发泡期卵母细胞体外发育为MⅡ期卵母细胞后呈现极体较对照组偏大的现象.UCHL1(I93M)点突变小鼠生发泡期卵母细胞体外GVBD率与野生型小鼠比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 在小鼠卵母细胞中添加外源性UCHL1、有致病作用的UCHL1(I93M)突变体或泛素水解酶活性丧失的UCHL1(C90S)突变体均不影响卵母细胞成熟的GVBD进程,UCHL1(I93M)点突变小鼠卵母细胞GVBD率亦无异常,但UCHL1(C90S)点突变可能影响极体的形成.     

临床护理路径在老年高血压病应用效果的评价

目的探讨临床护理路径在老年高血压病的应用效果。方法将140例老年高血压患者随机分成对照组和实验组。对照组实施常规护理,实验组实施临床护理路径。观察临床护理效果。结果实验组患者用药的依从性,血压的有效控制,健康教育的效果,对护理的满意程度均优于对照组（P〈0．05）。结论临床护理路径可明显提高高血压的护理效果。     

藏族药治疗消化性溃疡的研究进展

消化性溃疡是常见的慢性消化系统疾病,因其明显影响患者生活质量且具有癌变性而备受关注。藏族药不仅是我国藏区居民防病治病的要药,也是中国民族医药中不可或缺的一部分。随着人们对藏族药了解的增加,关于藏族药治疗消化性溃疡的研究报道也越来越多,为了进一步研究藏族药治疗消化性溃疡的作用,通过文献整理、药理研究和临床应用3个方面总结藏族药治疗消化性溃疡的特点,显示藏族药治疗消化性溃疡具有悠久的历史。藏族药在现代临床上可以单味药或复方使用,可单独使用或与中药、化学药物联合用药,其作用机制主要是抑制胃酸分泌、保护胃黏膜、抗应激和抗氧化损伤等,研究藏族药治疗消化性溃疡的药理作用和临床应用可为其在临床上的进一步开发和使用提供更充足的理论依据。     

不同盐制方法对牛膝中有效成分含量的影响

目的:比较盐粒拌炒和盐水炙牛膝2种不同方法对牛膝中β-蜕皮甾酮,25R-牛膝甾酮和25S-牛膝甾酮含量的影响,为牛膝盐制工艺研究提供参考。方法:采用HPLC测定β-蜕皮甾酮,25R-牛膝甾酮和25S-牛膝甾酮的含量,流动相乙腈-水-甲酸(16∶84∶0.1),检测波长250 nm。以牛膝生品为参考,考察2种盐制方法对牛膝中指标成分含量的影响。结果:盐水炙样品中以每100 g牛膝加食盐1 g,在150~180℃下炒制15 min的含量最高,盐粒拌炒样品以每100 g牛膝加食盐2 g,150~180℃炒制4 min的含量最高。盐水炙样品中β-蜕皮甾酮,25R-牛膝甾酮,25S-牛膝甾酮质量分数均以3号样品为最高,分别为0.083%,0.015 7%,0.010%;盐粒拌炒样品中三者的最高质量分数分别为0.100%,0.019 1%,0.012 3%。结论:盐粒拌炒牛膝的样品中3种甾酮类成分的含量均大于生品和盐水炙牛膝的样品,2种不同盐制方法对牛膝中有效成分均有影响,为牛膝盐制工艺的确定提供参考。     

miR-30b在三叉神经痛模型大鼠中的表达及作用

目的 探讨miR-30b在三叉神经痛(TN)模型大鼠三叉神经节(TG)中发挥的作用。方法 采用眶下神经缩窄术(ION-CCI)构建大鼠TN模型。用Von Frey毛刷检测大鼠的机械痛阈。通过qRT-PCR及Western blot检测术侧TG内miR-30b和激活转录因子3(ATF3)表达变化。经眶下孔分别向ION-CCI大鼠的TG内定位注射miR-30b的类似物(agomir)和agomir的阴性对照(agomir NC),检测大鼠的机械痛阈及干预后ATF3表达的变化。结果 ION-CCI组大鼠在术后第2～28天出现机械痛阈的降低(P<0.05)。ION-CCI组较假手术组(Sham组)术后TG中miR-30b表达降低,ATF3表达升高(P<0.05)。ION-CCI组过表达miR-30b后,大鼠机械痛阈升高,TG中ATF3表达降低(P<0.05)。结论 miR-30b参与调控TN的发生、发展,miR-30b可能是TN潜在的治疗靶点。     

