血管内皮生长因子-A和生存素在慢性肝病组织中的表达及意义

目的研究慢性肝病组织中血管内皮生长因子-A(VEGF-A)和生存素的表达及其临床意义。方法收集手术切除并经病理学证实的原发性肝癌38例,应用免疫组化方法检测原发性肝癌、乙肝肝硬化和慢性乙型肝炎组织中VEGF-A和生存素的表达。结果 VEGF-A在慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化及原发性肝癌组织中的阳性率分别为26.7%、73.1%和68.4%,三者之间的差异有统计学意义(P<0.01);生成素在慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化及原发性肝癌组织中蛋白阳性表达率分别是33.3%、46.2%和84.2%,三者之间的差异有统计学意义(P<0.01);生成素在HCC组织中的表达明显高于在慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化组织中的表达(P<0.01)。结论随着慢性肝病进展,VEGF-A与生成素在肝组织中的表达逐渐升高,二者可作为HCC早期诊断的标志物。     

FRNK质粒转染抑制肝星状细胞胶原合成

目的：探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）对纤维连接蛋白（FN）刺激的肝星状细胞（HSCs）胶原合成的影响。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;采用Western blotting方法测定FRNK蛋白在HSCs的表达,鉴定转染效果;［3H］-Pro掺入法检测HSCs总胶原和Ⅰ型胶原的合成能力。结果:FRNK质粒成功转染HSCs,于转染48 h时FRNK蛋白表达最强（P<0.05）;在FRNK转染HSCs 48 h后总胶原合成能力（498.17±73.20）较空质粒组（748.33±61.30）显著下降（P<0.01）;在FRNK转染HSCs 48 h后 Ⅰ型 胶原合成能力（163.17±23.80）较空质粒组（371.58±15.44）亦显著下降（P<0.01）。结论:FRNK可以使HSCs总胶原和Ⅰ型胶原合成能力降低,提示其对肝星状细胞胶原合成功能具有负调控作用。     

黏着斑激酶相关非激酶对CFSC细胞基质金属蛋白酶-2及其抑制因子mRNA表达的影响

目的 探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白刺激的肝星状细胞CFSC胶原代谢的影响及其分子机制. 方法用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;采用Western blot方法测定FRNK蛋白表达,鉴定转染效果;用3H-Pro掺入技术测定CFSCI型胶原的合成;用RT-PCR方法测定FRNK转染前后基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制因子(TIMP-2)基因在CFSC中表达的变化情况. 结果 FRNK质粒成功转染CFSC,Ⅰ型胶原合成下降;MMP-2基因表达上升,TIMP-2基因表达下降,MMP 2/TIMP-2比值明显上升.结论 外源性FRNK在CFSC内大量表达后,CFSC胶原表达减少;FRNK可能通过调节MMP-2/TIMP-2比值来促进CFSC的胶原降解.     

谷氨酰胺结合双歧杆菌四联活菌片对酒精性肝硬化患者肠黏膜屏障功能的影响

目的探讨谷氨酰胺结合双歧杆菌四联活菌片在酒精性肝硬化患者治疗中的应用价值。方法选取2015年4月至2016年9月深圳市龙华区人民医院收治的酒精性肝硬化患者94例为研究对象,以随机数字表法分为对照组和观察组,每组47例。对照组患者给予常规治疗,观察组在对照组基础上给予谷氨酰胺结合双歧杆菌四联活菌片治疗,观察两组患者治疗前后肝功能(TBil、ALB和ALT)、肠黏膜屏障功能(内毒素、D-乳糖和二胺氧化酶)变化及治疗后肠道症状发生情况。结果治疗前两组患者肝功能无显著差异(P0.05),治疗后观察组患者的TBil和ALT水平显著低于对照组,ALB水平显著高于对照组,差异有统计学意义(t值分别为5.813、4.273、6.044,P0.001)。治疗前两组患者肠黏膜屏障功能相关指标(内毒素、D-乳糖和二胺氧化酶)无显著差异(t=0.934,P=0.353;t=0.125,P=0.910;t=0.081,P=0.936),治疗后观察组患者各指标均显著低于对照组,差异有统计学意义(t值分别为11.777、6.086、8.823,P0.001)。观察组治疗后肠道症状发生率为8.51%,对照组为23.40%,差异有统计学意义(χ~2=3.887,P=0.049)。结论谷氨酰胺结合双歧杆菌四联活菌片可有效改善酒精性肝硬化患者的肠黏膜屏障功能,且能促进肝功能恢复,值得推广。     

膜型基质金属蛋白酶-1在黏着斑激酶相关非激酶调控肝星状细胞胶原代谢中的作用

目的： 探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）对纤维连接蛋白（FN）刺激的肝星状细胞（HSC）膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）表达的影响并探讨MT1-MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法：应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;采用Western blotting法测定FRNK蛋白在瞬时转染时相应的表达,鉴定转染效果;分别应用Western blotting和RT-PCR方法测定MT1-MMP在HSC中的相应表达。结果：FRNK质粒成功转染HSC,于转染48 h时,FRNK蛋白表达最强,P<0.05;FRNK转染后在基因水平上：MT1-MMP mRNA表达明显增加;翻译蛋白水平上：FRNK质粒转染HSC 48 h后,MT1-MMP蛋白表达量显著升高。结论：脂质体介导下FRNK质粒转染,可使外源性FRNK在HSC内大量表达,FRNK可能通过上调MT1-MMP值来抑制HSC胶原合成。     

非霍奇金淋巴瘤患者血浆血管内皮细胞生长因子浓度测定的临床意义

血管新生机制是恶性肿瘤的重要发病机制.血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是参与血管新生作用最强最具特征性的促血管生成介质,它可刺激血管生成,促进内皮细胞的增殖与迁移,使血管通透性增加.国外的许多研究证实在非霍奇金淋巴瘤中存在着血管新生,而且VEGF及受体在非霍奇金淋巴瘤的多种细胞系中表达,血清VEGF水平已成为非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma, NHL)的一项独立预后因素.本研究中我们主要应用酶联免疫吸附测定(ELISA)的方法检测NHL患者血浆VEGF浓度,旨在探讨NHL患者血浆VEGF(P-VEGF)与临床病情的关系.     

粘着斑激酶相关非激酶质粒转染抑制肝星状细胞周期进程及机制研究

粘着斑激酶（focal adhesion kinase，FAK）磷酸化后，对多种类型细胞的生物学行为具有重要影响，如促进增殖，正性调控细胞周期，增强粘附、迁移，控制凋亡等。粘着斑激酶相关非激酶（FAK—related non-kinase，FRNK）是FAK的内源性抑制剂。本研究应用体外细胞培养技术，以纤维连接蛋白（fibronectin，FN）刺激肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）增殖，在脂质体介导下瞬时转染FRNK质粒，探讨选择性阻断FAK磷酸化对HSC增殖周期及细胞周期相关蛋白的影响。