前体蛋白N端11肽对糖尿病小鼠脑海马神经元神经生长因子、神经元纤维蛋白及早老蛋白1表达的影响

目的 探讨前体蛋白N端11肽神经营养作用的机理。方法 用链脲佐菌素诱发小鼠糖尿病模型。小鼠分为：正常对照组（C组），糖尿病对照组（DM组），UPAN治疗组（UPAN DM组）。UPAN DM组于糖尿病造模后2周起至STZ给药后4周皮下注射UPAN，每次0.20μg，1次/d，造模成功4周后，将动物处死，行灌注固定取脑组织作冰冻切片，进行神经生长因子（NGF），神经元纤维蛋白（NF）及早老蛋白-1（PS-1）免疫组化染色。结果 UPAN可恢复或部分恢复糖尿病小鼠脑海马神经元NGF、NF及PS-1中的141（N端258-277）表达。结论 UPAN对糖尿病小鼠的神经元退行性变可能有改善作用，PS-1N端和C端增加的意义尚需进一步研究。     

脑钠素对实验性局部脑缺血脑组织水含量和局部脑血流的影响

将生物活性多肽脑钠素应用到局部脑缺血猫上,观察大脑中动脉闭塞后4小时内局部脑血流、脑水含量等变化。结果提示脑钠素可增加局部缺血区血流、利尿、防止或延缓脑水肿发生。对脑钠素上述作用的可能机制进行了探讨。     

复智散对SH-SY5Y细胞生存状态的影响

目的 研究中药复智散对神经细胞生存状态的影响。方法 用不同浓度的复智散孵育神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞，利用MTT法测定细胞存活率，制定量-效关系曲线，寻找最佳药物浓度；用Aβ25-35孵育SH-SYSY细胞制作细胞损伤模型，加入复智散孵育模型细胞，测定MTT代谢率、神经细胞的胞体面积和轴突长度。结果 复智散可增进SH-SY5Y细胞的存活、胞体扩展及轴突生长，抵制Aβ25-35的毒性效应。结论 复智散可促进神经细胞生存，具有明确的保护神经细胞的作用。     

复方金思维对阿尔茨海默病大鼠脑组织突触后致密区蛋白95表达的影响：与安慰剂及盐酸多奈哌齐干预效果的比较

目的：脑突触后致密区蛋白95具有调节人脑认知活动中突触功能和结构的作用，观察复方金思维干预实验动物致密区蛋白95表达以及学习记忆能力的变化，并与安慰剂及盐酸多奈哌齐干预相对照。方法：实验于2004-11-15／2005-02在北京中医药大学东直门医院药理实验室及首都医科大学宣武医院神经生化室进行。取雄性SD大鼠32只，随机分为4组，每组8只：生理盐水组、模型组、盐酸多奈哌齐组和金思维组。生理盐水组大鼠海马注入2μL生理盐水，其他3组大鼠缓慢注入2μL淀粉样B蛋白1～42(5g／L)，复制阿尔茨海默病模型。造模后3d开始给药，盐酸多奈哌齐组按0．92mg／kg的剂量灌胃；复方金思维(由中药人参、肉苁蓉、石菖蒲及郁金等组成)配置成0．36g／mL的浓度，按0．7μL／g的剂量给药；模型组及生理盐水组给3mL的双蒸水，均1次／d，共4周。4周后，以Morris水迷宫测试大鼠学习期间的逃避潜伏期和游泳距离以及记忆测定中的记忆能力，评价行为学变化；以免疫组化检测大鼠海马CA1区、皮质突触后致密区蛋白95表达的变化。结果：经补充后32只大鼠进入结果分析。①Morris水迷宫的学习、记忆测试结果：模型组大鼠逃避潜伏期、游泳距离及记忆能力显著低于生理盐水组(P&;lt;0．01)，盐酸多奈哌齐组、金思维组大鼠逃避潜伏期、游泳距离及记忆能力较模型组高(P&;lt;0．05)，盐酸多奈哌齐组和金思维组无差异(P&;gt;0．05)。②脑突触后致密区蛋白95表达：模型组大鼠海马和皮质的表达少于生理盐水组(P&;lt;0.01)；盐酸多奈哌齐组、金思维组大鼠海马、皮质的阳性表达高于模型组(P&;lt;0．05)，但盐酸多奈哌齐组与金思维组之间无明显差异(P&;gt;0．05)。结论：模型组大鼠脑突触后致密区蛋白95表达减少，说明脑突触功能弱化和受损，而金思维和盐酸多奈哌齐治疗组大鼠脑突触后致密区蛋白95表达较模型组增加，说明突触的功能及可塑性有所恢复。提示复方金思维对实验动物脑突触功能和结构具有改善作用。     