二代测序临床应用的质量控制

二代测序(NGS)技术在生命科学及临床医学领域方面的研究和应用越来越广泛。检测标准化和质量控制是二代测序技术体现临床应用价值的前提,对二代测序技术未来的发展具有重要意义。该文从二代测序国内外质量控制现状及特点、质量控制要求和方法及室间质评等方面进行阐述。     

红景天苷通过抑制RAS轴减轻MPTP所致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的丢失

目的:利用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型,探讨红景天苷(Sal)发挥多巴胺能神经元保护作用的可能机制。方法:将72只雄性C57/BL小鼠随机分为3组,每组24只。对照组腹腔注射生理盐水;模型组腹腔注射MPTP(每日30 mg/kg);治疗组腹腔注射MPTP(每日30 mg/kg)后1 h腹腔注射Sal(每日50 mg/kg),连续注射7 d,观察每组小鼠行为学表现,使用爬杆法测定小鼠运动能力;采用免疫组织化学图像分析,测定模型小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶催化亚基(NOX2)阳性表达量;采用蛋白质印迹法,测定模型小鼠中脑TH、血管紧张素1型受体(AT1)和NOX2蛋白表达情况;使用试剂盒测定活性氧簇(ROS)产生水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠表现出典型的帕金森病样行为学表现,运动能力明显减退; TH阳性细胞减少61. 1%,TH蛋白表达降低67. 6%,AT1、NOX2表达与ROS生成均上升(P 0. 01)。与模型组相比,Sal治疗组小鼠行为学症状减轻,运动能力提高,TH表达升高,AT1、NOX2表达与ROS生成下降(P 0. 01)。结论:Sal在一定程度上可通过抑制肾素-血管紧张素系统(RAS)轴中AT1、NOX2过度表达与ROS过度生成,减轻氧化应激反应,从而发挥多巴胺能神经元保护效应。     

鸡卵黄抗体用于诺如病毒检测的初步研究

目的以鸡卵黄免疫球蛋白IgY代替哺乳动物来源的IgG抗体,建立ELISA双抗体夹心法．探索用于诺如病毒检测的可行性。方法以387型菌株（GⅡ．4型）诺如病毒P颗粒为抗原免疫健康产蛋来航鸡,制备、纯化特异性抗诺如病毒鸡卵黄免疫球蛋白IgY。采用过碘酸钠法对IgY进行酶标。以特异性抗体为捕获抗体,酶标抗体为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA检测体系。评价其灵敏度、特异度及重复性。并将其与金标准进行比较。结果本实验建立的双抗体夹心ELISA检测体系最低检测限达20ng／ml。批内变异系数为1．021％,批间变异系数为1．150％。临床应用评价显示真阳性率为82．5％,真阴性率为81．82％。与金标准比较,检出率差异无统计学意义（P=0．629）。结论建立了基于特异性抗诺如病毒卵黄抗体IgY的双抗体夹心ELISA检测体系,用于腹泻患者粪便标本诺如病毒的检测具有较好的敏感性和特异性。     

人尿液中4种多环芳烃单羟基代谢产物的液相色谱-串联质谱联用检测法

目的 建立人尿液中4种多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)代谢产物的液相色谱-质谱(LC-MS-MS)同时测定法.方法 尿液经过酶解,固相萃取净化富集,旋转蒸发浓缩,采用LC-MS-MS法检测尿中1-羟基芘、2-羟基芴、6-羟基(煀)、3-羟基苯并芘的浓度.结果 在0.1～10μg/L的线性范围内,1-羟基芘、2-羟基芴、3-羟基苯并芘、6-羟基(煀)所得的回归方程均呈较好的线性关系(r≥0.999);该方法的检出限分别为0.2、0.15、0.2、0.2 μg/L,该方法的平均回收率为61.3％～100.7％,RSD为1.5％～9.7％.结论 该方法灵敏度高,重现性和回收率好,特异性高,适用于人尿样中PAHs单羟基代谢物的快速、大批量检测.     

醒脑开窍针刺法对早期中风患者运动功能障碍恢复的疗效观察

目的 探讨早期中风患者采用醒脑开窍针刺法治疗对其运动功能和日常生活能力的影响.方法 将收治的52例中风患者随机分为对照组和观察组,每组26例.对照组患者采用传统取穴针刺疗法,观察组患者采用脑开窍针刺疗法,对比两组患者治疗前后的运动功能和日常生活能力变化.结果 两组患者治疗后上、下肢的运动功能评分和日常生活能力评分比治疗前明显提高,并且观察组患者各项评分提高程度高于对照组,具有统计学差异(P＜0.05).结论 早期中风患者采用醒脑开窍针刺法治疗,对改善患者肢体运动功能和日常生活能力均具有重要的临床价值.