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目的采用内含HCV RNA 5'非编码区的耐RNase病毒样颗粒作为质评血清阳性样本用于全国室间质量评价,评价临床实验室定量检测HCV RNA的能力,分析我国HCV RNA定量检测商品试剂盒存在的问题,以促进我国HCV RNA检测质量的提高.方法 2008年和2009年卫生部临床检验中心向全国开展HCV RNA检测的临床实验室每年寄发2次定值质评血清,每次包括5份样本,各实验室在规定时间内进行检测并回报结果.质评血清中的阳性样本为与WHO标准物质(NIBSC 96/798)比对定值的病毒样颗粒,实验室检测阳性样本的结果需在质评血清靶值对数值±0.5范围内.2008年2次质评血清涵盖了国内常见的HCV基因型,2009年2次质评血清为1b型病毒样颗粒系列稀释样本.对2009年第2次室问质评3种试剂(21001、21078和21097)阳性样本定量检测结果进行单因素方差分析,方差不齐则采用Dunnett'S T3和Tamhane'S,T2法进行统计.结果 回报定量检测结果的实验室2008年为390家,而2009年达到428和426家,不同基因型检测结果对数值均在靶值对数值±0.5范围内的实验室数有所差别,1b型样本为大于91.0%,2a型样本分别为93.7%和74.2%,6型样本分别为83.3%和80.3%,同一年检测结果含量低的样本CV高于含量高的样本CV,发生假阴性结果的样本均为低含量样本.2008年第1次、第2次及2009年第1次质评分别有5、1和10家实验室低于检测限样本出现了假阳性.2009年第2次室间质评3种试剂检测4种质评血清,检测结果比较差异均有统计学(F值分别为288.23、324.79、291.98和261.16,P均<0.01).结论实验室检测低含量样本的能力有待提高,不同基因型检测中,2a和6型样本检测能力有待提高. 相似文献
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乙型肝炎病毒 DNA定值冻干血清用于荧光定量聚合酶链反应测定的研究 总被引:4,自引:2,他引:4
目的 研究冻干的定值系列血清及其在乙型肝炎病毒脱氧核糖核苷酸(HBV DNA)荧光定量聚合酶链反应测定中的应用价值。方法 制备系列冻干血清,用罗氏的内标定量方法进行定量。将定量系列血清和106拷贝/ml的样本寄发给不同试剂厂家,令其按要求稀释并检测。将定值系列血清的罗氏定量结果与各试剂检测的CT值做标准曲线,比较其定值结果与试剂盒中工作标准曲线的定值结果。结果 采用冻干定值系列血清作为荧光定量试剂盒定量测定的标准,标准曲线的线性回归系数均小于-0.99,斜率和截距与原试剂标准相近,使用该标准系列各试剂的检测结果间的变异(CV)大大降低。结论 该冻干定值系列血清可有效地用于临床HBV DNA的定量测定。 相似文献
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标本处理对聚合酶链反应测定乙肝病毒核酸的影响 总被引:14,自引:1,他引:14
目的 研究对血清标本进行乙型肝炎病毒(HBV)DNA聚合酶链反应(PCR)测定前的最佳标本处理方法。方法 使用煮沸裂解方法和核酸纯化方法同时处理2份HBV DNA含量不同血清标本及3份溶血和正常血清标本,比较荧光定量PCR测定的重复性及测定值的差异。结果 煮沸裂解法处理2份标本所得结果的重复性(变异系数CV分别为0.2165和0.3262)明显差于对样本进行核酯纯化后的测定重复性(CV分别为0.0699和0.1092);并且,当标本中血红蛋白含量大于5.89ug/L时(肉眼未见有明显溶血),采用煮沸裂解法处理标本所得HBV DNA量较核酸纯化方法所得值低约2个数量级(P〈0.05)。结论 在HBV DNA PCR检测时,煮沸裂解法不适合用来处理血清标本,而应使用核酸纯化方法。 相似文献
