联合X-连锁基因多个多态性位点采用逆转录检测法进行造血细胞克隆性分析

目的 探索中国正常女性X-连锁葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G6PD)、P55、BTK、FHL-1基因外显子多态性位点的杂合子基因型频率,并探讨应用以上位点采用基于X染色体失活克隆性检测法-逆转录检测法进行造血细胞克隆性分析的价值.方法 采集446名中国正常女性外周血标本,提取基因组DNA,应用等位基因特异性PCR或PCR-限制性片段长度多态性方法 分析X-连锁G6PD、P55、BTK、FHL-1基因外显子多态性位点的杂合基因型频率.以上述杂合位点作为克隆性分析的标记,采用逆转录检测法分析有JAK2V617F突变或克隆性染色体异常的原发性血小板增多症(ET)女性患者造血细胞的克隆性.结果 446名中国正常女性G6PD基因杂合基因型频率为12.8%(57例),P55基因杂合基因型频率为29.4%(131例),BTK基因杂合基因型频率为52.0%(232例),FHL-1基因杂合基因型频率为46.4%(207例).4个多态性位点中具有至少1个杂合位点的正常女性占81.4%(363例).对G6PD、P55、BTK或FHL-1为杂合子且伴JAK2V617F突变的10例ET患者,应用逆转录检测法进行造血细胞克隆性分析,所有患者均为单克隆/寡克隆.结论 基于X染色体失活的克隆性检测法-逆转录检测法可用于约80%中国女性患者的克隆性分析.     

骨髓增生异常综合征患者血小板减少的预后意义初步研究

目的 探讨血小板减少对判断骨髓增生异常综合征(MDS)患者预后的意义.方法 回顾性分析419例原发性MDS患者临床资料,应用Kaplan-Meier、Log-rank检验及COX回归模型评估影响预后的因素.结果 419例MDS患者中血小板减少(PLT<100×109/L)者256例(61.1%),严重减少(PLT<30×109/L)者103例(24.6%).PLT≥100×109/L组、(50～99)×109/L组、(30～49)×109/L组和<30×109/L组患者中位生存时间分别为41、38、19和17个月,差异有统计学意义(P=0.000).单因素分析显示PLT<30×109/L、红细胞平均体积(MCV)≤95 fl、LDH≥300 U/L、有淋巴样小巨核细胞、有核红细胞糖原染色(E-PAS)阳性、国际预后积分系统(IPSS)染色体核型预后中等及不良为MDS不良预后因素;WHO分型中难治性血细胞减少伴有多系发育异常(RCMD)、难治性贫血伴有原始细胞过多(RAEB)-Ⅰ及RAEB-Ⅱ的患者较其他类型的患者预后差.多因素分析显示PLT<30×109/L,MCV≤95 fl,IPSS染色体核型预后中等及不良,WHO分型RCMD、RAEB-Ⅰ及RAEB-Ⅱ具有独立预后意义.修订的WHO分型预后积分系统(WPSS)各参数赋值如下:PLT <30×109/L 1分,其他0分; MCV≤95 fl 1分,其他0分;染色体核型良好0分,中等1分,不良2分;WHO分型中RCMD 1分,RAEB-Ⅰ2分,RAEB-Ⅱ3分,其他0分.患者分为低危(0～1分)、中危-1(2～3分)、中危-2(4～5分)和高危组(6～7分),其中位生存期分别为59、28、14和4个月,各组间差异具有统计学意义(P值均<0.05).结论 血小板严重减少的MDS患者预后不良,结合血小板计数、染色体核型、MCV及修订的WPSS有望更好地促进我国MDS患者分组治疗策略的制订.     

小剂量马法兰治疗中、高危骨髓增生异常综合征临床疗效观察

目的 观察小剂量马法兰治疗中、高危骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效和药物不良反应.方法 共有按MDS国际预后积分系统(IPSS)判断为中、高危组的30例初治患者入组.治疗方案为:马法兰2 mg,口服,每日1次,直至病程进展所致全血细胞减少加剧或骨髓原始细胞比例增高停药.达完全缓解(CR)或部分缓解(PR)者继续用药直至病情复发停药.结果 按2006年MDS 国际工作组(IWG)疗效修订标准判定,CR 9例(30.0%),PR 3例(10.0%),骨髓缓解(MCR)加血液学进步(HI)3例(10.0%),MCR 1例(3.3%),病情稳定4例(13.3%),治疗失败10例(33.3%).总有效率66.7%.骨髓增生活跃及以下组患者的CR+PR率(60.0%)和总有效率(80.0%)明显高于骨髓增生明显活跃及以上组(分别为0%和40%)(P值分别为0.002和0.045).中位随访时间为15.5(1～52)个月,中位生存时间为18个月,中位无复发生存时间为11个月.治疗过程中3例患者出现轻度骨髓抑制,1例因血小板输注无效导致脑出血而死亡,未见其他明显药物不良反应.结论 小剂量马法兰是治疗中、高危MDS患者的一种安全、有效的方法,并且可能更适用于骨髓增生低下的患者.     

