上海地区自身抗体检测质量现状调查分析

目的了解上海地区自身抗体检测的质量现状,以便对其检测技术进行规范。方法分2次共发放8个调查样本,要求各临床实验室在规定的时间内检测抗核抗体（ANA）和抗可提取核抗原（ENA）抗体,并按时回报结果。结果开展ANA检测项目的32家实验室均采用间接免疫荧光法,结果总符合率为98．1％,其中阳性结果符合率为96．9％,阴性结果符合率为100．0％。混合核型类样本的次要核型检出率偏低。阳性样本各实验室回报的滴度结果差异较大。开展抗ENA抗体检测项目的38家实验室均采用免疫印迹法,结果符合率为76．3％,抗核糖核蛋白（RNP）抗体、抗干燥综合征抗原A（SS-A）抗体、抗干燥综合征抗原B（SS-B）抗体检测结果总符合率低于其他抗体,试剂质量参差不齐。结论自身抗体检测的质量有待提高,其检测技术有待规范。     

酶联免疫吸附试验定性检测乙肝表面抗原测量不确定度评定的探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙肝表面抗原（HBsAg）测量不确定度的评定。方法用4种市售手工法ELISA试剂检测HBsAg定值标准品（1、2IU／mL）和室内质控品，分析测量过程的不确定度分量，合成各试剂盒检测系统的扩展不确定度。结果4种试剂检测1、2IU／mL标准品的批内测量的扩展不确定度为24．4％、27．4％、17．4％、14．4％和18．8％、24．0％、19．4％、23．8％[包含因子（K）=2]。检测质控品的总扩展不确定分别是24．8％、29．8％、30．2％、32．8％（K=2）。结论含有测量不确定度的结果基本能反映测量的真实水平，有助于了解目前国产ELISA试剂手工法检测低水平HBsAg的实际情况。     

高通量测序技术在五类疾病分子诊断中的应用及质量管理策略

高通量测序技术(high-throughput sequencing)又称下一代测序(next generation sequencing, NGS)能一次并行对成千上万个基因进行测序,极大地提高了DNA测序效率并降低了成本。近年来,NGS在医学研究和临床诊断中的应用日益广泛,在无创产前筛查,肿瘤筛查、诊断和治疗,微生物病原体检测,遗传性疾病的筛查与诊断及器官移植排斥筛查等多个领域具有广泛的应用前景。NGS技术作为一项新兴技术,在相关临床应用中也存在诸多问题,其质量管理体系尚不完善,还面临许多挑战,需要医学实验室和相关部门共同努力,以促进NGS在临床诊断中规范开展。     

上海地区临床实验室HCV RNA检测正确度验证结果分析

目的 分析上海地区临床实验室2018年丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)正确度验证结果,了解上海地区HCV RNA检测质量。方法 收集临床实验室检验剩余样本,制备低、高2个浓度样本。要求临床实验室在3个不同工作日对样本分别重复检测3次,通过网络回报结果。采用国家二级标准物质对样本进行赋值,分析不同试剂组的组内变异系数(CV)和偏移以及各临床实验室的室内CV和偏移。结果 通过赋值2个正确度样本的定值分别为3.02×10⁴和3.39×10⁵ IU/ml。此次调查共有16家实验室上报结果,低、高2个浓度样本不同试剂组组内CV为0.78%～8.53%和0.94%～6.21%,检测结果与靶值的偏移为-4.69%～13.17%和-3.44%～6.51%。2个样本实验室室内CV为0.47%～8.53%和0.58%～6.21%; 偏移为-0.89%～13.17%和-4.88%～6.51%。2个样本的符合率分别为87.50%(14/16)和100%(16/16)。结论 上海地区大部分临床实验室HCV RNA检测重复性较好,正确度水平符合要求。     

激动素（Kinetin）对实验性大鼠肝纤维化防治作用的研究

目的：研究激动素对肝纤维化的防治作用。方法：以大白鼠为实验对象,采用40%氯化碳皮下注射,按0.3%ml/100g体重,每周2次,共12周,诱导肝纤维化模型。激动素预防组和治疗组大鼠分别于造模开始时的造模6周后,按0.5mg/100g体重背部皮下注射激动素,1次/d,实验结束后分别测肝功能,肝羟脯氨酸,取肝组织作病理检查。结果：激动素预防组谷丙转氨酶（GPT）,肝羟脯氨酸（HYP）与肝纤维化模型组比较,有显著性差异（P＜0.05),激动素治疗组上述指标虽高于正常组,但明显低于肝纤维化模型组（P＞0.01),且肝纤维化程度有明显减轻。结论：激动素对实验性肝维化有防治作用。     