β淀粉样肽引起的大鼠脑神经髓鞘结构与MBP变化及金思维的影响

目的 观察β淀粉样肽（Aβ）引起的大鼠脑有髓神经髓鞘结构与髓鞘碱性蛋白（MBP）改变，及金思维对其的影响。方法采用Aβ1-42海马注射复制痴呆模型。电镜观察有髓神经髓鞘的结构；免疫组化方法显示MBP在海马区的分布和含量。结果电镜显示模型组大鼠海马区神经髓鞘结构松解紊乱和均质化，可见缺失；金思维组结构完整，板层连续，与正常组相似。MBP免疫组化显示模型组大鼠海马区髓鞘着色明显低于正常组，分支短少而不连续；金思维组髓鞘着色较浅，但数目较多而长。模型组大鼠的MBP阳性突起数、平均面积和平均光密度与正常组和金思维组均有非常显著性差异（P〈0．01）。结论 Aβ海马注射可造成大鼠脑有髓神经髓鞘损伤，MBP缺失，髓鞘结构破坏；金思维对上述变化有一定改善作用。     

神经退行性疾病研究中拟神经细胞模型:人神经母细胞瘤株SH-SY5Y的来源特性及应用

目的:神经退行性疾病已成为近年的热点,人类神经母细胞瘤株SH-SY5Y得到广泛应用,阐述SH-SY5Y的来源,特性及应用。资料来源:应用计算机检索Medline1960-01/2005-08相关SY5Y来源和特性的文章,检索词为“SY5Y,origin,characteristic,application,receptor”,并限定文献语言种类为English。同时计算机检索万方数据库1995-01/2005-08相关该细胞系应用方面的文献,检索词为“SY5Y”,并限定语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章内容相关SH-SY5Y。排除标准:综述文献、重复研究、Meta分析类文章。资料提炼:共收集到752篇相关文献,纳入22篇符合标准的文献,排除的730篇文献是由于内容重复。22篇文章中,3篇文章涉及SH-SY5Y的来源,9篇文章涉及SH-SY5Y的特性,10篇文章涉及SH-SY5Y的应用。资料综合:SH-SY5Y细胞系来源于人脑的恶性肿瘤,在其表面有很多受体,与其功能和应用密切相关,此外,它在研究某些疾病机制、药理学、信号转导中起重要作用。探讨以上各方面以期为进一步合理应用该细胞系提供理论基础。结论:SH-SY5Y细胞作为一种广泛应用的细胞模型,在有关神经系统的研究中具有十分重要的作用。进一步研究将有助于阐明其生物学特性,以利于在生物医学等方面的应用。     

李氏5号中药对D-半乳糖老化小鼠海马超微结构及胰岛素受体底物表达的影响

目的:观察李氏5号中药对D-半乳糖老化小鼠海马超微结构和磷脂酰肌醇酯3激酶(phosphatidylinoditide-3'OHkinase,PI3K)、胰岛素受体底物-1(insulin-receptorsubstrate-1,IRS-1)、胰岛素受体底物-2(insulinreceptorsubstrate-2,IRS-2)表达的影响。方法:将132只小鼠随机分为6组,正常对照(C)组、D-半乳糖模型(D)组、李氏5号大剂量(L)组、中剂量(M)组、小剂量(S)组、多奈哌齐(A)组。D,L,M,S,A5组每日皮下注射半乳糖100mg/kg。L,M,S3个治疗组分别灌胃李氏5号方1.2,0.6,0.3g/(kg·d),A组多奈哌齐0.75mg/(kg·d)灌胃。4个月后,取小鼠海马CA1区组织进行电镜观察,行脑冷冻切片,用PI3K,IRS-1,IRS-2抗体进行免疫组化染色。结果:①电镜结构显示,D-半乳糖老化小鼠海马CA1区神经元核固缩,线粒体、高尔基体等细胞器肿胀,血管足突细胞肿胀,管腔变窄;李氏5号中药保护可以明显改善这种现象。②免疫组织化学染色结果显示3种抗体C组深染的阳性细胞在海马广泛分布,D组海马阳性反应细胞着色浅,少有突起,细胞数目少,分别为C组的48.8%,57.0%和60.8%。李氏5号方组染色结果与C组相似,A组亦有相同结果。结论:D-半乳糖老化小鼠海马CA1区出现明显超微结构病理改变,海马PI3K,IRS-1,IRS-2的表达明显下降;李氏5号中药保护能明显改善CA1区     

