弓形虫缓殖子期特异性抗原1基因的克隆、表达及对重组抗原的免疫反应性分析

目的 克隆与表达弓形虫缓殖子期特异性抗原1(BAG1)的基因,并分析重组抗原的免疫反应性。方法 诱导体外培养的弓形虫RH株速殖子向缓殖子转化,用RT-PCR法从缓殖子期弓形虫扩增BAG1基因片段,进行序列分析;构建表达重组质粒pET32a(+)-BAG1,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达;表达蛋白经次氨基三乙酸镍(Ni-NTA)琼脂糖亲和层析纯化后,蛋白质印迹(Western blotting)分析与ELISA分析其免疫反应性。 结果 从缓殖子期弓形虫克隆的BAG1基因长690 bp,构建的重组质粒pET32a(+)-BAG1经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,可高效表达重组BAG1。Western blotting分析显示纯化的重组BAG1(SAG1)能被弓形虫慢性感染血清识别。ELISA结果表明重组BAG1抗原检测350份人血清弓形虫IgG抗体的阳性率为17.4％,显著高于重组SAG1抗原的阳性率12.6％（P＜0.05）。 结论 原核表达的重组BAG1抗原具有特异的免疫反应性。     

胆管阻塞性疾病108例超声显像分析

本文对 10 8例胆管阻塞性疾病的超声显像做一回顾性分析 ,并与手术病理结果对照 ,进一步评估超声在这类疾病中的诊断价值。1　临床资料1 1　一般资料 :病例系我院 1999年 1月至 2 0 0 2年 12月外科住院患者 ,10 8例中男 4 0例 ,女 6 8例 ,年龄 2 8～ 73岁 ,平均 5 4岁。临床均有不同程度黄疸 ,部分患者畏寒、发热、腹痛、黄疸等症状反复发作。1 2　方法 :使用AU 3及岛津SDU 4 0 0型超声诊断仪 ,探头频率 3 5～ 5 0MHz。对肝、胆、胰进行常规检查 ,重点观察肝内外胆管有无扩张 ,沿扩张胆管的走行作多切面扫查 ,根据需要变换患者体位并选…     

慢性心力衰竭病人主要照顾者生活质量及影响因素研究

[目的]探讨慢性心力衰竭病人主要照顾者的生活质量现状并分析其影响因素。[方法]采用一般资料调查表、健康调查简表(SF-36)、医院焦虑抑郁量表、中文版慢性心力衰竭病人照顾者客观负担量表对116例慢性心力衰竭病人的主要照顾者进行调查。采用相关及多元回归分析影响因素。[结果]除生命活力维度外,主要照顾者的生活质量各维度得分均明显低于国内常模。相关分析发现,主要照顾者的年龄、与病人关系、是否与病人同住、是否患有疾病、实用照顾负担与生活质量的多个维度均有相关性。进一步的多元逐步回归分析发现,主要照顾者本身是否患有疾病、年龄及抑郁是其生活质量的主要影响因素。[结论]慢性心力衰竭病人主要照顾者的生活质量低于一般人群。医护人员在关注心力衰竭病人康复的同时,不能忽视主要照顾者本身的健康状况及生活质量。     

儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的临床分析

目的分析儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的原因、诊断及治疗。方法手术摘除肥大的扁桃体和腺样体，术后疗效欠佳者予CPAP治疗。结果儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征最常见的原因是扁桃体肥大和腺样体肥大。术后90％患儿临床症状明显改善。结论扁桃体肥大和腺样体肥大是导致儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的主要原因，手术是治疗儿童阻塞性睡眠呼吸障碍的有效方法，多导睡眠监测是诊断儿童睡眠呼吸障碍的金标准。     

脑缺血合剂质量标准研究

目的建立脑缺血合剂的质量标准。方法采用薄层色谱（TLC）法对芍药苷、大黄素、大黄酚进行鉴别,采用高效液相色谱（HPLC）法测定芍药苷含量。结果TLC鉴别芍药苷、大黄素、大黄酚具有很好的分离效果,HPLC平均回收率为98.0%（RSD＝1.11%）。结论所建立的鉴别方法专属性强,定量方法简便、准确,可用于脑缺血合剂的质量控制。     

冠状动脉慢性闭塞性病变合并2型糖尿病患者临床特点及介入术后的预后研究

目的 探讨冠状动脉慢性闭塞性病变合并2型糖尿病患者的临床特点及经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的预后.方法 选择2009年278例冠心病行PCI患者,分为冠状动脉慢性闭塞性病变合并2型糖尿病组(CTO-DM组)137例和单纯冠状动脉闭塞病变组(单纯CTO组)141例,对比分析两组患者的临床特点及PCI后随访结果.结果 CTO-DM组患者总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL- C)、脂蛋白(a)[Lp(a)]水平高于单纯CTO组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于单纯CTO组,差异有统计学意义(P＜0.05).两组冠状动脉病变支数分布间差异有统计学意义(P＜0.05),病变血管分布间差异无统计学意义(P＞0.05).术后随访7～18个月,在随访期内两组患者分别复查冠状动脉造影术,结果显示两组术后支架内再狭窄(ISR)率、血管内再狭窄部位再次血运重建率间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 冠状动脉CTO-DM与单纯CTO患者的临床资料、冠状动脉病变、介入术后预后有显著差异,前者血管病变程度重,且PCI后远期预后相对理想,但ISR率和再次血运重建率高.     

三维聚丙烯酰胺凝胶DNA芯片用于大样本单核苷酸多态分型的方法研究

目的 建立三维聚丙烯酰胺凝胶DNA芯片用于大样本单核苷酸多态(single nucleotide polyrnorphisms,SNP)分型的方法.方法 丙烯酰胺基团修饰的PCR产物与丙烯酰胺单体混合后,在丙烯酰胺基团修饰的玻片上点样进行共聚合,建成三维凝胶DNA阵列;芯片与一对特异探针和一对分别标记了Cy3或Cy5的通用序列标签(Tag1和Tag2)进行杂交;杂交后用施加电场的方法去除非特异吸附和错配,最后通过双色荧光共聚焦扫描进行SNP分型.结果 3-D凝胶芯片不但具有很高的固定效率,而且可以提供高效的杂交环境;通用序列标签的使用木需对每个位点都标记荧光,使检测成本大幅降低;外加电场使得单碱基错配容易识别,且能显著降低芯片的信噪比.结论 基于3-D凝胶的基因芯片技术用于大样本SNPs分型简单易操作,且高通量、高特异性、低成本,该方法将可以更广泛地应用于不同需求的DNA检测中.