手动膜片钳检测HMS-01对HEK293细胞hERG通道电流的影响

目的 检测新化合物HMS-01有无心脏毒性,对其进行临床前安全评价研究,为进入临床试验做准备.方法 用手动膜片钳检测转染后hERG钾通道稳定表达的HEK293细胞的电流,西沙必利做阳性药,将HMS-01依次稀释成0.3、1、3、10、30μmol/L,依次作用于细胞,记录电流变化,计算抑制率.结果 HMS-01在实验设...     

气相色谱法测定破壁灵芝孢子粉中油酸及亚油酸的含量

目的建立破壁灵芝孢子粉中油酸、亚油酸的含量测定方法。方法采用气相色谱法,色谱柱为美国Phenomenex公司ZB-WAX毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm);色谱条件:程序升温,检测器温度280℃,进样口温度280℃;按内标法测定含量。结果油酸、亚油酸分别在0.4014～2.0072μg(r=0.9991)、0.1330～0.6648μg(r=0.9989)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为96.38%(RSD=1.40%)、96.90%(RSD=1.12%)。结论本方法操作简便,结果可靠,重复性好,可用于该产品质量控制。     

连翘炮制工艺研究

目的:探讨不同炮制方法对连翘主要化学成分含量及活性等指标的影响,为连翘的合理炮制提供依据.方法:采用《中国药典》浸出物测定法测定浸出物含量;用HPLC法分析比较不同炮制条件对连翘化学成分含量的影响;用DPPH清除自由基法评价抗氧化作用;通过对金黄色葡萄球菌的抑菌效果评价抗菌作用.结果:综合考虑各因素的影响,确定的最佳水煮炮制条件为,加6倍水,沸水煮8 min.结论:不同炮制条件下连翘中化学成分含量及活性等有明显不同.     

当归补血汤在流体剪切应力环境中对内皮细胞功能的影响

目的观察当归补血汤在流体剪切应力(FSS)环境中对人内皮细胞功能的影响。方法将细胞置于平行平板流动小室,加载稳定层流FSS(0,0.12,1.2,2.4 Pa)6 h后,将不同FSS环境中的细胞随机分为5组:对照组加入无血清培养液灌流;辛伐他汀组加入含0.1μmol/L辛伐他汀培养液灌流;3个中药组分别加入含3 g/L的当归补血汤(当归、黄芪比为1∶1、1∶3、1∶5)培养液灌流。以上各组经FSS加载12 h后,收集细胞及灌流液,检测细胞增殖力、一氧化氮(NO)含量,细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)mRNA及蛋白的表达。结果对照组FSS为1.2、2.4 Pa时,内皮细胞表达eNOS、VEGFR2的水平较其在0、0.12 Pa时升高(P0.05);与对照组相比,当归补血汤在FSS为0、0.12 Pa时能上调细胞eNOS、VEGFR2表达并增强其增殖和分泌NO功能(P0.05)。且当归补血汤(当归、黄芪比为1∶3、1∶5)在FSS为1.2、2.4 Pa时可上调细胞eNOS、VEGFR2表达并增强其增殖和分泌NO功能(P0.05)。结论 FSS环境是影响当归补血汤对内皮细胞作用效果的重要因素之一。     

HMS-01在大鼠体内的药动学研究

目的研究HMS-01在大鼠体内的药动学,为后续研究提供支持。方法采用液相色谱-串联质谱(LCMS/MS)技术,建立灵敏、特异的测定血浆等生物样品中HMS-01浓度的分析方法,用建立的方法开展HMS-01在大鼠体内药动学研究。在SD大鼠上分别进行了1个剂量单次灌胃给药、1个剂量单次静注给药的药动学研究,以获得基本药动学参数。结果大鼠静脉注射1 mg/kg的HMS-01后,雄性与雌性大鼠血浆浓度-时间曲线下面积(AUC0-t)分别为221和409 ng·h/ml,平均清除率分别为4.53和2.41 L/h·kg,平均血浆消除半衰期分别为0.786和1.27 h,表观分布容积分别为5.13和3.82 L/kg。灌胃给予30 mg/kg的HMS-01后,在大鼠体内血浆浓度达峰时间tmax为1.17 h,达峰浓度cmax为1243 ng/ml,消除半衰期(t1/2)为2.00 h。雄、雌大鼠AUC0-t分别为2271和8529 ng·h/ml,生物利用度分别为34.3%和69.5%。结论HMS-01在大鼠体内的药动学过程存在显著的性别差异,口服吸收较好,雌性大鼠的生物利用度远高于雄性。     

