降植烷诱导小鼠类风湿关节炎的模型北大核心CSCD

目的：利用降植烷构建一种模拟人类风湿性关节炎发病过程的小鼠模型。方法：6-8周雌性BALB/c小鼠30只,随机分为模型组和对照组,每组15只。模型组于0周、9周、18周时经腹腔注射0.5 ml降植烷;对照组注射0.5 ml生理盐水。观察各组小鼠后足足掌厚度变化,并对关节炎的肿胀程度进行评分;H＆E染色评估滑膜增生和炎性细胞浸润程度;流式细胞术方法检测小鼠脾脏中巨噬细胞、树突状细胞、中性粒细胞、T细胞和B细胞的亚群变化。结果：21周时,模型组有11只小鼠出现足爪红肿,足掌平均厚度为（2.90±0.51）mm,与对照组（1.29±0.47）mm比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;关节炎评分为9.55±2.80。H＆E染色结果显示模型组胫骨远端骨小梁吸收破坏,累及骨皮质,关节软骨可见坏死脱落、纤维化,呈现出明显的类风湿关节炎病理改变。流式细胞术分析结果显示,造模21周时,脾脏细胞中CD11b、CD11c和GR1表达明显增加,提示巨噬细胞、树突状细胞和中性粒细胞亚群数量增加;同时,CD4、CD8、CD154的分子表达也明显上调,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：经腹腔注射降植烷能够成功诱导小鼠关节炎,并产生与RA患者类似的组织病理和免疫学改变。降植烷诱导的小鼠关节炎模型,能够较为准确地模拟临床类风湿关节炎的发病过程。     

塞来昔布对钛颗粒诱导破骨细胞活化的抑制作用

目的 观察环氧合酶-2(COX-2)选择性抑制剂-塞来昔布(Cel)对钛颗粒(Ti)诱导破骨细胞(OC)活化的影响.方法 实验分为6组:空白组、Ti组、核因子(NF)-κB受体活化因子配体(RANKL)组、R+Ti组、Cel组和前列腺素E2(PGE2)组.采用噻唑蓝(MTT)法检测0.lg/L Ti和不同浓度Cel(10、50、100、200、500μg/L)处理小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7后12、24、48、72 h细胞增殖活性;以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测成熟OC,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2、核因子(NF)-κB受体活化因子(RANK)、TRAP、活化T细胞核因子c1(NFATc1)和组织蛋白酶K(CPK)基因mRNA含量,Western blot分析COX-2蛋白表达变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测PGE2表达水平.结果 MTT结果表明Ti和(或)Cel(≤500 μg/L)对RAW264.7细胞增殖能力无影响.Western blot及RT-PCR结果表明COX-2表达峰值出现在RANKL和Ti作用后2h,24 h后COX-2表达量与空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05).ELISA结果显示,RANKL和Ti加入后12h,PGE2的含量为3.912±0.231,与Cel预处理组(1.488±0.093)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).TRAP染色,RANKL组、R+Ti组、Cel后处理组和PGE2组均可见大量紫红色多核细胞;Ti组和Cel预处理组阳性细胞较少,统计分析结果表明Cel≥100 μg/L时,TRAP阳性细胞数量与RANKL组比较差异有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR结果显示Cel组(100 μg/L)RANK、TRAP、NFATcl和CPK基因mRNA含量分别为4.980 ±0.180、3.128±0.143、6.166±0.223和4.922±0.163,与R +Ti组和PGE2组之间的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 预先给予选择性COX-2抑制剂Cel能减少PGE2分泌,抑制RANK的表达,阻断Ti诱导的OC活化.     