早期高血糖可致大鼠脑内神经原蛋白质的非酶糖基化反应

目的：观察早期高血糖对大鼠脑内神经原组织蛋白质非酶糖基化反应的影响。方法：实验于1998年在首都医科大学宣武医院北京脑老化研究实验室完成。选取3月龄雄性Wistar大白鼠35只（Ⅱ级），随机数字表法分为2组，糖尿病模型组20只和正常对照组15只。以10异／L链尿佐菌素60mg／kg腹腔注射制备糖尿病模型，血糖≥15mmol／L时，表明糖尿病模型制备成功，纳入糖尿病模型组。于成模后1，2，3个月分别测定各组大鼠的血糖和体质量。并与实验前比较。自行制备抗牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物抗体：①制备牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物抗原。②选取纯种无特殊病原体3月龄雄性昆明小鼠11只（Ⅲ级）接种牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物。③免疫动物。④抗晚期糖化终末产物多抗初步纯化及检测：采用ELISA方法。于糖尿病成模后1个月行晚期糖化终末产物免疫组织化学检查。结果：糖尿病模型组20只，其中17只在注射链尿佐菌素24-48h后即出现多饮、多食、多尿等症状，测定全血血糖≥15mmol／L，观察1个月内死亡4只。余13只和正常对照组大鼠15只进入结果分析。①糖尿病大鼠成模1，2，3个月时糖尿病模型组平均血糖均显著高于正常对照组[1个月：（28．8&;#177;2．8），（6．2&;#177;0．9）mmol／L，P〈0．001]；[2个月：（23．1&;#177;5．5），（6．1&;#177;0．8）mmol／L，P〈0．0011．13个月：（25．4&;#177;5．1），（6．1&;#177;0．7）mmol／L，P〈0．001]；其体质量均显著低于正常对照组[1个月：（250．1&;#177;52．2）g，（422．6&;#177;36．2）g，P〈0．0011；[2个月：（263．8&;#177;50．0），（462．6&;#177;39．0）g，P〈0．001]；[3个月：（261．5&;#177;42．6），（485．0&;#177;28．8）g，P〈0．001]。②以不同浓度牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物免疫小鼠2次后，测血清抗牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物抗体效价，结果显示抗体效价在1：1000时具有较大的吸光度值。（固检测腹水中抗体的最终效价，结果显示5～50mg／L的牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物抗原包板液浓度均具有较高吸光度值。（4）以20mg／L的抗原浓度包板后行ELISA法检测制备腹水抗体效价，显示腹水抗体在1：4000时有最大吸光度值，1：20000时还有较大吸光度值。成功制备了牛血清白蛋白晚期糖化终末产物多克隆抗体。⑤晚期糖化终末产物免疫组化染色显示，糖尿病组于糖尿病1个月时即已有免疫组化染色阳性神经元存在，而正常对照组则不明显。免疫组化阳性物质多见于细胞浆。结论：糖尿病大鼠成模1个月后即可在海马、皮质神经元细胞内发现晚期糖化终末产物的表达。糖尿病早期高血糖即可引起脑内神经元蛋白质的糖基化反应，可能在神经元退行性改变发病机制中具有重要作用。     

阿尔茨海默病概念修改:痴呆新术语

目前临床医生所称阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是指以渐进性遗忘及相继其他认知功能障碍、行为异常、神经心理改变而致社会功能减退并伴有日常生活能力下降为特征,首发症状也可以是非典型,如非遗忘型局限性皮质萎缩综合征.在多数病例中,临床医生理解、评估典型和非典型临床表现存在偏差,对AD的诊断存在差异.     

阿尔茨海默病概念修改:痴呆新术语

目前临床医生所称阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是指以渐进性遗忘及相继其他认知功能障碍、行为异常、神经心理改变而致社会功能减退并伴有日常生活能力下降为特征,首发症状也可以是非典型,如非遗忘型局限性皮质萎缩综合征.在多数病例中,临床医生理解、评估典型和非典型临床表现存在偏差,对AD的诊断存在差异.