APP17肽对APP转基因小鼠学习记忆能力和海马神经细胞凋亡的影响

目的观察APP(-βamyloid precursop protein,APP)17肽(APP695中319-335肽段)对APP转基因小鼠(APP695V717I)学习、记忆能力及海马神经细胞凋亡的影响。方法3月龄的APP695转基因小鼠随机分为模型组和APP17肽治疗组,正常对照组采用月龄和性别与之相匹配的C57BL/6J小鼠。APP17肽治疗组给予皮下注射APP17肽,每只每次0.34μg,每周3次;模型组和正常对照组给予等体积NS。应用水迷宫试验观察小鼠学习、记忆功能的变化,以流式细胞技术分析海马神经细胞凋亡率和线粒体膜电位的变化。结果(1)水迷宫试验结果显示,模型组小鼠存在明显学习和记忆功能障碍,其第3、4、5天游完全程的时间[(93.22±16.35)、(86.73±20.26)、(77.13±29.35)s]和错误反应次数[(6.63±2.16)、(5.81±2.13)、(5.33±1.41)次]均较正常对照组[分别为(70.89±20.19)、(61.25±21.88)、(54.63±16.92)s和(5.01±1.93)、(2.97±0.96)、(2.31±1.01)次]增多(P<0.05);APP17肽治疗组小鼠的行为学障碍明显轻于模型组(P<0.05),其上述水迷宫检测结果与正常对照组比较差异无统计学意义。(2)与正常对照组小鼠海马神经细胞凋亡发生率[(3.13±1.19)%]和线粒体膜电位[(176.39±13.88)mV]比较,模型组凋亡发生率[(8.06±2.31)%]显著增加(P<0.01)而线粒体膜电位[(97.51±15.73)mV]明显降低(P<0.01);APP17肽治疗组检测结果与正常对照组接近,海马神经细胞凋亡发生率[(4.38±1.26)%]低于模型组(P<0.01),线粒体膜电位[(168.35±19.29)mV]高于模型组(P<0.01)。结论APP695转基因小鼠存在学习和记忆功能障碍,且其海马神经细胞凋亡率增加,线粒体膜电位降低;APP17肽能够明显改善该转基因小鼠的学习和记忆能力,其作用机制可能是通过稳定线粒体膜电位及抑制凋亡发生而实现。     

几丁糖在兔角膜碱烧伤中的抗氧化损伤作用

目的 探讨20g/L医用几丁糖在角膜碱烧伤中对脂质过氧化损伤、炎症反应的影响。方法 以15只新西兰大白兔制作兔角膜碱烧伤模型，设立几丁糖治疗组（右眼）和对照组（左眼）。于烧伤后第7，14，28天各取两组5只兔的角膜和房水检测超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量，并观察角膜组织病理学变化。结果 医用几丁糖治疗组较对照组同期SOD活性高，MDA生成量少，角膜炎症反应轻。结论 几丁糖在角膜碱烧伤急性期治疗中具有较强的抗脂质过氧化损伤、抑制炎症及促进愈合的作用。     

