2001～2003年云南省人间狂犬病疫情分析

狂犬病是由弹状病毒科的狂犬病毒引起的急性传染病,属典型的人兽共患病.犬类和野生动物是狂犬病的重要宿主和传染源.人一旦发病,病死率为100%.近几年云南省人间狂犬病发病有所上升,现对云南省2001～2003年的本病疫情分析,为本病的监测和防治工作提供参考.     

云南省5县健康人群乙型脑炎血清学调查

<正> 流行性乙型脑炎(简称乙脑)在我省广泛分布,近年来发病数虽有下降,但局部地区的流行时有发生。为了解人群隐性感染状况,我们在泸西、寻甸、永胜、宁蒗和昌宁采集健康人血清,测定乙脑病毒抗体、结果如下。1 材料与方法1.1标本采集 在云南省泸西、寻甸、永胜、宁蒗和     

与人类疾病相关的布尼安病毒研究进展

近几年,布尼安病毒的研究进展较快,新的布尼安病毒不断被发现。布尼安病毒科（Bunyauiridne）至少包括350种病毒,被分为5个属：Orthobunyavirus、Hantanvirus、Nairovirus、Phlebovirus、Tospovirus（见表1）,是动物病毒家族中最大的一个病毒科。至少有60种布尼安病毒可引起人类或家畜的疾病,其中对人类健康及社会经济生活产生严重威胁的病毒主要有裂谷热病毒（RVFV）、Lacrosse脑炎病毒（LACV）、奥罗普切热病毒（OROV）、白蛉热病毒（SFV）、克里米亚一刚果出血热病毒（CCHFV）和汉坦病毒属成员等。     

云南省保山市人间狂犬病调查及病毒分子生物学特征分析

目的 了解云南省保山市发生2例狂犬病患者的流行病学特点,根据病原分子生物学特征分析可能的传染来源.方法 采用狂犬病个案调查表进行流行病学调查,采集狂犬病死者脑组织标本,用直接免疫荧光试验(DFA)检测狂犬病病毒抗原,用RT-PCR法检测狂犬病病毒核酸,测定狂犬病病毒P、M和N基因全序列并根据其同源性比较及系统进化树进行分子流行病学分析.结果2006年7月保山市隆阳区发生1例人间狂犬病,2007年4月腾冲县发生1例狂犬病.2例患者犬伤暴露程度均为Ⅲ度.2例死亡病例均采集到脑组织(编号为CYN0601H和CYN0701H),经DFA和RT-PCR两种实验室方法检测确诊为狂犬病病毒阳性.CYN0601H和CYN0701H与国内外狂犬病病毒的P、M和N基因核苷酸和推导氨基酸序列同源性分析显示,CYN0601H和CYN0701H与泰国分离株的同源性最高.系统进化分析显示,2株病毒标本亲缘关系很近,同属于狂犬病病毒基因1型,且与泰国病毒株有较近的亲缘关系.结论从病原学和病毒分子水平证实云南省保山市2例患者均为狂犬病,保山市狂犬病病毒流行株可能为境外传人,应加强云南省边境地区狂犬病防制工作.     

云南省西部边境新分离蚊媒病毒分子生物学特征分析

目的 分析云南中缅边境地区新分离蚊媒病毒的分子生物学特征,以分析其遗传进化特征.方法 2010年1-12月在云南省德宏州芒市和瑞丽市监测点每月一次用诱蚊器采集蚊虫,用BHK-21和C6/36细胞分离病毒,阳性分离物用RT-PCR法进行鉴定及序列测定和分析.结果 从采获的7属42种69 209只蚊虫中分离到13株流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV),4株盖塔病毒(Getah virus,GETV),1株西藏环状病毒(Tibet orbivirus,TIBOV),7株淡色库蚊浓核病毒(Culex pipiens pallens densovirus,CppDNV).JEV E基因进化分析证实,新分离的13株JEV均属基因Ⅰ型,与云南其它地区和邻近省份流行株亲缘关系较近,且抗原和毒力位点未发生明显改变.4株GETVE2基因与云南其它地区分离株同源性高,亲缘关系近.新分离环状病毒的VP1基因与TIBOV亲缘关系最近,而与云南环状病毒(Yunnan orbivirus)存在明显差异.7株CppDNV的NS1基因与以往云南及其他省区流行株具有较高的同源性和亲缘关系.结论 首次证实该地区存在基因Ⅰ型JEV、GETV、TIBOV和CppDNV流行,这些流行株均具有较为稳定的遗传特征和地域特征.     