骨髓增殖性肿瘤患者巨核细胞病理特征及其与起始基因突变的相关性

目的探讨骨髓增殖性肿瘤(MPN)巨核细胞病理特征及其与起始基因突变的相关性。方法收集2012年2月至2017年10月于中国医学科学院血液病医院就诊的160例初诊MPN患者,根据世界卫生组织(WHO)2016年MPN诊断标准对患者骨髓活检组织切片进行重新评估。结果 160例患者中男72例(45.0%),女88例(55.0%),中位年龄59(13～87)岁。重新评估后真性红细胞增多症(PV)39例,原发性血小板增多症(ET)33例,纤维化前/早期原发性骨髓纤维化(pre-PMF)37例,明显期原发性骨髓纤维化(overt PMF)37例,真性红细胞增多症后骨髓纤维化(post-PV MF)2例,原发性血小板增多症后骨髓纤维化(post-ET MF)1例,MPN-未分类(MPN-U)11例。按PV、ET、pre-PMF及overt PMF疾病亚型顺序,密集成簇分布、少分叶核及裸核巨核细胞逐渐增加,红系增生程度正常及增高的比例逐渐降低,1级及以上网状纤维、胶原及骨硬化的比例逐渐升高。相关性分析示密集成簇分布、少分叶核及裸核巨核细胞占比与红系增生程度呈负相关,与粒系增生程度及纤维化程度呈正相关。...     

国产阿扎胞苷治疗较高危骨髓增生异常综合征患者的疗效和安全性分析：多中心、前瞻性、单臂研究

目的评估国产阿扎胞苷治疗较高危骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes, MDS)的疗效、安全性及药代动力学特征。方法 2013年10月至2016年10月国内10家中心共纳入72例符合入排标准的较高危MDS患者接受国产阿扎胞苷75 mg·m-2·d-1,皮下注射,持续7 d治疗,4周为1个周期,至少治疗6个周期。药代动力学试验采血为单次给药第1天进行。结果治疗6个周期或6个周期以前终止用药时疗效评估数据显示,总缓解率[完全缓解(CR)+部分缓解(PR)]为6.9%(5/72),治疗期间最佳疗效为CR或PR的患者比例为12.5%(9/72)。治疗期间脱离红细胞和血小板输血依赖的患者分别为46.3%(19/41)和41.2%(7/17)。72例患者中位治疗时间为6个周期,中位总生存(OS)期16.1(95%CI 10.9～20.6)个月,其中治疗≥6个周期患者36例(50%),中位OS期22.3(95%CI 16.1～不可评估)个月。治疗中最常见的Ⅲ～Ⅳ级血液学不良事件为中性粒细胞减少(55%)、白细胞减少(47%)和血小板减少(61%)。药代动力学行为和参数...     

原发性骨髓纤维化和骨髓增生异常综合征伴骨髓纤维化患者纤维驱动细胞的研究

目的比较原发性骨髓纤维化(PMF)和骨髓增生异常综合征伴骨髓纤维化(MDS-MF)患者纤维驱动细胞的差异。方法随机选取MF-0/1、MF-2和MF-3级的初诊PMF和MDS患者各10例,骨髓活检组织切片利用特异性免疫荧光抗体标记Gli1、LeptinR、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CD45和Procollagen Ⅰ,共聚焦显微镜成像后利用Fiji-ImageJ软件计数Gli1+、LeptinR+细胞及α-SMA+、α-SMA+/Gli1+、α-SMA+/LeptinR+和ProcollagenⅠ+/CD45+等纤维驱动细胞。结果 MF-2/3级PMF和MDS患者LeptinR+、α-SMA+、α-SMA+/Gli1+和ProcollagenⅠ+/CD45+等细胞计数均显著高于MF-0/1级患者(P<0.05)。但MF-2/3级PMF患者Gli1+、α-SMA+/LeptinR+细胞计数显著高于MF-0/1级PMF患者(P值分别为0.001、0.006),而MDS患者中两组患者两群细胞计数差异无统计学意义(P值分别为0.169、0.067)。MF-0/1级患者中,PMF与MDS...     

全反式维甲酸联合高三尖杉酯碱治疗急性早幼粒细胞白血病的临床研究

 目的 研究全反式维甲酸（ATRA）联合高三尖杉酯碱（HHT）治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）的可行性、疗效及不良反应。方法 选择初诊的APL患者26例随机分为研究组和对照组,分别给予ATRA或柔红霉素（DRN）／米托蒽琨（Mit）联合HHT诱导治疗,HA或DA／MA方案巩固治疗。在诱导及巩固治疗各疗程结束时分别对比两组病例的CR率、融合基因情况、不良反应及无病生存期（DFS）,并进行统计学分析。结果 研究组在诱导结束时全部病例获血液学缓解,缓解率为100 ％,融合基因转阴率为63.6 %。巩固第一疗程结束时融合基因转阴率为100 ％（至随访截止时间）。累计生存率为85.7 ％。诱导治疗期间中位累计血浆输注量为670 ml,中位累计血小板输注量32 U。对照组1例患者早期死亡,诱导结束时其余病例获血液学缓解。融合基因转阴率为38.5 %,巩固第一疗程结束时融合基因转阴率为91.7 %,累计生存率为75.6 ％。诱导治疗期间中位累计血浆输注量为760 ml,中位累计血小板输注量32 U。两组比较,在疗效、融合基因转阴率、累计生存率（85.7 %／75.6 %）及不良反应等方面均相似,在诱导治疗融合基因转阴率方面研究组似有优势,差异无统计学意义。结论 ATRA联合HHT治疗APL在疗效、融合基因转阴率、血浆及血小板输注量及不良反应方面差异无统计学意义,作为新诊断APL治疗的新选择,也可取得分子生物学缓解。     

