聚合酶链反应结合限制性酶分析快速鉴定分支杆菌

以检测分支杆菌65kD 热休克蛋白编码基因的聚合酶链反应(PCR)为基础,建立快速鉴定分支杆菌种类的方法.方法经过处理的分支杆菌,用一对引物根据65kD 热休克蛋白编码基因序列进行PCR 扩增,得到—439bp 的扩增片段,再用限制性内切酶Bst EⅡ和Hae Ⅲ对扩增产物进行酶切;电泳,紫外光下观察     

结核分枝杆菌基因文库的构建

分枝杆菌基因及抗原的鉴定分析是评估它们在诊断，预防，耐药及致病性等方面的作用关键。为此作者以λｇｔｌｌ为载体构建了结核菌基因文库。结核菌Ｈ３７Ｒａ染色体ＤＮＡ经ＤＮａｓｅＩ部分消化后从凝胶中加收４－８ｋｂ片段，两端接以ＥｃｏＲＩ接头，并将其连接λｇｔｌｌ臂，用噬菌体包装蛋白“包装”，再进行连续稀释，然后将不同稀释度的噬萝体转染宿主菌Ｙ１０９０。     

过氧化氢酶-过氧化物酶基因与耐异烟肼结核分支杆菌

异烟肼(INH)是主要抗结核药物之一。耐INH 的临床分离株表现为过氧化氢酶活性降低和对豚鼠毒力的相对缺失。为此,研究了分支杆菌对INH 耐药的分子遗传学基础。方法和结果分离耻(耳后)分支杆菌突变株BH1(高度耐药,能在500μg/mL INH 中生长),用含具有结核分支杆菌(结核菌,H_(37)Rv 株)DNA 特征插入片段的穿梭质粒克隆转化。其转化物之一pBH4表现为INH 超敏感,最低抑菌浓度(MIC)为8μg/mL,过氧化氢酶活性     

结核分支杆菌rpoB基因克隆与酶谱分析

目的克隆结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因。方法以结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因保守区的聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增片段为探针从已建立的结核分支杆菌基因文库中筛选ｒｐｏＢ基因。结果引物ＴＲ１、ＴＲ２ｂ扩增Ｈ３７ＲａＤＮＡ获１约４１１ｂｐ片段。经克隆及序列分析表明该片段与结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因中央区域的序列同源。对约１２０００个克隆进行筛选，共获７个可疑阳性克隆，经过再次杂交证实其中３个克隆为阳性。其中１个克隆携带约３．８ｋｂ插入片段。一系列内切酶酶切分析后得出该３．８ｋｂ克隆片段的部分限制性内切酶酶谱。进一步分析表明所用４１１ｂｐ探针同源序列距两端分别为１ｋｂ和２．８ｋｂ。结论与报道的结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因开放阅读框架比较，我们克隆的３．８ｋｂ片段包含结核分支杆菌ｒｐｏＢ完整基因的大部分，为进一步研究利福平及其它利福霉素类药物抗结核作用方式及耐药机制奠定了基础     

胸腺瘤的现代疗法

胸腺瘤是一种胸腺上皮细胞肿瘤,临床上较为常见,但并非前纵隔最常见的肿瘤.和其它胸部恶性肿瘤不同的是进展缓慢和无恶性细胞学特征.本文将着重对胸腺瘤的放疗及晚期患者用顺铂为基础化疗的作用进行讨论。诊断胸腺瘤患者多为40～60岁,性别分布男女大致相等。常无症状,但也可能有不明原因的胸闷、胸痛等非特异性症状。诊断主要依靠X 线检查,CT有助于判断肿瘤范围。在已报道的各种合并症中,重     

结核分支杆菌trpoB基因克隆与特征

目的 克隆结构分支杆菌rpoB基因。方法 以结核分杆菌rpoB基因保守区的PCR扩增片段为探针从已建立的结核分支杆菌基因文库中筛选rpoB基因。结果 引物TR1，TR2b扩增H37RaDNA的一约411bp片段，经克隆及序列分析表明该片段与结核分支杆菌rpoB基因同源，对约12，000个克隆进行筛选，共获7个可疑阳性克隆，经过再次发校证实其中3个克隆为阳性，其中一个克隆携带约3.8Kb插入片段，一系列内切酶酶切分析后得出该3.8Kb克隆片段的部分限制性切酶酶谱，进一步分析表明所用411bp探针同源序列距两端分别为1Kb和2.8Kb。结论 与报道的结核菌rpoB基因开放阅读框架比较，本文克隆的3.8Kb片段包含结核菌rpoB完整基因的大部分，为进一步研究RFP及其它利福霉素类药物抗结核作用方式及耐药机制奠定基础。     

PCR—冷SSCP快速检测结核菌rpoB基因突变

为了评估ｒｐｏＢ基因突变检测在结核菌对利福平耐药性测定中的应用价值，作者对８７株结核菌临床分离株及有药敏结果的２２份相应肺结核患者痰标本进行了ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ分析。结果；ＰＣＲ扩增ｒｐｏＢ基因的敏感性１００ｐｇＤＮＡ及５０００个菌体，于分支杆菌特异。     

急性下腔静脉受压综合征

<正> 自1953年Howard等报告“妊娠后期仰卧位低血压综合征”后,引起了麻醉科和妇产科医生的注意,此后陆续有不少报道。1979年10月以来,我院在妇产科、骨科、外科等手术中都发现了急性下腔静脉受压情况。本文根据在临床麻醉中所遇到的一些问题,对急性下腔静脉受压综合征作一初步讨论。     

聚合酶链反应—冷单链构象多态性快速检测结核分支杆菌r…

评估ｒｐｏＢ基因突变检测在结核分支杆菌利福平耐药性测定中的应用价值。     

抗结核药物对非结核分枝杆菌菌种鉴定的试验

报告２２种非结核分枝杆菌典型株对１２种抗结核药物的敏感性试验结果,２２种非结核分枝杆菌在食ＴＨ１３２１,ＴＢ１,ＰＡＳ,ＩＮＨ培养其呈现不同程度耐药性,胞内分枝杆菌等１３种非结核分枝杆菌在含ＳＭ,ＥＭＢ,ＲＦＰ培养基呈现不同程度耐药性,鸟分枝杆菌等６种非结核分支杆菌在含ＮＦＬＸ,ＯＦＬＸ,ＣＦＬＸ培养基呈现不同程度耐药性,海分枝杆菌等３种非结核分枝杆菌在含ＣＰＭ培养其呈现不同程度耐药性,龟分枝杆菌