沉默树突状细胞恒定链以增强其抗肿瘤作用的体外实验研究

目的初步观察用小分子干扰RNA(siRNA)沉默树突状细胞(DCs)恒定链(Ii)后,DCs疫苗的体外抗肿瘤效果。方法从小鼠骨髓分离骨髓前体细胞,细胞经100 ng/ml GM-CSF和100 ng/ml IL-4诱导培养6 d后,转染针对DCs Ii链特异的Ii-siRNA,转染后加用50 ng/ml TNF-α继续诱导细胞成熟48 h,然后分别用Western blot检测沉默效果及CCK-8试剂盒检测DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力;此外,DCs共转染Ii-siRNA和小鼠胃癌前体细胞MFC的总RNA后,与同种异体淋巴细胞共培养,通过ELISA检测培养上清IFN-γ/和IL-4的水平,并收集致敏淋巴细胞进行体外杀伤实验。结果Ii-siRNA明显抑制DCs Ii的表达。沉默Ii链能够增强DCs的淋巴细胞增殖能力,并促使淋巴细胞向Th1的方向漂移[IFN-γ:(5107±351)pg/ml,IL-4:(65±13)pg/ml,P＜0．05]。淋巴细胞经共转染Ii-siRNA和MFC RNA的DCs激活后,明显而特异地杀伤靶肿瘤细胞(杀伤百分率: 66．94%±2．75%,P＜0．05)。结论通过siRNA沉默DCs的Ii链可能是一种行之有效的增强抗肿瘤免疫的方法。     

伊里扎洛夫理论与技术在骨科学术界不同反响的思考(续)

4.伊里扎洛夫(Ilizarov)的理论与技术在国内外骨科学术界的不同反响:(1)1981年,Ilizarov的发现与发明首先传入到意大利,1986年引进到北美,引起西方国家(包括墨西哥、委内瑞拉)及亚洲一些国家(如日本、印度、韩国等)骨科学界的轰动,纷纷邀请Ilizarov及其弟子赴各国讲学。在前苏联未解体之前,Ilizarov技术、器械被视为国宝,严禁出口。西方国家的医生很难进入前苏联境内,但他们不惜战胜重重困难,奔赴距莫斯科2000多公里的西西伯利亚,库尔干(Kurgan)小城市,虔诚的考察学习这一新的理论与技术。库尔干市地区偏僻,学习条件很艰苦,该医院的医护人…     

儿童口腔不良习惯与错He畸形的相关性研究

目的 探讨儿童口腔不良习惯与错He畸形的内在联系。方法 随机抽取门诊患者363例，采用问诊与视诊、口内检查相结合的方法，确定患者有无口腔不良习惯和错He畸形。结果 363例患者中，不良习惯患者86例，发病率23．69％，错He畸形者201例，发病率55．37％，错He畸形患者中，有不良习惯者57例，占28．36％，正常He儿童不良习惯发病率为17．90％，具有不良习惯的儿童，错He畸形发病率为66．28％。结论 口腔不良习惯与错He畸形之间有着本质上的联系，是引起错He畸形的主要原因之一。     

成年人马蹄内翻足的分型与外科治疗

1984～1995年共收治各种马蹄内翻足1074例,18岁以上的成年人491例,术后获得1年以上随访者296例,男173例,女123例。年龄最小18岁,最大61岁,平均27.8岁。其中>45岁者9例。左下肢139例,右下肢120例,双下肢37例,共333个足。导致马蹄内翻足的病因14种,其中小儿麻痹后遗症175例,占59.1％。333个足共施行369人次手术,30例畸形严重者分两期手术矫正。6例因术后畸形矫正不足,关节融合不好又施行了二次手术。术后随访1年～8年9个月,平均3.5年,优321个足,占96.4％。差12个足。     

不同临床情况下小密低密度脂蛋白的水平及血脂康调血脂治疗对其的影响

小密低密度脂蛋白(LDL)因其特别的结构及致病作用,近年来受到越来越多的重视。不过在不同临床病理状态下,小密LDL含量是否存在差别尚少见报道,本文首先研究不同临床状态和不同类型的高脂血症患者血清小密     

反向血凝抑制试验在鼠疫疫情处理中的应用和结果分析

目的 了解反向血凝抑制试验方法对鼠疫病原体的诊断效果。方法 应用反向血凝抑制试验方法对鼠疫可疑疫区的动物脏器及疑似病人的淋巴液标本检测和对阳性结果作噬菌体裂解试验方法进行比较。结果 使用反向血凝抑制试验和噬菌体裂解试验方法的阳性结果基本一致。结论 反向血凝抑制试验是检测鼠疫病原体方便、特异、快速的好方法。     

人ARPC2基因的克隆与表达

目的 构建人His-ARPC2融合蛋白表达载体，并在原核细胞中进行表达与纯化．以研究其功能及鉴定与其相互作用的蛋白。方法 采用PCR方法从人肝cDNA文库扩增ARPC2基因编码区,使用常规酶切、连接方法将其重组至pET-14b载体中。对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定。转化BL21(DE3)大肠杆菌株，用异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达，并利用Ni-NTA亲和层析纯化该融合蛋白。结果 所构建的人ARPC2的His融合蛋白表达载体是正确的，该载体可在大肠杆菌内高效表达，用Ni-NTA纯化获得了相对分子质量约36000的融合蛋白。结论 成功构建了人His-ARPC2融合蛋白表达载体，并在原核细胞中获得了高效表达和纯化，为进一步研究ARPC2的生理功能提供了重要的实验材料。     

紫杉醇诱导胰腺癌细胞凋亡Survivin表达的变化及意义

目的研究紫杉醇（PA）体外化疗对胰腺癌细胞凋亡抑制蛋白Survivin基因表达的影响。方法培养人胰腺癌细胞株SW1990，加入低浓度的PA，用流式细胞仪分别检测加药前和加药后24、48h的细胞凋亡率，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹技术（Western blot）检测Survivin mRNA和蛋白的表达。结果SW1990细胞给予低浓度的PA后，加药前和加药后24、48h的细胞凋亡率分别为（2．59±0．35）％、（14．75±1．29）％、（22．65±2．80）％；其Survivin mRNA的表达则分别比加药前提高了1．1倍和2．9倍；Survivin蛋白的表达分别增加了1．3倍和3．6倍。结论应用PA化疗可促使胰腺癌细胞内Survivin表达的增加，抵抗化疗诱导的细胞凋亡。