血站实验室采用不同模式检测HBsAg的性能评价

目的对6家血站实验室单独使用1种和联合使用2种酶联免疫(ELISA)试剂检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)进行性能评价,为各实验室制定合理的HBsAg筛查策略提供参考依据。方法将来自16家实验室的898份HBsAg初筛反应性标本分别寄送至6家血站实验室,使用2种ELISA试剂检测HBsAg。采用化学发光法和中和试验作为确认方法。分别在各实验室选择1种性能相对优异的试剂作为比较试剂,利用统计学方法分析各实验室单独使用1种试剂和联合使用2种试剂的灵敏度、特异性和符合率。结果 898份HBsAg初筛反应性标本中,剔除16份数据不完整的标本,在余下的882份标本中,确认阳性571份,确认阴性311份。各实验室使用的2种试剂其灵敏度差异较大(P0.05),其中在实验室B、D、E和F中,灵敏度相对优异的试剂其符合率亦更高(P0.05)。性能相对优异的试剂单独检测和2种试剂联合检测进行性能比较,各实验室2种检测模式的灵敏度差异无统计学意义(P0.05);实验室C、D和F单一试剂检测的特异性优于2种试剂联合检测(P0.05),其余实验室2种检测模式的特异性差异无统计学意义(P0.05);实验室D和F单一试剂检测的符合率优于2种试剂联合检测(P0.05),其余实验室2种检测模式的符合率差异无统计学意义(P0.05)。结论在血站实验室使用ELISA试剂盒进行HBsAg检测,存在单独使用1种试剂的检测性能等同于或优于联合使用2种试剂的情况,是否采用单一试剂代替2种试剂联合检测作为HBsAg的筛查策略,需进行科学的评估和确认。     

ELISA试剂检测HBsAg不合格标本的假阳性率调查

目的了解酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)假阳性的情况。方法收集2015年4—9月来自全国16家采供血单位双试剂ELISA筛查HBsAg不合格标本888例,采用罗氏和雅培双试剂化学发光进行检测,2种化学发光试剂均为反应性判为阳性,均为非反应性判为阴性,两者结果不统一时采用中和试验进行确认;多家采供血单位采用多种ELISA试剂对这批标本进行检测,本研究对其中6家实验室,每1种试剂对应3家实验室,3种试剂(试剂1、2、3)的数据进行分析。结果 888例ELISA筛查HBsAg不合格标本中罗氏和雅培双试剂化学发光均为非反应性的标本为301例,占33.9%;3种ELISA试剂在相应被用于检测的3家实验室之间的假阳性率均无明显差异(P0.05);同一实验室同时使用2种ELISA试剂有3家,其中2家实验室使用试剂1和试剂2的假阳性率有明显差异(P0.05),1家实验室使用试剂2和试剂3的假阳性率没有明显差异(P0.05);每种ELISA试剂在3家实验室检测同一标本,可能是1家、2家或3家同时出现假阳性,计算每1种的频率,其中3种试剂3家实验室同时出现假阳性的频率无明显差异(P0.05),1家或2家实验室出现假阳性的频率有明显差异(P0.05);分析3种试剂所对应实验室检测结果同时为假阳性时的S/Co分布,其中位数及内四分位间距存在差异。结论不同ELISA试剂检测HBsAg不合格标本的假阳性率存在差异,其假阳性检测结果的S/Co值分布不同,此数据可为献血者归队策略提供参考。     

新型冠状病毒康复者血浆IgM和IgG不同试剂检测结果的差异分析

目的 分析评价新型冠状病毒抗体酶联免疫吸附法(ELISA)试剂和胶体金免疫层析法(胶体金)试剂检测性能。检测新型冠状病毒感染的肺炎康复者恢复期血浆(以下简称"COVID-19 CP")IgG、IgM抗体滴度并分析亚甲蓝病毒灭活对IgG抗体滴度的影响。方法 对15例符合采集恢复期血浆要求的新冠肺炎康复者血浆标本,遵照《血站技术操作规程(2019版)》要求及经新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测合格后,按照原倍、20、40、80、160、320倍稀释,采用3种IgG、2种IgM的ELISA试剂、1种胶体金试剂分别检测2019-nCoV IgG、IgM抗体。对其中7例血浆标本,比较亚甲蓝病毒灭活前、后IgG抗体滴度变化,评估病毒灭活对IgG抗体滴度的影响。结果 15例标本常规检测及2019-nCoV核酸检测均合格,但ALT偏高。2019-nCoV 3种IgG ELISA试剂检测抗体滴度、2种IgM ELISA试剂的结果差异较显著,病毒灭活前后IgG抗体滴度无明显变化。结论 国产ELISA试剂能够较好地检测出新冠病毒的IgG、IgM,但是由于试剂生产工艺、检验原理、灵敏度差异,不同试剂抗体滴度检测水平有差异。亚甲蓝/光化学法病毒灭活对2019-nCoV IgG抗体滴度无明显影响。     

