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目的:原代培养并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs),对hUCMSCs的生物学性状、表面抗原、多向分化潜能等进行研究,并初步检测其内源性Hedgehog(Hh)信号通路主要因子的RNA水平。方法:取足月健康剖宫产胎儿脐带,提取hUCMSCs,贴壁培养。绘制生长曲线,检测细胞周期。进行体外成骨、成脂及成软骨诱导。流式细胞仪检测细胞表面标志物。Real-time PCR检测原代细胞内源性Hh信号通路主要因子的mRNA水平。结果:脐带剪碎经胶原酶消化后24 h细胞即可贴壁,7 d可生长达培养皿底面积85%融合。 P3代hUCMSCs的生长曲线呈上升趋势,传代后第3 d进入倍数生长期。并具有成骨分化、成脂分化及成软骨分化的能力。流式细胞仪检测99.04%的细胞高表达整合素分子CD29,98.80%的细胞高表达粘附分子CD44,85.09%的细胞高表达内皮糖蛋白分子CD105,只有0.19%的细胞表达造血干细胞标记物CD45,0.58%的细胞表达血管内皮分子CD34。脐带来源的间充质干细胞内能检测到Hh信号通路中主要因子的内源性表达,其中Shh水平相对较高。结论:原代培养的hUCMSCs为进一步探索Hh信号通路在颅颌骨缺损修复中的作用机制提供可靠的细胞来源。 相似文献