上海地区伊立替康药物代谢相关基因检测室间质量评价结果分析

目的 以抽取自人全血的基因组DNA为质控样本,开展伊立替康代谢相关基因室间质量评价(EQA)计划,评估参评实验室检测能力,提高其检测质量.方法 通过对人类基因组DNA的测序,获得包含多种尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A1(UGT1A1)*6和UGT1A1*28不同基因型组合的样本,制备EQA质控样本盘.每个样本盘包含5...     

DLC-1基因启动子甲基化对于B-ALL的预后价值

目的观察儿童急性淋巴细胞白血病中肝癌缺失-1（DLC-1）抑癌基因启动子甲基化状态,评估该基因甲基化对于急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）的预后价值。方法对40例B-ALL患儿DLC-1启动子甲基化状态与白血病敏感预后指标白血病微小残留病灶（MRD）,以及其他对B-ALL预后可能有影响的指标作一比较,评价DLC-1对于B-ALL的预后判断价值,以及是否可以作为B-ALL的独立预后危险因素。结果 DLC-1甲基化阳性的B-ALL患儿的复发率和5年无事件生存率均与DLC-1甲基化阴性患儿差异有统计学意义（P〈0.05）。DLC-1启动子甲基化与MRD的结果分布并不一致（P〉0.05）。但两者同为阳性结果的5例患儿在5年内全都复发,复发率为100%;而两者同为阴性结果的11例患儿,仅1例在5年内复发,复发率为9%。多因素分析显示仅MRD可作为独立的预后危险因素（P=0.017）,DLC-1基因甲基化阳性患儿复发风险是甲基化阴性患儿的8.5倍。结论 DLC-1甲基化和MRD都是B-ALL有意义的预后指标,两者结合可为临床提供覆盖面更广的预后信息。DLC-1甲基化也显示了该指标有成为独立预后危险因素的趋势。     

酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒表面抗原临界样本复检范围的探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）临界样本的复检范围。方法收集用ELISA初检HBsAg吸光度（A）值在0.07～2.00范围内的样本,用ELISA复检;初、复检结果不符和2次结果均在临界的样本,用微粒子酶免疫法（MEIA）进行复核,并用中和法做确认试验。统计分析结果,选择一个合适的样本复检范围。结果样本初检结果A值在0.070～0.104、0.105～0.300范围内,ELISA复检符合率分别为85.2%、56.9%;MEIA与ELISA复检结果的符合率分别为90.1%、93.9%。A值在0.301～0.500、0.501～1.000、1.001～1.500、1.501～2.000范围内,ELISA复检符合率依次为88.3%、93.8%、99.1%、99.2%,MEIA与ELISA复检结果的符合率为100%。确认试验和MEIA复检结果的符合率样本测定值（S）/阴性对照值（N）在1.50～1.99、2.00～5.00,分别为50.0%和92.7%,其他组均在97.1%以上。结论在操作规范化的实验室内,ELISA初检HBsAg复检范围宜选择样本A值在0.070～0.300范围内;大批量体检时,复检范围应放宽至0.070～0.500;乙肝标志物模式异常的样本也需复检。规定适宜的复检范围既能确保检测结果的准确性,又能避免人力和试剂等物品的浪费。     

表皮生长因子受体（EGFR）基因突变检测质控品制备及应用

目的　制备模拟临床样本的表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor EGFR）基因突变检测质控品,评估其临床适用性。方法　选择含EGFR 不同突变位点和无EGFR 突变位点细胞,培养收集后制作成蜡卷。用三种临床常用试剂盒检测,并评估其均一性和稳定性。将含不同突变型5 份样本的样本盘,随机编码后发送至参评实验室,评价回报结果。结果　三种不同试剂检测样本盘结果一致。结果显示质控品均匀, 室温放置可稳定12 个月。28 家实验室5 个样本符合率分别为92.88%,96.43%,78.57%,96.43% 和100%,突变型样本和野生型样本的符合率分别为91.07%（102/112）和100%（28/28）。结论　研制的EGFR 基因突变质控品具有较好的临床适用性,可用于室内质量控制和室间质量评价。