基于日常检测结果的核酸扩增检测假阳性统计室内质量控制方法

目的建立一种利用核酸扩增检验实验室日常检测数据进行定性测定假阳性监测的实验室室内质量控制方法。方法以实验室日常不少于20次检测的阳性率比值为基础,计算阳性率比值的均值(x)和标准差(s),绘制质控图,以1+2S为“告警”规则,1+3S和3+2S为失控规则。结果对实验室212次HBVDNA聚合酶链反应(PCR)实测数据分析,x和s分别为0.527和0.078,与前20次测定的x(0.532)和s(0.09)相近。212次测定中,出现5次超出x±2s,按照所定的质控规则有两次失控。符合统计上的正态分布。结论为核酸扩增常规检测提供了一种具有可操作性的假阳性统计室内质控方法。     

TORCH血清学检测室间质量评价分析

目的 对目前国内临床实验室TORCH血清学检测情况进行评价.方法 通过室间质量评价的方式:每年进行2次室间质评,每次发放5支质评样本;要求各临床实验室在规定时间内检测、回报检测结果、所用的检测方法、仪器和试剂;卫生部临床检验中心对各实验室的结果进行统计分析,将结果反馈给各实验室,同时对检测结果、试剂情况进行评价.结果 2007年单纯疱疹病毒(HSV)IgM、风疹病毒(Rubella virus)IgM和巨细胞病毒(CMV)lgM 3个项目临床实验室检测合格率均达到了80%以上,弓形虫(Toxo)IgM符合率较低,仅53.1%.试剂的使用评价分析显示,不同试剂各个项目的 阳性符合率均较低(均小于80%).相同的试剂在不同的实验室检测得到的样本吸光度(A)值与阳性结果判定值的比值(S/CO值)有很大差异.结论 TORCH血清学检测室间质量评价反映出多数实验室得到了满意的成绩(PT≥80),但阳性样本的检出率较低,除试剂的原因,也有实验室工作人员操作方面的原因.     

严重急性呼吸综合征实验室检测中应注意的问题

20 0 3年 4月 19日世界卫生组织 (WHO)宣布 ,严重急性呼吸综合征 (SevereAcuteRespiratorySyndrome ,SARS)病原体为一种人类从未发现过的属冠状病毒科的新型病毒[1 4] ,随后参与这次全球合作的 9个国家中的一些实验室即开始研制开发可用于SARS病毒感染诊断的检测方法[5] 。当前研究的实验室诊断方法有免疫测定法、分子诊断法和病毒培养等 ,但目前尚不成熟。因此 ,如何正确应用这些方法和解释所获得的结果 ,即成为对可疑SARS病毒感染者进行诊断中的重要问题。此外 ,由于采集和检测SARS患者的标本 ,具有很强的潜在传染危险 ,试验操…     

全国血站乙肝表面抗原测定室间质量评价结果分析

目的 提高血站实验室乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的检测质量。方法 制备质控血清每批5支，全年4次，通过邮寄发放到各参评实验室，对其回报的结果进行统计、分析。结果 参加1999年HBsAg测定室间质评的血站共有222个，含量最低的两份样本浓度为0．5ng/ml，其阳性检出率为43．4和55．2％；酶联免疫试剂盒的临床使用评价结果显示，试剂盒的质量仍存在一定差异。开展与不开展室内质控的实验室之间的成绩差异极显著（P＜0．01）；使用不同的试剂成绩差异极显著（P＜0．01）。结论 试剂盒的质量和是否开展室内质控这两个因素直接影响室间质量评价的成绩。     

HCV RNA RT—PCR测定室间质量评价的研究

目的 建立国内ＨＣＶ ＲＮＡ ＲＴ－ＰＣＲ测定的室间质量评价系统。方法：室间质量评价研究工作采用的质控血清盘由１０支冻干质控血清组成，其中包括２份强阳性、２份弱阳性，２份阴性和一个５倍位比稀释系列（４份），将血清盘寄发给各类评实验室并要求各个实验室按照规定时间检测，回报结果，然后对结果进行统计分析。结果 多数参评实验室存在不同程度的假阳性和假阴性的问题。２份强阳性标本检出率均为８７．５％，弱阳性标     

AIDS相关全基因组关联研究进展

全基因组关联分析( genomewide association studies,GWAS)是应用人类基因组中数以百万计的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)为标记进行病例-对照关联分析,以期确定疾病相关基因、易感区域或疾病的标记物,从而探究复杂疾病遗传机制的方法[1].该研究建立在常见疾病具有常见变异的假设基础上,其基本思想是在一定规模的实验组和对照组中比较全基因组范围内所有SNP位点的等位基因或者基因型频率在某种疾病中出现的差异.若某SNP位点的等位基因或基因型在患病人群中出现的频率明显高于或低于对照组,则认为该位点与疾病间存在关联性,进而根据该位点在基因组中的位置和连锁不平衡关系推测可能的疾病易感基因.     

丙型肝炎病毒抗体检测室间质量评价方法的建立和应用

丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)为献血者血液筛检和丙型肝炎病人临床诊断必检的血清学标志物,检测方法一般为免疫学方法,最为常用的是酶联免疫吸附试验(ELISA).为对全国各医院和血站实验室抗-HCV测定进行质量评价,卫生部临床检验中心根据英国国家病毒学室间质量评价计划的基本原则和方法,在国内建立了抗-HCV检测室间质量评价方法.现报道如下. 1 材料与方法