云南新分离四株流行性乙型脑炎病毒全基因组序列特征研究

目的 对云南省2009年和2010年分离的4株流行性乙型脑炎(乙脑)病毒进行全基因组序列测定和分析,阐明近期乙脑病毒流行株的分子生物学特征及基因型。 方法 通过反转录-聚合酶链反应和核苷酸序列测定方法获得病毒全基因组序列,采用Clustal X、DNAstar和Mega等生物学软件进行核苷酸和推导氨基酸序列分析及系统进化分析。 结果 2009年和2010年在云南省中部和西部地区三带喙库蚊(Culex tritaeriorhynchus)中分离到4株乙脑病毒,其中YN09M57株基因组全长10 967 bp,DH10M865、DH10M978和DHL10M62株基因组全长均为10 965 bp,均编码3432个氨基酸。这4株病毒核苷酸和氨基酸同源性分别为98.3%～99.9%和99.5%～99.9%,与来自GenBank的7株基因Ⅰ型乙脑病毒核苷酸和氨基酸同源性分别为98.3%～99.9%和99.7%～99.9%;与基因Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型参考株核苷酸和氨基酸同源性分别在78.7%～89.7%和91.4%～98.4%;与乙脑减毒活疫苗SA14-14-2株在E蛋白编码区有15个氨基酸位点差异,均位于抗原关键位点之外。基于E基因、全基因组系统进化分析显示云南4株乙脑病毒均为基因Ⅰ型,并形成2个进化分支,分别与相邻省份和东南亚流行株进化关系较近。 结论 云南新分离4株乙脑病毒属基因Ⅰ型,虽然它们之间及其与该型参考株核苷酸和氨基酸位点存在某些差异,但决定病毒毒力和抗原性的关键位点未见明显变化。本研究提示这些乙脑病毒流行株具有稳定的遗传特性和地域特征。     

2005年云南省肾综合征出血热监测研究

目的进一步掌握云南省‘肾综合征出血热（HFRS）的流行特点，为防治提供依据。方法收集全省HFRS疫情资料，并在监测点采集人群血清、鼠血清和鼠类肺脏做汉坦病毒抗体和抗原榆测。结果2005年全省共报告HFRS46例，年发病率为0．103／10万，无死亡病例。主要发病地区为大理州、昆明市、红河州。在国家级监测点泸西县、省级监测点寻甸县和永胜县捕获鼠类8种713只，其中居民区以黄胸鼠和褐家鼠为优势鼠种，野外以高山姬鼠为优势鼠种；鼠间带汉坦病毒率为3．22％（23／713），带病毒鼠种为褐家鼠、黄胸鼠、高山姬鼠、大绒鼠、臭朐鼯；采集鼠血清262份、人血清407份进行抗体检测，阳性率分别为4．96％（13／262）和3．19％（13／407）。其中，泸西县春夏季健康人群隐性感染率为3．00％（3／100），秋季为5．13％（4／78），秋季感染率明显高于春夏季。结论进一步证实云南省存在以褐家鼠和黄胸鼠为主要宿主的家鼠型HFRS疫源地，也存在着以高山姬鼠和大绒鼠为主的姬鼠型疫源地。近几年发病率的上升与较高的鼠密度和鼠间汉坦病毒普遍感染有关。     