基于常规实验室检查指标的改良WPSS预后积分系统对骨髓增生异常综合征预后判断意义的初步研究

目的 评价WPSS预后积分系统在我国骨髓增生异常综合征(MDS)患者预后判断中的作用,并对常规实验室检查指标用于MDS患者预后判断进行初步研究.方法 对染色体核型结果 可供分析的164例成人原发MDS患者进行回顾性分析.结果 164例患者中位随访时间19(1-138)个月,中位生存(MS)期36个月.2年预期生存(PS)率60%,5年PS率42%.按WPSS评分,极低危组、低危组、中危组、高危组和极高危组的2年PS率分别为100%、96%、81%、38%和14%,5年PS率分别为100%、83%、54%、20%和0,Log.rank检验各组总体生存(OS)率差异有统计学意义(P<0.01).常规实验室检查中,Hb≥80 g/L、平均红细胞体积(MCV)升高(>95 fl)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)升高(>32 Pg)、BPC≥100×109/L的患者预后较好;骨髓原始细胞比例(Blast)≥0.05的患者较<0.05的患者预后差,骨髓细胞发育异常≥2系的患者预后较差;细胞组化检查中性粒细胞碱性磷酸酶(N-ALP)阳性指数升高(>173.21)、有核红细胞糖原染色(E-PAS)阴性的患者预后较好.小巨核酶标染色可见淋巴样小巨核细胞(MEGIy)的患者预后较差.另外,血清乳酸脱氢酶水平升高(≥300U/L)的患者预后较差.将上述单因素分析有预后意义的参数纳入COX多因素模型筛选,MCV、MEGIy、Blast具有独立预后意义(P值分别为0.011、0.013、0.016).选取MCV、MEGly及WHO分型提出改良的WPSS积分系统,低危组、中危组、高危组患者的2年PS率分别为94%、68%和49%,5年Ps率分别为86%、53%和14%,经Log-rank检验各组OS率差异有统计学意义(P<0.01).结论 与WHO分型相适应的WPSS适合用于判断我国MDS患者的预后.采用常规实验室检查指标中的MCV、MEGly及WHO分型提出的改良WPSS积分系统可望提供适于我国现阶段基层单位的MDS预后判断标准.     

自由基捕获剂NXY-059可改善急性缺血性卒中患者转归

动物实验证实，自由基捕获剂NXY-059能缩小急性脑缺血的梗死体积并改善神经功能，是一种符合卒中治疗学术产业圆桌会议（Stroke Therapy Academic Industry Roundtable，STAIR）标准的神经保护剂。据最近的N Engl J Med报道，急性缺血性卒中后早期给予NXY-059能显著改善患者转归。     

美罗华联合化疗治疗侵袭性B细胞非霍奇金淋巴瘤的临床分析

目的：评价美罗华联合化疗治疗侵袭性B细胞非霍奇佥淋巴瘤的疗效，分析影响疗效的相关因素。方法：回顾性分析我科采用美罗华联合化疗治疗32例侵袭性B细胞非霍奇金淋巴瘤的疗效及影响因素、结果：31例可评价行效，完全缓解（CR）20例（64．5％），部分缓解（PR）7例（22．6％）总有效率（CR＋PR）87．1％。其中25例初治患者CR 20例（80．0％），PR5例（20．0％），总有效率100％；6倒难治复发患者PR2例（333％），SD2例（33．3％），PD2例（33.3％），总有效率33.3％。初治患者和复发难治患者中位无进展生存（Progression—free Surival,PFS）时间分别为72.0（2-74）个月、7．2（1～12）个月。治疗前按东部肿瘤协作组（Easterm Cooperative Oncology Group.ECOG）标准评定的体力评分对疗效有明显影响（P〈0．05）。单因素分析表明血清乳酸脱氢酶水平、ECOG体力评分、国际预后指教（International Prognosis Index，IPI）评分和染色体核型异常与总体生存（Overall Survival，OS）时间和PFS均有关（P〈0.05），B症状与PFS有关（P〈0．05）。COX回归多因素分析发现只有IPI评分对PFS的影响有统计学意义（P=0．01），相对危险度（RR）为9．34结论：美罗华联合化疗治疗初治侵袭性B细胞性非霍奇金淋巴瘤疗效显著，可作为CD20阳性侵袭性B细胞非霍奇金淋巴瘤的首选治疗。