Exosome在细菌和病毒感染中的作用研究

【摘要】外泌题（Exosome）作为生物活性载体,最早被认为仅仅负责细胞垃圾清运工作;然而近年来大量关于exosome与人类免疫缺陷病毒、乙型肝炎病毒、结核分枝杆菌以及其他病原体的研究成果,揭示了exosome功能的复杂性和多样性,如转运和传送各种调节因子、病原体核酸和蛋白质以及宿主细胞的miRNA和细胞因子至未感染细胞,以调节机体的免疫应答。Exosome既可以激活免疫促进炎症反应,也可以抑制免疫反应助力病毒的扩散。本文对exosome在细菌性和病毒性感染中扮演的角色及相关机制作一综述。     

低剪切力下当归补血汤对内皮祖细胞功能损伤的保护作用

目的观察低剪切力(shear stress,SS)作用下当归补血汤对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能的影响及调控机制。方法分离培养大鼠骨髓EPCs并鉴定,将EPCs随机分为6组:正常SS组和低SS组(M199培养液培养2 h)、辛伐他汀组(0.1μmol·L^-1的辛伐他汀培养2 h)、当归补血汤高、中、低浓度组(分别予以3.2 g·L^-1,1.6 g·L^-1,0.8g·L^-1的当归补血汤培养2 h),培养结束后弃上清,正常SS组加载1.2 Pa的正常SS,余各组加载0.12 Pa的低SS,分别在第30、60、360 min检测EPCs的增殖、迁移和成小管功能、一氧化氮(nitric oxide,NO)分泌、一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)mRNA及蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)的表达。结果与正常SS组比较,低SS组EPCs功能随时间延长而受损,细胞分泌NO及表达eNOS mRNA、Akt蛋白在60min时迅速上调(P<0.01),随后在360 min时显著降低;与低SS组比较,辛伐他汀和当归补血汤高、中浓度可促进360 min时的细胞功能和NO分泌,上调eNOS mRNA及Akt蛋白的表达(P<0.05)。结论当归补血汤可通过调节NO/eNOS/Akt通路来保护低SS作用下受损的EPCs功能。     

细菌性眼内炎患者血浆白介素-6与降钙素原的表达及相关性探讨

目的:分析细菌性眼内炎患者急性期和缓解后血浆白介素-6(IL-6)和降钙素原(PCT)水平的变化及其相关性,探讨其临床意义.方法:选取2018年3月—2019年8月期间盐城市第一人民医院收治的临床确诊为细菌性眼内炎的患者41例(41只眼),作为细菌感染组;同期选择28例无基础疾病的健康者,作为健康对照组,分别测定在入院时、治疗缓解后及健康对照者血浆IL-6、PCT水平,并行相关分析.结果:细菌感染组急性期和缓解期血浆IL-6和PCT水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);细菌感染组急性期患者血浆中IL-6与PCT水平呈正相关关系(r=0.502,P=0.001).结论:IL-6、PCT二者均参与细菌性眼内炎急性炎症过程,二者联合对诊断细菌性眼内炎有一定的临床意义.     

癃闭的古代中药外治法探析

癃闭是临床常见急症,表现为小便量少,点滴而出,甚至闭塞不通.特别是反复发作的癃闭,西药及手术治疗并不理想,长期反复导尿易致尿路感染等,中医药外治癃闭疗效肯定、历史悠久,早在唐代,医圣孙思邈就首次用葱管导尿法解除癃闭急症,后张景岳在《景岳全书·癃闭》亦记载了三种通闭之法:①猪溲胞法;②皂角、葱头、王不留行熏洗法;③鹅翎、水银通导法,两种为导尿法,一种为药物外治法.关于我国古代癃闭中药外治法的论述及应用多散在于众多本草、方书以及古代临床著作中,结合实际整理如下.