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目的通过免疫球蛋白类检验的室间质量评价工作,掌握全国免疫球蛋白类检验状况,使免疫球蛋白类检验逐步规范化,提高临床检验的水平和质量。方法依据美国病理学家协会(CAP)室间质量评价方案,建立我国免疫球蛋白类检验的室间质量评价方案。通过定期向全国参评实验室寄发质控样品,然后对其回报数据进行统计分析,作出实验室检验水平评价,试剂盒临床使用评价及检验方法学评价。结果参加全国室间质评的单位数从1994年一季度的153家增加到1997年一季度的285家。对质控样品检测的准确性逐步提高。试剂盒临床使用质量评价反映出进口试剂质量优于国产试剂,散射比浊法检验试剂优于免疫单扩散法检验试剂。方法学评价反映出散射比浊法在检验的准确度及精密度方面要优于免疫单扩散法。结论开展全国免疫球蛋白类检验的室间质量评价,有助于提高临床实验室的检验水平,有助于临床检验试剂盒的选用及检验方法的改进。 相似文献
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王露楠 《中华检验医学杂志》2003,26(11)
答 :1.实验室的规范化分区及相应标识 ;2 .仪器设备及在用标识 ;3.保持实验室空气流向的措施 ;4 .各区物品的专用标识。实验室设置和设备检查重点有哪些?@王露楠 相似文献
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王露楠 《中华检验医学杂志》2003,26(10)
答 :如果采用实时荧光定量PCR或其他不需开盖的全自动扩增产物检测系统 ,可以将扩增区和产物检测区合并。如果不在扩增区内加样 ,或能保证所使用的扩增检验方法 (如荧光定量PCR)不需在“扩增区内加样 ,该区可以不要加样器什么情况“使用全自动扩增检测仪,区域可适当合并”?@王露楠 相似文献
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丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是一种RNA病毒,可以引发各种慢性肝病,其中包括肝硬化和肝细胞癌.全球每年HCV感染的患者数呈上升趋势,他已成为人类亟待解决的公共卫生难题.HCV可以分为6种主要的基因型以及70多种亚型,不同的基因型对抗病毒治疗的效果不同.如果在治疗前能通过准确灵敏的检测手段确定HCV的基因型,将会对临床治疗有重要的意义.本文对HCV基因型全球分布、临床表症与治疗、分型依据以及基因型与定量关系进行了概述,并重点阐述HCV基因分型的检测技术. 相似文献
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目的建立酶联免疫吸附法(ELISA)对献血者进行乙肝表面抗原(HBsAg)检测的高特异性S/CO屏蔽界限值。方法对783份HBsAg ELISA反应性标本和588份非反应标本,采用HBsAg化学发光法和中和实验确认检测。根据确认检测结果和ELISA检测S/CO值建立受试者工作特征曲线(ROC曲线),确定95%和99%特异度对应的S/CO界限值。另选择124份HBsAg ELISA反应性标本对设定的屏蔽界限值进行验证,同时以乙肝五项化学发光发检测结果作为补充,判断屏蔽界限值的实用性。比较不同实验室采用相同试剂设定的99%特异度对应的HBsAg ELISA检测S/CO界限值。结果该实验室采用的2种ELISA试剂95%特异度对应的S/CO界限值分别为0.24和0.65,99%特异度对应的S/CO界限值分别为3.89和3.62,将99%特异度对应的S/CO界限值设定为该实验室献血者屏蔽界限值。验证实验证实,大于或等于试剂1和试剂2屏蔽界限值的标本均为HBV感染标本。与该实验室采用相同HBsAg ELISA检测试剂的3家实验室,试剂1的99%特异度对应S/CO界限值分别为3.77、3.60、13.42,试剂2分别为27.73、31.75、1.17。结论该研究建立的献血者HBsAg ELISA检测屏蔽界限值可在该实验室有效甄别出真阳性献血者,有助于减少进入归队流程的献血者数量。即使采用相同的ELISA检测试剂,不同实验室也不适用统一的献血者屏蔽界限值。 相似文献
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窗口期、免疫静默感染以及罕见的亚型与变异是导致常规血清学漏检的主要原因[1].其中窗口期造成的影响尤为常见,有研究表明,在美国90%的HBV、HlV以及75%的HCV输血感染是因为窗口期漏检所致[2]. 相似文献