LTB-NspA融合基因原核表达载体的构建及鉴定

目的:构建融合基因LTB-NspA的原核表达载体。方法:用PCR法从淋球菌和大肠杆菌标准株分别扩增出NspA和LTB基因,用重组PCR法通过接头将LTB与NspA融合,将其插入pET-30 a中,并进行PCR、酶切和测序鉴定。结果:经PCR、酶切和测序分析,证实成功构建了LTB-NspA的原核表达载体。结论:LTB-NspA原核表达载体的成功构建,为研制淋球菌高效粘膜免疫疫苗奠定了基础。     

淋球菌对7种抗菌药物敏感性的测定

目的 了解江门地区淋球菌流行株对抗生素的敏感性，为淋病的防治提供试验依据。方法 采用琼脂稀释法对95株淋球菌临床分离株进行了药物敏感性测定。结果 在测定的7种抗生素中，对淋球菌敏感性较高的5种抗生素依次为阿奇霉素、罗红霉素、红霉素、头孢曲松和壮观霉素，其敏感率分别为100．0％、98．9％、98．9％、95．8％和94．7％。而淋球菌耐药性较高的2种抗生素依次为交沙霉素和头孢唑啉钠，耐药率均为8．4％。结论 阿奇霉素、头孢曲松和壮观霉素仍可作为江门地区淋病治疗的首选药物，但淋球菌对头孢曲松和壮观霉素已出现耐药株，应引起临床医师的高度警惕；罗红霉素、红霉素可作为江门地区淋病治疗的替代性药物。     

分层次开放实验室 优化实验课程体系 提高医学生科研创新能力

分析传统病原生物学实验教学弊端,阐述了实验课程对医学生科研创新能力培养的重要性。以省级示范实验室建设为依托,充分利用现有实验教学资源,优化实验课程体系,分层次开放实验室,拓展实验教学内容,创新实验教学手段,促进医学生实验课程教学改革,培养学生创新意识和科研能力,积极探索新型科研创新型医学人才的培养模式。     

粘膜佐剂LTB优化的抗淋病ltB-nspA融合基因疫苗鼻饲免疫效果研究

目的:用真核重组质粒pcDNA3.1(-)/ltB-nspA鼻饲免疫小鼠,探索粘膜佐剂LTB辅佐NspA所诱发的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答水平。方法:对真核重组质粒行PCR及双酶切鉴定后大量制备,经鼻饲途径免疫雌性BALB/c小鼠,间接ELISA法检测血清中NspA特异性IgG抗体水平及小鼠生殖道灌洗液中NspA特异性sIgA抗体水平;MTT法检测脾淋巴细胞增殖水平,ELISA双抗体夹心法检测脾淋巴细胞培养上清IFN-γ含量。结果:融合基因pcDNA3.1(-)/ltB-nspA组小鼠生殖道灌洗液中sIgA(A450:0.316±0.045)明显高于pcDNA3.1(-)/nspA单基因组(P0.05)和其它对照组(P0.01);小鼠血清中IgG(A450:0.643±0.156)水平、脾淋巴细胞刺激指数(SI:1.65±0.32)和脾淋巴细胞诱生的IFN-γ(160.56±25.67pg/ml)水平均明显高于pcDNA3.1(-)/ltB、空质粒pcDNA3.1(-)和PBS对照组(P0.01)。结论:pcDNA3.1(-)/ltB-nspA融合基因疫苗经鼻饲免疫,能够诱导小鼠产生较强的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答;粘膜佐剂LTB可辅佐NspA诱导小鼠产生更高水平的生殖道粘膜免疫。     

7种抗生素体外抗泌尿生殖道支原体的药物敏感性研究

目的 比较抗生素对临床标本中泌尿生殖道支原体的抗菌作用。方法 采用直接肉汤药盘法测定６８０例支原体感染患者解脲脲原体（Ｕu）和人型支原体（Ｍh）对７种抗生素的药物敏感性。结果 ８３株Ｕｕ对四环素、强力霉素、美满霉素、罗红霉素、阿奇霉素、交沙霉素、氧氟沙星的敏感率分别为３４．９％,４５．８％,４７．０％,３７．３％,５７．８％,７１．１％及３１．３％;６２析Ｍｈ对四环素、强力霉素、罗红霉素、阿奇霉素、     

沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位及抗原性研究

目的分析沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位并探讨其抗原性。方法利用PCR技术获得衣原体CT841基因,将基因序列克隆到载体pGEX6p,转化大肠杆菌XL1-blue,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CT841。融合蛋白经纯化后免疫小鼠制备特异性抗体,间接免疫荧光法分析CT841在感染细胞中的分布特征;ELISA法分析CT841的抗原性。结果CT841原核表达重组体成功构建;CT841在感染细胞的表达模式与主要外膜蛋白MOMP相似,而与衣原体蛋白酶样活性因子CPAF及包涵体膜蛋白IncA的分布模式不同;CT841与衣原体感染患者、猴、鼠血清均发生强烈的免疫反应。结论沙眼衣原体蛋白酶CT841是定位于衣原体菌体上的免疫优势抗原。     

淋病奈瑟菌检测技术研究进展

随着基因组学、现代分子生物学理论与技术的发展以及新仪器的研发,淋病奈瑟菌的检测方法将向快速、准确、灵敏、特异的方向发展,特别是PCR、ELISA等现代分子生物学技术的联用及实时PCR的进一步完善,大大提高了淋病奈瑟菌的检测质量和效率。     

性病患者及性病高危人群解脲脲原体和人型支原体感染状况分析

目的 探讨泌尿生殖道支原体在STD患者及性病高危人群中的感染状况。方法 采用培养法对421例STD患者、84例性乱者和185例性病伴侣进行解脲脲原体（Uu）和人型支原体（Mh）的检测。结果 STD患者、性乱者和性病伴侣泌尿生殖道支原体感染率分别为42．28％、35．71％和40．0％．与健康人群（13．48％）比较，差异有显著性（X^2=56．61，19．44，38．16，P〈0．005）；前三者之间比较，差异无显著性（X^2=1．25，0．28，0．45，P〉0．05）。Uu感染率（15．22％）与Mh（5．22％）比较，前者明显高于后者（X^2=37．61，P〈0．005）。男性Uu和Mh感染率（分别为8．57％、2．08％）与女性（分别为23．61％、9．18％）比较，女性明显高于男性（X^2=29．82，17．36，P〈0．005）。Uu和Mh混合感染率（20．43％）明显高于Uu（15．22％）或Mh（5．22％）的单独感染（X^2=6．41，71．45，P值分别为P〈0．05，P〈0．005）。结论 Uu和Mh在STD患者、性乱者和性病伴侣中流行广、感染率高，在性病的防治和监测工作中应加以重视.     

性病患者性病病原体感染的研究

从２６１７份性病阳性标本中查出淋球菌（Ｇｃ）１１６０例（４４．３３％）、解脲支原体（Ｕｕ）７４６例（２８．５１％）、人型支原体（Ｍｈ）３８２例（１４．７５％）、沙眼衣原体（Ｃｔ）３５３例（１３．４９％）、人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）２８８例（１１．００％）、念珠菌（Ｃｄ）１８４例（７．０３％）、阴道毛滴虫（Ｔｖ）５８例（２．２２％）、单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）５６例（２．１４％）及梅毒螺旋体（Ｔｐ）感染者３９例。在２６１７例ＳＴＤ患者中５７８例为混合感染（２２．０８％），混合感染率在三年中明显增加（５．９３％），而ＨＰＶ和Ｔｐ感染率也呈逐年增加（８．７７％和１．４０％）。男、女性患者相比，男性ＧＣ感染率高于女性，两者有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）；女性Ｃｔ、Ｕｕ、Ｃｄ和Ｔｖ的感染率高于男性，两者亦均有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。     

268例性病患者前列腺液病原学检测及治疗观察

为探讨性病与前列腺炎的关系，本研究了２６７例性病患者的前列腺液进行了普通细胞，解脲支原体（ＵＵ），人型支原体（ＭＨ）培养及聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测淋球菌（ＮＧ），沙眼衣原体（ＣＴ）等检查。结果１２８例患者列腺炎（４７．９４％），检得ＮＧ－７例（５．４％）ＵＵ３４例（２６．５６％），ＣＴ２２例（１７．１９％），ＭＨ１０例（７．８１％），阿奇霉素间歇４周疗法，上述病原体清除率分别为１００％，７３．０