短发夹状干扰RNA沉默信号传导和转录激活子3基因表达对大肠癌细胞的影响

目的构建携带信号传导和转录激活子3（STAT3）基因短发夹状干扰RNA（shRNA）的真核表达载体,观察干扰STAT3表达对大肠癌细胞HT-29细胞增殖的影响。方法从GenBank STAT3mRNA上寻找到3条符合特征的靶序列,合成靶序列的DNA寡核苷酸链,合成双链DNA,并和BamHⅠ和HindⅢ酶切后的pRNAT-U6.1/Neo载体质粒连接产生重组质粒,行PCR和测序鉴定。重组质粒瞬时转染大肠癌HT-29细胞,实时定量PCR、Western blot检测STAT3的表达。筛选出最佳重组质粒,转染大肠癌细胞后,MTT检测细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果成功构建了携带有STAT3基因的shRNA的重组质粒,PCR和测序证实重组质粒构建正确。3种重组质粒对大肠癌HT-29细胞STAT3的表达有明显的抑制作用。筛选出的最佳重组质粒转染大肠癌细胞后,细胞增殖能力明显减弱;细胞周期分析显示,G0/G1期细胞占（74.80±1.85）%,S期细胞占（15.72±2.26）%,与对照组差异显著（P〈0.01）。结论干扰STAT3基因的表达可以有效抑制大肠癌HT-29细胞的生长。     

缺血预处理减轻胰腺移植受体大鼠小肠肠黏膜屏障的损害

背景:胰腺移植过程中的缺血再灌注损伤可以引起术后众多的并发症,其中继发性胰腺炎可以导致受体小肠黏膜的损伤,造成严重的后果。目的:观察缺血预处理对大鼠胰腺移植受体肠黏膜屏障的保护作用。设计:随机对照动物实验。单位:解放军第四军医大学西京医院胃肠外科。材料:实验于2001-09/2004-04在解放军第四军医大学西京医院胃肠外科实验室完成。动物为SD雄性大鼠83只。方法:①取47只大鼠,自阴茎静脉注射脲链霉素65mg/kg制备糖尿病大鼠模型。将造模成功的36只大鼠随机分为缺血再灌注组,供体缺血预处理组(DIPC组),受体双后肢缺血预处理组(RIPC组)3组,每组12只。剩余36只正常大鼠中随机取12只为对照组,另外24只为供体。②对照组仅行开腹术,其他3组行胰腺移植。DIPC组于获取供胰前阻断供体脾血管5min再灌注5min2次;RIPC组于供胰再灌注前阻断受体双后肢血流5min再灌注5min,重复3次;缺血再灌注组不作处理。主要观察指标:①手术后5d各组随机取6只大鼠检测小肠通透性(以血浆中FITC-dextran浓度表示)和吸收功能(以血浆中木糖浓度表示)。②各组其余6只大鼠于术后5d取血检测血清肿瘤坏死因子α、NO、超氧化物歧化酶和淀粉酶活性,取回肠黏膜组织检测小肠黏膜黏膜湿重、微绒毛高度及宽度、丙二醛含量及髓过氧化物酶活性,同时取肠系膜淋巴结、肝及脾组织进行细菌培养,观察细菌易位情况。结果:经补充后72只大鼠进入结果分析。①血浆中FITC-dextran浓度:缺血再灌注组高于对照组、DIPC组和RIPC组(P<0.01)。②血浆中木糖浓度:缺血再灌注组低于对照组、DIPC组和RIPC组(P<0.01)。③细菌易位率:缺血再灌注组高于对照组、DIPC组和RIPC组(P<0.01)。④小肠黏膜损伤程度:缺血再灌注组低于其他3组(P<0.01)。⑤缺血再灌注组小肠髓过氧化物酶活性和丙二醛含量显著高于其他3组(P<0.01),血清超氧化物歧化酶活性和NO水平低于其他3组,淀粉酶活性和肿瘤坏死因子α水平高于其他3组(P<0.01)。结论:供体和受体双后肢缺血预处理均可保护大鼠胰腺移植受体小肠肠黏膜屏障,降低细菌易位率     

2例pT1aN3b胃癌患者的临床病理特征分析

本文总结了2例pT1aN3b胃癌患者的临床病理特征, 均含印戒细胞癌成分, 分别检出62枚与41枚淋巴结, 阳性淋巴结均集中于胃小弯侧。最长随访近9年, 患者均健康存活, 无复发迹象。     

