多耐药大肠埃希菌NB8株全基因组耐药基因检测

目的检测1株多耐药大肠埃希菌NB8株的遗传学背景。方法病原分离自2012年4月宁波市第一医院住院患者尿液,作16S rDNA和gyrA基因测序、BLASTn比对确认为大肠埃希菌,采用Illumina HiSeq与Ion Torrent PGM两种大规模并行测序仪进行全基因组分析,再行人工测序。最后NB8株和9株已完成全基因组测序的大肠埃希菌耐药基因的比较基因组学研究。结果多耐药大肠埃希菌NB8株全基因组测序得到一条推定的染色体序列,长4 550 369 bp (内含14个缺口),得到一条推定的质粒序列,长635 377 bp(内含33个缺口)。从NB8株全基因组数据中挖掘出了β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、大环内酯类、磺胺类、四环素类、多粘菌素的耐药基因,并挖掘出接合性质粒、转座子、插入序列、整合子的遗传标记,以及5大类外排泵基因。结论多耐药大肠埃希菌NB8株遗传学背景明确,主动外排机制增强也会导致或者增强NB8株的耐药性。质粒、转座子和整合子等可移动遗传元件可以使细菌的耐药性得以快速传播,使受体菌表现为多重耐药。     

耐药鲍氏不动杆菌水平获得性耐药基因与可移动遗传元件测得结果的指标聚类分析

目的 调查耐药鲍氏不动杆菌水平获得性耐药相关基因与可移动遗传元件的关系.方法 收集2009年1-12月医院住院患者痰标本中分离的耐药鲍氏不动杆菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)方法分析54种水平转移获得的β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类获得性耐药基因和12种接合性质粒、转座子、插入序列、整合子等可移动遗传元件遗传标记检测以及插入序列与β-内酰胺酶基因(ISaba1与ADC、ISaba1与OXA-23)连锁检测,再对检测结果作指标聚类分析(UPGMA法).结果 20株耐药鲍氏不动杆菌共检出4种获得性β-内酰胺类耐药基因(TEM、PER、ADC、OXA-23),5种获得性氨基糖苷类耐药基因(aac(3)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅰ b、ant(3″)-Ⅰ、aph(3′)-Ⅰ、armA),2种抗菌制剂外排泵基因(adeB、qacE△1),7种可移动遗传元件的遗传标记(intⅠ 1、tnpU、tnp513、IS26、IS903、ISaba1、ISaba9);指标聚类分析提示,获得性耐药基因armA、ADC、ant(3″)-Ⅰ、qacE△1、adeB、TEM、aac(3)-Ⅰ与可移动遗传元件tnpU、IS26、intⅠ 1、tnp513、ISaba1高度相关,阳性率均＞90.0％;插入序列与β-内酰胺酶基因(I Saba1与ADC、I Saba1与OXA-23)连锁检测均呈阳性.结论 该组耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药基因与可移动遗传元件有一定的关联度,菌株携带的获得性耐药基因可能由可移动遗传元件介导.     

淋球菌青霉素结合蛋白PPNG基因与耐青霉素类药物的关系

目的　探讨淋球菌青霉素结合蛋白 2基因 (PenA)突变及产青霉素酶淋球菌 (PPNG)与耐青霉素类药物的关系。方法　采用巢式聚合酶链技术对 97株淋球菌临床分离株进行PPNG基因检测 ,并对 4例PPNG基因检测阴性、而抗生素药敏试验表明对青霉素类药物耐药的淋球菌菌株的PenA基因进行测序。结果　 97株淋球菌菌株中有 67株为PPNG基因检测阳性 ;而 4株PPNG阴性的耐药菌株的PenA基因序列均存在点突变。结论　PPNG所导致的耐药是淋球菌耐青霉素类药物的主要来源 ;PenA基因突变是产生耐药菌株的主要原因。     

胎盘生殖支原体感染对妊娠的影响研究

198 1年Ｔｕｌｌｙ等首次从人体泌尿生殖道分离到生殖支原体 (Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ ,Ｍｇ)并加以命名〔1,2〕。近十年来中外学者证实 ,男性非淋菌性尿道炎 (ＮＧＵ )和女性宫颈炎与Ｍｇ感染相关联〔3 ,4〕。 1998年 ,我们通过对正常和异常孕妇宫颈脱落细胞中的Ｍｇ核酸分析研究发现 :早产、胎膜早破等不良妊娠结局可能与其宫颈部存在Ｍｇ相关〔5〕。为了进一步确认不良妊娠与Ｍｇ的关系 ,我们收集了 10 0例正常妊娠和 12 9例早产、胎膜早破等异常妊娠者的胎盘组织进行了Ｍｇ套式ＰＣＲ(ｎＰＣＲ)检测 ,并对阳性病例进…     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶表型及β-内酰胺酶基因型的检测