淫羊藿苷抑制钛颗粒诱导的炎症反应

背景：体外实验表明,淫羊藿苷可抑制脂多糖诱导的急性肺炎,其抗炎作用在磨损颗粒存在的条件下是否依然有效？目的：通过体内外实验相结合的方法探讨淫羊藿苷对磨损颗粒诱导炎症反应的调控作用。方法：①体内实验：将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,钛组和钛＋淫羊藿苷组采用钛诱导小鼠颅骨无菌炎症模型,对照组、淫羊藿苷组也进行相同手术过程,但不植入钛,淫羊藿苷组、钛＋淫羊藿苷组建模当天灌胃给予淫羊藿苷200 mg/（kg·d）,对照组、钛组灌胃给予等量的安慰剂,2周后酶联免疫吸附实验、定量RT-PCR检测肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β蛋白或mRNA的表达量。②体外实验：将小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7分别与核因子кB受体配体、核因子кB受体配体＋淫羊藿苷、核因子кB受体配体＋钛颗粒及核因子кB受体配体＋钛颗粒＋淫羊藿苷共培养72 h,ELISA检测培养基上清中肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β水平,RT-PCR分析肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β基因mRNA表达。结果与结论：①体内实验：在钛颗粒存在的条件下,口服淫羊藿苷可明显减少颗粒诱导的炎症细胞浸润,使炎性增厚的骨膜变薄,抑制颅骨标本中肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β的表达。②体外实验：经钛颗粒刺激后,细胞培养基中肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β质量浓度显著增加,细胞中相应mRNA表达量上调,而经淫羊藿苷干预后这两种炎性因子在蛋白和基因水平的表达量显著下调。结果表明淫羊藿苷在体内外均可显著抑制钛颗粒诱导的炎症反应。     

唑来膦酸对绝经后骨质疏松症患者假体周围骨密度的影响

目的研究唑来膦酸对绝经后骨质疏松症患者假体周围骨密度的影响。方法选取2015年11月至2016年4月符合入组标准的32例绝经后骨质疏松症患者,随机分成对照组(16例,年龄74.4岁±5.7岁)和治疗组(16例,年龄73.3岁±6.6岁),进行为期一年的随访研究。于术后1周、3个月、6个月、12个月通过双能X线扫描(DEXA)测定假体周围骨密度值,于术前、术后3个月、6个月、12个月通过血清学检查测定相关骨代谢标志物的水平。结果两组患者术后3个月、6个月、12个月与术后1周(基线)相比,Gruen1-7区骨密度均呈不同程度下降。术后6个月对照组在Gruen1、4、6、7区及术后12个月在Gruen1、2、4、6、7区的骨密度丢失明显高于治疗组。术后3个月、6个月、12个月对照组的骨吸收标志物(β-CTX)水平明显高于治疗组,两组的骨形成标志物(TP1NP)水平仅在术后12个月具有统计学意义(对照组高于治疗组),两组的25(OH)D水平在术后3个月、6个月、12个月均无统计学意义。结论绝经后骨质疏松症妇女行全髋关节置换术后使用5 mg唑来膦酸能有效预防假体周围的骨密度丢失及改善骨的重建。     

组织工程骨的研究与应用

骨组织工程研究的目的是为了将细胞和材料构建成工程骨用作骨移植替代材料。骨髓基质干细胞作为种子细胞的培养技术较为成熟,基因转移技术的应用使得其分化增殖能力得到增强,更利于骨组织的再生。现有多种人工合成或天然的支架材料均未能达到理想的要求,需应用新技术工艺对其进行修饰和改性以降低免疫原性,增强细胞在支架材料上的吸附、分化、增殖能力,并在工程骨构建过程中引入生长因子,利于新骨形成。组织工程骨初步进入临床应用取得了良好的效果,并将逐步实现产品产业化生产。     

组织工程化脂肪基质细胞诱导脊柱融合的实验研究

目的 探讨组织工程化脂肪基质细胞诱导脊柱融合的能力.方法 从成年大鼠腹股沟处无菌获取脂肪组织,消化分离培养出脂肪基质细胞.在大鼠脊柱融合模型中将32只大鼠随机分为4组,每组8只,分别植入骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因重组的腺病毒载体转染的脂肪细胞(A组)、LacZ基因重组的腺病毒载体转染的脂肪细胞(B组)、未转染脂肪细胞(C组)、胶原海绵对照(D组).测定A组和B组的BMP-2的定量表达.比较4组术后4、6、8周X线片评分.8周后处死大鼠,进行MicroCT扫描分析和组织学观察.结果 ELISA法结果显示A组BMP-2表达水平为3.46 ng/mL,而B组无BMP-2表达.A组4、6、8周X线片评分分别为(4.56±1.01)分、(4.72±0.24)分、(4.92±0.13)分,均明显高于其他组,差异有统计学意义(P＜0.05).Micro CT和组织学切片均显示A组全部获骨性融合,而其他组均未融合.结论 组织工程化的脂肪基质细胞能够很好地诱导脊柱融合,有望成为一种新颖、有效的治疗方法.

