人骨形成蛋白2的基因克隆和序列分析

目的　探讨克隆人骨形成蛋白 2基因编码区的方法。方法　由人末梢血白细胞中提取细胞总DNA ,利用PCR法 ,从DNA中分别扩增出人骨形成蛋白 2外显子编码区基因DNA片段 ;将获得的基因片段插入PGEM -T -Easy质粒中 ,转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆 ,利用限制性内切酶酶切核苷酸序列分析鉴定后 ,连接获得人骨形成蛋白 2基因。结果　通过质粒DNA酶切分析及序列测定 ,我们获得的基因片段为人骨形成蛋白 - 2DNA序列。结论　首次由人白细胞DNA中克隆获得人骨形成蛋白 2全长基因 ,为表达、应用骨形成蛋白 2提供了前提条件     

秋天当“平补”

古人在长期的生活实践中,不但知道食物具有五种不同的味道,并且认识到五昧各有不同的作用,与五脏有着密切的关系,有五味归五脏之说。     

人骨形成蛋白2的基因克隆和序列分析

目的 探讨克隆人骨形成蛋白2基因编码区的方法。方法 由人末梢血白细胞中提取细胞总DNA，利用PCR法，从DNA中分别扩增出人骨形成蛋白2外显子编码区基因DNA片段；将获得的基因片段插入PGEM—T—Easy质粒中，转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆，利用限制性内切酶酶切核苷酸序列分析鉴定后，连接获得人骨形成蛋白2基因。结果 通过质粒DNA酶切分析及序列测定，我们获得的基因片段为人骨形成蛋白—2DNA序列。结论 首次由人白细胞DNA中克隆获得人骨形成蛋白2全长基因，为表达、应用骨形成蛋白2提供了前提条件。     

抗生素腹腔灌注结合体外短波治疗盆腔炎性疾病后遗症的疗效观察

盆腔炎是妇科常见病、多发病,大多是由于病原体经生殖道或经期子宫内膜剥脱面以及生殖道手术的创面侵入所致。致病菌可由肛门、外阴进入阴道,沿黏膜上行感染至腹腔,也可经血行播散至生殖器官;或经淋巴系统蔓延至盆腔。引起盆腔炎的病原体种类繁多,有溶血性链球菌、厌氧链球菌、金黄色葡萄球菌及大肠杆菌。     

5-脱氧杂氮胞苷对上皮性卵巢癌细胞株生长及侵袭力的影响

目的 探讨不同浓度的甲基转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷(5-Aza-CdR)对上皮性卵巢癌细胞系ES2、SKOV3细胞生长和体外侵袭力的影响.方法 应用甲基化特异性PCR检测上皮性卵巢癌细胞系ES2及SKOV3 E-cad基因启动子区5'CpG岛甲基化状况.观察ES2和SKOV3用5-Aza-CdR处理前后细胞的形态变化.用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长情况并绘制生长曲线.用Transwell 小室法检测药物处理前后细胞侵袭力的变化.结果 经不同浓度5-Aza-CdR处理后SKOV3细胞的穿膜细胞数发生了明显变化,分别为对照组(97.6±2.7)个,5-Aza-CdR 0.1μmol/L组(88.2±2.1)个,5-Aza-CdR 1 μmol/L组(60.5±2.2)个,5-Aza-CdR 10 μmol/L组(36.2±3.0)个,随着药物浓度的增高穿膜细胞数逐渐下降,在10 μmol/L浓度时穿膜细胞数最少.结论 甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR能够使卵巢癌细胞的恶性生物学行为发生部分逆转,其在卵巢癌治疗方面的价值值得进一步探讨.

Abstract：

Objective To observe the effects of different concentrations of 5 - aza cdr ( methyl transferase inhibitor) on epithelial ovarian cancer cell line ES2, SKOV3 growth inhibition and invasive capacity. Methods Methylation-specific polymersse chain reaction was applied to detect epithelial ovarian cancer cell line ES2, 3AO and SKOV3 E-cad gene promoteR5'CpG island methylation status. The morphological change of ES2 and SKOV3 before and after treatment with 5- Aza CdR was observed. Thiazolyl blue (MTT) method was used to detect cell growth and the growth curve. The change of cell invasive capacity was detected by transwell chamber method before and after treatment. Results After being treated by different concentrations of 5-Aza-CdR, invasive cell numbers in SKOV3 changed dramatically. Invasive cell numbers of the control group, 5-Aza 0. 1 μmol/L group, 5-Aza 1 μ mol/L group and 5-Aza 10 μmol/L group were (97.56 ±2.67), (88.23 ±2.12), (60.46 ±2.25) ,(36.21 ±2.98), respectively. With the increase of drug concentration,the number of penetrating cells decreased. Conclusion Methyl transferase inhibitoR5-Aza-CdR can partially reverse the malignant behavior of ovarian cancer cells.     