目的了解临床分离的肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,Kpn)产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)及β-内酰胺酶(BLA)基因型存在状况。方法在2005年9月至2006年4月间从住院病人中分离25株Kpn,采用表型确证试验方法检测ESBLs,采用PCR及序列分析的方法分析21种(群、簇)BLA基因。结果25株Kpn中,ESBLs阳性14株(56.0%)、阴性5株(20.0%)、"不确定"6株(24.0%)。共检出6种基因,分别是blaTEM20株(80.0%)、blaSHV1株(4.0%)、blaCTX-M-1群1株(4.0%)、blaOXA-10群20株(80.0%)、blaLAP1株(4.0%)和blaDHA8株(32.0%)、BLA基因阳性菌23侏,阳性率92.0%,其余15种(群)基因均阴性。其中HZ12593号菌株blaLAP-2基因序列已登录GenBank,注册号为EU529981。结论临床分离的Kpn产ESBLs比例较高,至少存在6种BLA基因,BLA基因型以blaTEM和blaOXA-10群为主,Kpn携带blaDHA基因可以影响ESBLs表型确证试验结果。     

铜绿假单胞菌亚胺培南及消毒剂耐药相关基因研究

目的了解临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中金属β内酰胺酶基因(blaIMP和blaVIM)、外膜孔蛋白D2(OprD2)基因(oprD)、消毒剂-磺胺耐药相关基因(qacE△1-sulⅠ)存在状况.方法采用ATB′PSE 5药敏试验条板微量肉汤法测定28株铜绿假单胞菌对14种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)技术及序列分析的方法检测耐药基因.结果该28株铜绿假单胞菌对亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、妥布霉素和复方新诺明均完全耐药,对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率最高为64.3%,其余的耐药率在57.1%～92.9%之间.28株Pa中blaIMP和blaVIM基因均阴性,25株(89.3%)oprD基因缺失,24株(85.7%)qacE△1-sulI基因阳性.结论浙江湖州解放军第98医院临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌多重耐药严重,oprD基因缺失是其对亚胺培南耐药的重要原因,qacE△1-sulI基因携带率很高.     

人腔前卵泡体外培养研究

目的探讨FSH对人腔前卵泡(preantralfollicle)体外生长的影响.方法培养液中加入不同浓度的FSH,观察卵泡存活天数和卵泡发育增大.结果卵泡体外存活天数对照组为2.80±1.69天,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(FSH浓度为0.5IU/ml、1IU/ml、2IU/ml)分别为5.36±0.63、5.47±2.50、8.13±4.19天,与对照组相比,分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001.卵泡增大比率对照组为20.00%,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别为35.71%、60.00%、81.25%,与对照组相比分别为P＞0.05、P＜0.05、P＜0.01.结论FSH能使卵泡体外存活天数延长,卵泡发育增大,并大致呈正相关关系.     

肺炎克雷伯菌分离株毒力基因分布与临床特征的相关性研究

目的：分析肺炎克雷伯菌8种毒力基因在肺炎克雷伯菌肺炎患者临床分离菌株中的分布和临床特征的关系。方法：收集2019年8—9月南京医科大学附属无锡人民医院分离的引起肺部感染的50株肺炎克雷伯菌,PCR法检测毒力基因,统计并分析肺炎克雷伯菌毒力基因阳性率及患者的临床分布特征。结果：50株菌株mrkD、ureA基因阳性率为100%,fimH、entB、ybtA基因阳性率分别为86%、96%、64%,未检测出wabG、uge、clbA基因。携带fimH基因肺炎克雷伯菌菌株的感染者较非携带该基因细菌的感染者更易出现咳嗽咳痰、胸闷气短的症状。最常见的组合为fimH+mrkD+ureA+entB+ybtA,同时检出5种毒力基因的肺炎克雷伯菌感染者临床表现明显,但病死率低。结论：随着毒力基因种类的增加,咳嗽咳痰、胸闷气短症状的比例基本呈上升趋势,发热呈下降趋势。     

正常人血清糖类抗原50IRMA法测定结果报告

本文报告233例正常人血清糖类抗原50(CA50)免疫放射分析法(IRMA法)测定结果。以供临床参考。对象与方法1、青壮年组:体检正常、年龄在20～49岁者,共139例。其中男性64例、女性75例。2、中老年组:体检正常、年龄50岁以上者,共27例。不计性别。     

二种CMV—PCR检测法

本文根据国内外已公开发表的CMV AD169株、Towne株早期即刻抗原基因序列和引物序列以及PCR热循环参数，在引物长度和热循环参数上稍作改进，推出双温和三温PCR的二种不同的方法。这二种方法均能检出AD169株和Towne株。经初步应用效果较为满意。其中双温CMV—PCR检测能在80分钟内发放报告。