Abstract：

Objective To assess the capability of inducing spinal fusion by adipose derived stromal cells in a rat model. Methods Adipose derived stromal cells were isolated from inguinal fat pads in rats.In the rat model of spinal fusion,32 rats were randomized into 4 groups.In group A,the cells infected with AdBMP-2 were implanted.In group B,cells infected with AdLacZ were implanted.In group C,uninfected cells were implanted.In group D,only collagen sponges were implanted.Expressions of BMP-2 were quantified in groups A and B.The radiographic scores were compared at weeks 4,6 and 8 among the 4 groups.After sacrifice at week 8,the spine samples were assessed by radiographs,MicroCT,and histological analysis. Results ELISA revealed a 3.46 ng/mL expression of BMP-2 in group A but no expression in group B.The mean radiographic scores for group A at weeks 4,6 and 8 were 4.56 ± 1.01,4.72 ± 0.24,4.92 ±0.13,significantly higher than those for the other groups ( P ＜ 0.05) .MicroCT and histological analysis revealed spinal fusion in all the rats in group A.None of the rats in the control groups developed fusion.Conclusion Because tissue engineered adipose derived stromal cells can induce spinal fusion,they may be a promising strategy for spinal fusion in the future.     

新型内固定物经皮加压钢板微创植入修复股骨颈骨折

背景：有研究表明股骨颈骨折内固定后骨折不愈合、股骨头坏死率及翻修率较高。目的：观察新型内固定物经皮加压钢板修复股骨颈骨折的安全性及近期疗效。方法：采用经皮加压钢板治疗新鲜股骨颈骨折患者24例,记录每例患者的植入后3d疼痛评分、末次随访髋关节功能评分、骨折愈合情况及并发症的发生情况。结果与结论：随访时间平均6.2个月（2.5~11个月）,其中14例患者随访时间超过半年,骨折已愈合。未发现内固定断裂、再骨折、髋内翻等早期并发症。所有患者植入时、植入后均未输血。平均部分负重时间4.8d（2~14d）。植入后3d疼痛口述分级评分法评测结果显示：1级10例,2级12例,3级2例,1级和2级占91%。末次随访髋关节功能评分优良率为87%。结果证实,植入经皮加压钢板修复股骨颈骨折是安全的;坚强的内固定支持可以满足患者早期扶拐负重行走。     

颈前路一体化钢板椎间融合器对颈椎曲度和椎间高度的影响

目的探讨颈前路一体化钢板椎间融合器(PCB)对颈椎曲度和椎间高度的影响和临床意义。方法颈椎前路椎间盘摘除术后,选用适当型号的一体化钢板椎间融合器(PCB)置入,无需透视帮助即可拧入螺钉和植骨。治疗脊髓型颈椎病40例,颈椎外伤伴有急性椎间盘突出症18例,外伤性颈椎不稳10例,43例患者接受单节段固定,22例患者为双节段固定,3例患者为三节段固定。本组随访4-36个月,平均17个月。结果椎间隙高度平均增加了32.5%,经过术前和术后的比较,有显著差异(P<0.01);颈椎的前弯角度较术前变化率为125.9%,术后较术前有明显显著差异性(P<0.01);未见颈椎间不融合病例。结论PCB系统在临床应用中不仅有助于恢复颈椎的生理曲度及椎间高度,并且有助于长期维持,提高了椎间融合率和颈椎柱稳定性。     

低频脉冲磁场对兔膝关节软骨细胞白介素-1β、肿瘤坏死因子-α表达与分泌的影响

目的：测定在低频脉冲磁场（Low frequency pulsed electromagnetic field,LFPEMF）刺激的情况下,兔膝关节软骨细胞白介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）与肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）表达与分泌的变化。方法：分离培养由兔骨髓干细胞（Marrow stem cells,MSCs）诱导分化形成的软骨细胞,分别使用不同强度的LFPEMF进行电磁辐射刺激,用免疫印迹法测细胞中IL-1β与TNF-α的表达状况,并用ELISA检测细胞培养液中IL-1β与TNF-α的水平。结果：施加LFPEMF的兔膝关节软骨细胞中IL-1β与TNF-α的表达无明显差异,但其培养液中IL-1β与TNF-α的水平有明显降低,并且随着施加脉冲磁场刺激强度的增加,IL-1β与TNF-α的降低程度增强。结论：LFPEMF可以抑制体外兔膝关节软骨细胞IL-1β与TNF-α的分泌。