VEGF、STAT3在大肠癌组织中的表达及其相关性研究

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）和信号转导子与转录活化子3（STAT3）表达在大肠癌中的变化，以及与大肠癌临床病理的关系，并研究两者的相关性。方法采用免疫组化方法检测大肠癌中VEGF、STAT3的表达情况。结果大肠癌中VEGF、STAT3蛋白表达阳性率分别为66．7％（22／33）和63．6％（21／33），显著高于正常大肠组织的阳性率（P〈0．01）；VEGF的表达与Duke’s分期及有无淋巴结转移有关（P〈0．05）；而STAT3的表达与肿瘤的分化程度、Duke’s分期有关及有无淋巴结转移有关（P〈0．05）。相关分析表明VEGF和STAT3正相关（P〈0．05）。结论大肠癌组织中存在VEGF和STAT3的高表达，VEGF的表达与大肠癌病程的发展及淋巴转移关系相关，而STAT3的表达除与大肠癌病程的发展及淋巴转移相关外，还与大肠癌组织的分化程度有关。另外，大肠癌的发生过程中VEGF可能受STAT3的调控，STAT3可能会成为大肠癌的抗血管生成新的治疗靶点。     

胰高血糖素负荷试验在肝储备功能检测中的作用

充分了解肝病患者潜在的肝脏功能.对肝脏外科具有十分重要的意义.胰高血糖素负荷试验后,通过检测血液内c-AMP的应答反应能定量反映肝脏储备功能,并且方法简单、创伤小、副作用少,研究结果表明它比常规肝功能试验灵敏、准确、特异性高.     

失血及成分输血对ICG和半乳糖负荷试验的影响

目的：靛氰绿（ＩＣＧ），半乳糖负荷试验结果除与肝细胞功能有关外，还受肝循环血量、肾功能等因素的影响。本研究拟观察全身及肝循环紊乱状态下，上述二试验结果的变化。方法：以失血（循环血量的１５％，３０％，４０％，ｎ＝７）和成分输血（全血、血浆、血球，ｎ＝６）家兔为对象，施行ＩＣＧ（１．５ｍｇ／ｋｇ）和半乳糖（３５０ｍｇ／ｋｇ）负荷试验。观察指标为血中ＩＣＧ１５ｍｉｎ潴留率（ＩＣＧＲ１５），ＩＣＧ清除率（     

微粒子酶免法检测全血普乐可复浓度及其临床应用

目的　评价微粒子酶免 (MEIA)法检测全血普乐可复浓度的准确性及其在器官移植术后抗排异治疗中的应用。方法　以MEIA法检测 6例心脏移植、2例肝脏移植、2例小肠移植和 7例肾脏移植患者不同时期全血中普乐可复的谷浓度 ,并结合临床情况调整普乐可复的用药剂量。以MEIA法测定高、中、低 3种标准普乐可复全血样品 ,求算MEIA方法学的回收率 ,分析MEIA的准确性及其对临床普乐可复用药的指导作用。结果　在临床 6 83个血样的 472次检测中 ,质控血样检测结果均在控制范围内 ,质控的平均RSD为 (7.7± 2 .0 ) % ,方法回收率为 (96 .4± 7.4) % ,分析过程可在 1h内完成。结论　MEIA法具有快速、简便、专一性强和灵敏度高的特点 ,是一种较理想的普乐可复血药浓度常规检测方法 ,适宜在医院内开展     

辅助性肝移植临床进展

辅助性肝移植是指在保留部分或整个原肝的情况下 ,将供肝的全部或部分植入受体内。根据其移植部不同分为原位和异位辅助性肝移植 ,按移植肝的大小可分为全肝或部分辅助性肝移植 ,根据供肝来源的不同分为来源于死体供肝和活体供肝。供肝来源于死体供体者 ,供肝可为全肝或部分供肝 ,供肝来源于活供体者 ,均为部分供肝。1　辅助性肝移植的历史Ｗｅｌｃｈ 195 5年首次提出辅助性肝移植的概念 ,随后在世界范围内就辅助性肝移植进行了大量动物实验 ,Ａｂｓｏｌｏｎ于196 4年施行了世界首例临床异位辅助性肝移植。进入 2 0世纪 80年代以后 ,随着新…     

不同营养筛查方法对胃癌胃切除患者适用性的对比

目的：结合人体成分分析等营养指标，比较NR S2002和PG-SGA在胃癌患者术前营养评估的临床价值，筛选出适合于胃癌胃切除患者的营养评估方法。方法：分别使用NRS 2002和PG-SGA对91例胃癌胃切除患者进行术前营养风险筛查，比较其结果的一致性，以及与人体成分分析结果和传统营养指标的相关性。结果：NRS 2002与PG-SGA的营养风险筛出率分别为42.9%、71.4%，两者一致性检验Kappa=0.188（P<0.05），提示两种筛查方法的一致性较差。术前白蛋白、身体水分、肌肉量、去脂体重、骨骼肌、上臂周长、上臂无脂周长、浮肿、基础代谢率等营养指标在不同营养风险患者中差异有统计学意义（P<0.05）；总住院天数、术后住院天数以及术后并发症在不同营养风险患者中差异无统计学意义（P>0.05）。结论：人体成分分析联合应用NRS 2002、PG-SGA在预测评价胃癌胃切除患者术前营养状况时有一定的意义，PG-SGA营养风险筛出率高于NRS 2002。倘单独使用任何一种营养筛查方法都存在不同的缺陷，在临床中应该同时应用，相互补充。