云南省褐家鼠与黄胸鼠中汉坦病毒的流行病学研究

目的 研究云南省褐家鼠、黄胸鼠中汉坦病毒的感染情况及其型别，以明确基因亚型及其地理分布，为该地区肾综合征出血热（HFRS）的预防控制提供科学依据。方法 捕捉鼠类取鼠肺，冷冻切片后以间接免疫荧光法检测鼠肺中汉坦病毒抗原，从阳性鼠肺标本中提取病毒RNA，利用RT—PCR扩增汉坦病毒S和M基因部分片段并测序分型，构建系统发生树进行系统发生分析。结果 共捕获褐家鼠和黄胸鼠307只，检测到阳性样品14份，阳性检出率为4．56％。分析部分S片段（600～999nt）与M片段G1区（140～640nt）、G2区（2003～2302nt）的核苷酸序列，及用部分S及G2核苷酸序列构建的系统发生树，将来自云南省8个地区的汉城病毒分为2个亚型：S1和S3亚型。结论 云南省主要为家鼠型HFRS疫区，汉城病毒有2个亚型，地理分布较广。     

2004年云南省肾综合征出血热监测研究

目的进一步掌握肾综合征出血热（HFRS）在云南省的流行特点，为防治提供依据。方法收集全省HFRS疫情资料，并在固定监测点及面上常规调查中采集人血清、鼠血清和鼠肺做汉坦病毒（HV）抗体和抗原检查。结果2004年全省共报告HFRS 55例，死亡2例，年发病率0．13／10万，病死率为3．64％。主要发病地区为大理州、昆明市、红河州和楚雄州。在固定监测点泸西、寻甸和永胜县捕获鼠类10种803只，采集鼠血清314份，人血清313份，其中居民区以黄胸鼠和褐家鼠为优势鼠种，野外以高山姬鼠为优势鼠种；鼠带病毒率为3．89％（26／668），带病毒鼠有褐家鼠、黄胸鼠、小家鼠、高山姬鼠、臭鼩鼱和短尾鼩；对鼠及人血清抗体检测，阳性率分别为3．50％和2．24％。在滇西地区10个县（市）采集到16种896份鼠肺标本，带病毒率为3.01％（27／896），带病毒鼠有褐家鼠、黄胸鼠、小家鼠、大足鼠、短尾鼩、高山姬鼠和臭鼩鼱。结论进一步证实云南省存在以褐家鼠和黄胸鼠为主要宿主的家鼠型HFRS疫源地，也存在以高山姬鼠和大绒鼠为主的姬鼠型疫源地。近几年发病率的上升与较高的鼠密度和鼠间感染有关。     

三带喙库蚊和致倦库蚊胸腔接种乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株的研究

目的通过实验掌握SA14142乙脑减毒活疫苗株对蚊虫的敏感性,对该疫苗的特性和安全性进行确定。方法建立三带喙库蚊和致倦库蚊的实验室种群,将乙型脑炎SA14142疫苗株病毒和乙脑野毒株(Nak)悬液做10倍系列稀释,以100～109(共10个稀释滴度)胸腔接种两种库蚊,感染后分别于8天和12天每组取10只蚊虫,研磨制成悬液,应用空斑实验方法检测蚊虫体内的病毒存在情况和病毒滴度。结果接种疫苗株后两种库蚊在100～103稀释滴度下发生感染,在104～109稀释滴度时未发生感染;被感染的三带喙库蚊最高PFU为4.48logPFU/ml,致倦库蚊为5.63logPFU/ml。接种野毒株后,致倦库蚊在100～105稀释滴度时发生感染,最高PFU为6.59logPFU/ml;三带喙库蚊在100～104稀释滴度时发生感染,其最高PFU为5.74logPFU/ml。结论蚊虫经胸腔接种SA14142株后,该疫苗病毒能在三带喙库蚊和致倦库蚊体内繁殖。