应用70mer Oligo基因芯片从限制性cDNA片段中钓取目的基因

目的 探讨采用单一探针寡核苷酸阵列从经限制性显示方法制备的cDNA片段中钓取目的基因片段的方法。方法 酵母经常规培养，抽提mRNA逆转录成cDNA后，经限制性显示技术制备成限制性cDNA片段，根据目的基因SSAl设计70mer特异性oligo片段并打印成为寡核苷酸阵列。采用荧光标记的通用引物对上述经限制性显示技术获得的限制性cDNA片段进行标记，与oligo阵列杂交，洗脱，扫描：然后进行杂交后剥除．收集剥除液．采用限制性通用引物扩增，产物克隆于PUC18T载体中，并转化至JM109大肠杆菌中培养，抽提质粒，进行测序鉴定。结果 测序结果BLAST同源性比较表明，用该方法成功的克隆出了目的基因片段。结论 采用70mer寡核苷酸芯片可以直接从限制性显示方法处理的cDNA片段中钓取目的基因，而无需构建cDNA文库。另外，本方法也可用于oligo芯片的杂交后对有表达差异的基因的获取及研究中。     

胫骨开放性骨折68例治疗体会

我院自1988～1993年共收治68例胫骨开放性骨折.采取彻底清创.加压冲洗,分别用内外固定,灌注引流等方法治疗,疗效较满意.现报告如下.     

经腹行改良Heller手术附加抗返流手术治疗贲门失弛缓症(附12例报告)

1986～1993年我院采用改良Heller手术附加抗返流手术治疗贲门失弛缓症12例,经腹入路。经3个月～5年的随访观察,疗效满意,现报告如下。     

调脂汤治疗高脂血症32例／鲍荣琦／／中国医学文摘

高脂血症是目前临床上常见和多发的一种代谢性疾病，本病多见于中老年人，笔者在1998年1月至2003年1月期间，应用复方降脂煎剂治疗高脂血症186例，疗效满意，现报道如下。     

中药的补肾作用

近年来,国内对中药特别是补肾药与下丘脑—垂体—肾上腺轴、性腺轴、甲状腺轴的关系作了深入的研究。补肾助阳药肉桂、附子、仙灵脾、肉苁蓉可使可的松所致的阳虚大鼠及正常大鼠多巴胺均升高,有抑制下丘脑单胺氧化酶活性的作用。补肾中成药还精煎可使老年大鼠脑干单胺氧化酶B活性下降。补肾方益气聪明汤进行中枢药理试验证明,可使下丘脑去甲肾上腺素,纹状体多巴胺,脑干5—羟色胺升高。     

骨髓间充质干细胞在细胞治疗中的若干问题

骨髓间充质干细胞是骨髓造血微环境的重要组分，其首要作用在于支持造血，此外它还具有干细胞的特性，即自我更新和多向分化的潜能。因此，这种细胞将有可能用于联合造血干细胞移植以提高造血干细胞移植成功率和作为组织工程学的种子用于修复受损或有遗传缺陷的组织和器官，如骨发育不全和心肌梗死后的心肌等。然而，其分离方法很粗糙，还没有一个令人满意的分离和鉴定的方法，这是制约其用于细胞和基因治疗的重要因素。另外，弄清在分化过程中基因表达的调节机制，有利于体外控制这种干细胞的定向分化。最后，间充质干细胞回巢到骨髓或其他组织是成功进行细胞治疗的关键所在。     

经皮张力带固定与切开复位内固定治疗髌骨骨折疗效比较

目的:探讨一种简单易行疗效可靠的治疗方法.方法: 对环形钢丝固定、改良张力带固定、经皮张力带固定治疗的71例髌骨骨折患者的疗效进行对比分析.结果: 经皮张力带固定术的骨折愈合时间与其它术式相比有显著差异;优于传统切开复位内固定.结论: 经皮张力带固定术治疗髌骨骨折符合生物力学要求,具有创伤小,操作简单,疗效确切,病人康复快等优点,值得推广.     

汉方药治疗酒精性肝损害45例的临床观察及基础研究

把临床诊断为酒精性肝损害的45例患者作为治疗对象,用小太郎汉方药给药6个月观察其疗效。 1、病史概要:男性40例,女性5例。疾病分类,酒精性肝炎(AH)21例,脂肪肝10例,肝硬化14例,平均年龄50岁。有嗜酒史者33例(73％),有精神神经症状者11例(24％),并用抗焦虑和催眠剂31例(69％)。汉方治疗后,戒酒29例(64％),节制饮酒11例(24％)。 2、方剂运用:根据症情,24例选择柴胡剂和利水剂及清热解毒的合方(柴苓汤、柴苓汤合黄连解毒汤、小柴胡汤合茵陈五苓散),     

冷温血停搏液联合灌注对瓣膜置换术中炎性细胞因子和自由基的影响

目的　评价冷温血停搏液联合灌注在瓣膜置换术中对血浆促炎性细胞因子和自由基代谢水平的影响 ,探讨更有效的心肌保护方法。方法　将 30例瓣膜病病人随机分为两组 :温血组 (A组 ,n =15 ) ,采用温血诱导心脏停搏、冷血维持与终末温血灌注心肌保护方法 ;冷血组 (B组 ,n =15 ) ,采用冷氧合血停搏液进行心肌保护。分别于心肺转流 (CPB)前 (T1)、CPB 30min(T2 )、CPB结束后30min(T3 )、4h(T4)、2 4h(T5)测定血浆白细胞介素 6 (IL 6 )、IL 8和MDA浓度及SOD活性。结果B组IL 6于T2 即升高 ,持续至T5;A组无明显变化 ,于T3 明显低于B组 (P <0 0 5 )。B组IL 8于T2升高 (P <0 0 1) ,至T3 达峰值 (P <0 0 1) ,于T5下降至基础值水平 ;A组在T3 ～T4较基础值明显升高 (P <0 0 5 ) ,于T2 ～T4均显著低于B组 (P <0 0 5 )。两组MDA均在T2 升高 ,持续至T4,但A组于T3 、T4显著低于B组 (P <0 0 5 )。B组SOD活性自T2 开始降低 ,持续至T4(P <0 0 1) ;A组无明显变化 ,且在T3 与B组比较有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　冷温血停搏液联合灌注对瓣膜病病人的心肌再灌注损伤的抑制效应优于冷血心脏停搏液。