都市高收入人群宫颈高危HPV感染与TCT的相关研究

目的了解北京市高收入女性人群宫颈高危HPV感染常见分型及高危HPV感染与液基细胞学异常的相关性。方法对2008年1月至2008年12月间就诊于北京五洲女子医院妇科门诊的女性2023例,采用导流杂交法进行16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、6、11、42、43、44、CP8304等21种宫颈人乳头状瘤病毒亚型的分型检测。同时进行液基薄层细胞学检测(TCT)。结果检测2023人次中感染高危HPV亚型618例,感染率30.5%,排在前5位的高危亚型是58(21.68%)、16(16.99%)、33(11.32%)、53(8.09%)、52(7.76%)。感染高危HPV618例中TCT异常的278例,其中ASCUS133例、LSIL124例、HSIL21例。结论北京市高收入女性人群宫颈高危HPV感染率较高,主要为单一感染,感染亚型主要是58、16、33、53、52型。其中16、58型的致病性较其他分型高。     

依托咪酯对心率压力反射控制的影响

目的：评价依托咪酯对心率压力反射控制的影响。方法：20例ASAI级的下腹部手术病人。均采用连续硬膜外麻醉。分别于清醒状态和依托咪酯麻醉的状态下应用苯肾上腺素后增加血压（加压反射）,用硝酸甘油后降低血压（减压反射）,观察血压升降与心率间的关系。由相关曲线线性部分的斜率确定压力反射的敏感性。结果：由所测得的数据分别求出加压反射中对照组和实验组的斜率值,两组加压反射和减压反射的斜率值差异无统计学意义。结论：依托咪酯对心率压力反射控制无明显影响。     

粪便幽门螺杆菌检测在上消化道溃疡出血患者中的价值

目的探讨粪便幽门螺杆菌抗原检测(Helicobacter pylori stool antigen test,HpSA)在上消化道溃疡出血患者中的价值。方法收集在保定市第一中心医院住院治疗的上消化道溃疡出血患者116例,分别进行病理、HpSA及~(13)C呼气试验(~(13)C–urea breath test,~(13)C-UBT),以病理结果作为诊断Hp感染的判断标准,分析HpSA在上消化道溃疡出血患者中的价值。结果以病理结果作为诊断标准,HpSA检测的灵敏度为91.1%(51/56)、特异度为83.3%(50/60)、准确度为87.1%(101/116);~(13)C-UBT的灵敏度为51.8%(29/56)、特异度为86.7%(52/60)、准确度为69.8%(81/116)。HpSA与病理结果一致性较高,kappa=0.742,~(13)C-UBT与病理结果一致性较差,kappa=0.389。结论在上消化道溃疡出血的患者中,HpSA检测方法与诊断标准具有较高的一致性,是诊断Hp感染的可靠方法。     

凝血指标在不同严重程度胆源性急性胰腺炎中的变化

目的探讨不同严重程度胆源性急性胰腺炎患者凝血指标的变化。方法本文为回顾性研究。纳入从2013年01月01日至2017年12月31日在保定市第一中心医院消化内科诊治的胆源性急性胰腺炎患者128例。根据急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ进行评分,分为轻度组(A组)、中度及重度组(B组)。收集发病48小时内患者的凝血指标:D-二聚体、血小板计数及凝血酶原活动度。比较在不同严重程度时上述指标的差异。结果 D-二聚体水平B组高于A组(P0.05),凝血酶原活动度B组低于A组(P0.05),血小板计数在两组中的差异无统计学意义(P0.05)。结论 D-二聚体水平随病情加重而升高,凝血酶原活动度水平随病情加重而降低,血小板计数随病情加重无变化。     

卵巢上皮性癌细胞中E钙黏素基因的甲基化状态及去甲基化的意义

目的 研究卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞中E钙黏素(E-cad)基因启动子区5'二核苷酸胞嘧啶(5'CpG)岛的甲基化状态,观察DNA甲基转移酶抑制剂--5-杂氮脱氧胞苷(5-Aza-CdR)去甲基化后对卵巢癌细胞的生长、侵袭以及E-cad蛋白表达的影响.方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测卵巢癌细胞系ES-2、3AO及SKOV3细胞中E-cad基因启动子区5'CpG岛的甲基化状态.以不同浓度(分别为0.1、110、10.0μmoL/L)的5-Aza-CdR处理卵巢癌细胞后,电镜下观察细胞形态的变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长情况,蛋白印迹法检测细胞中E-cad蛋白表达的变化,体外侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 MSP技术检测显示,ES-2及SKOV3细胞中E-cad基因启动子区5'CpG岛呈高度甲基化状态和非甲基化状态,3AO细胞中E-cad基因启动子区5'CpG岛仪呈非甲基化状态.经不同浓度(分别为0.1、1.0、10.0 μmol/L)的5-Aza-CdR处理后,ES-2及SKOV3细胞的体积变小,皱缩,核/质比例缩小,核分裂象减少,随着药物浓度的增高,此种趋势逐渐明显;ES-2和SKOV3细胞中E-cad蛋白相对表达水平分别为0.274、0.320、0.398和0.415、0.507、0.638,均明显高于对照细胞(分别为0.131和0.342,P＜0.01);ES-2和SKOV3细胞穿膜细胞数分别为(88.8±2.5)、(60.7±2.4)、(36.1±3.0)个和(88.2±2.1)、(60.5±2.2)、(36.2±3.0)个,均明显低于对照细胞[分别为(121.9±2.3)、(97.6±2.7)个,P＜0.01].结论 启动子区5'CpG岛的高度甲基化是卵巢癌细胞中E-cad基因异常表达的重要机制之一,5-Aza-CdR能通过降低E-cad基因启动子区5'cpG岛的甲基化而恢复其在卵巢癌细胞中的表达,抑制卵巢癌细胞的增殖和侵袭.