中药对大鼠晶状体老化过程中脂质过氧化和抗氧化能力的干预作用

目的:分析抗氧化中药参乌胶囊(Shenwu capsule,SW)、二苯乙烯苷(tetrahydroxystilbene glucoside,TSG)对晶状体老化过程中脂质过氧化及抗氧化能力的影响。方法:雄性SD大鼠96只,分为增龄组及中药干预组,增龄组按月龄不同分为1,3,6,12,18,24共6组,每组10只;中药干预组分为参乌胶囊低剂量[SW(L)]、高剂量[SW(H)]、二苯乙烯苷低剂量[TSG(L)]、高剂量[TSG(H)]4组,分别为10,8,10,8只;药物干预组大鼠均为24mo龄,从21mo龄开始,SW(L),SW(H)组分别给予参乌胶囊0.8g/kg和1.6g/kg灌胃;TSG(L),TSG(H)组分别给予TSG0.03g/kg和0.06g/kg灌胃;老年对照组给予等体积蒸馏水灌胃,每日1次,至24mo,共3mo。处死动物取出眼球,自赤道部切开眼球,完整取出晶状体,采用硫代巴比妥酸比色法与化学发光法检测各组大鼠晶状体组织中谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果:大鼠晶状体GSH含量1,3,6,12,18,24mo龄、SW(L),SW(H),TSG(L),TSG(H)分别为30.5±7.4,33.3±6.1,29.0±3.1,28.6±4.8,22.0±4.2,20.5±3.2,21.9±3.2,23.1±5.1,20.2±4.4,18.8±2.5mg/gpr;增龄组GSH含量F检验P<0.01,GSH含量与月龄负相关(P<0.01),各用药组与24mo龄组GSH含量F检验P>0.05。大鼠晶状体SOD含量1,3,6,12,18,24mo龄、SW(L),SW(H),TSG(L),TSG(H)分别为41.1±2.1,42.3±2.7,38.6±3.0,38.7±5.2,34.1±1.8,31.9±4.9,30.2±3.2,32.7±3.3,29.8±3.3,32.5±6.0μkat/gpr;增龄组SOD含量F检验P<0.01,SOD含量与月龄负相关(P<0.01),各用药组与24mo组SOD含量F检验P>0.05。大鼠晶状体MDA含量1,3,6,12,18,24mo龄、SW(L),SW(H),TSG(L),TSG(H)分别为49.6±4.4,52.2±3.8,53.1±6.4,53.6±4.7,59.8±4.2,62.2±3.9,61.6±2.9,63.6±5.8,58.1±13.6,57.9±7.6nmol/gpr;增龄组MDA含量F检验P<0.01,MDA含量与月龄正相关(P<0.01),各用药组与24mo组MDA含量F检验P>0.05。结论:大鼠晶状体GSH,SOD及MDA随年龄增长分别呈降低、降低、升高趋势,抗氧化能力下降之后抗氧化药物对此无预防作用。     

膀胱移行细胞癌中环氧化酶-2和Ki67表达的相互关系及其临床意义

 目的研究环氧化酶2(COX2)和Ki67表达与膀胱移行细胞癌的生长、分化、转移及预后的关系,探讨膀胱癌中COX2和细胞增殖的关系。方法采用免疫组化SABC法和SP法,检测54例膀胱癌、29例癌旁组织和10例正常膀胱粘膜中COX2和Ki67的表达,并结合临床病理资料进行分析。结果膀胱癌中COX2阳性表达率为81.48%,Ki67标记指数为(17.79±9.80)%,均显著高于癌旁组织及正常膀胱粘膜;COX2表达强度和Ki67标记指数均与膀胱癌分化、临床分期、淋巴转移相关;COX2表达异常病例Ki67标记指数亦有增高趋势,二者呈正相关。结论COX2表达上调在膀胱肿瘤的发生发展中有重要意义,其高表达与膀胱肿瘤的分化、生长及转移相关;COX2的高表达可能有助于增加膀胱癌细胞增殖活性。     

医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学研究

目的 对本院2003年连续收集的122株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）进行染色体盒mec元件(SCCmec)分型。方法 用K-B法药敏试验常规进行抗生素敏感试验;按NCCLS标准,用琼脂板稀释法测定MRSA对苯唑西林的MIC值;用多重PCR方法对MRSA染色体盒mec元件的结构及其变异情况进行分型分析,对MRSA进行分子分型。结果 122株MRSA对青霉素及环丙沙星均耐药,苯唑青霉素的MIC为64-1024mg/L,对红霉素、四环素、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、克林霉素的耐药率分别为92%、95%、45%及47%,对万古霉素全部敏感;122株MRSA中有115株属于SCCmec-III型,4株属于SCCmec-IIIA亚型,1株属于SCCmec-IV型,1株属于SCCmec-I型,1株属于未定型株（NT SCCmec型）。结论 多数MRSA菌株对所用抗生素呈多药耐药;用多重PCR方法对MRSA进行分子分型,是基于对MRSA耐药基因mecA的结构进行分析的一种分型方法,方便快速,结果可靠,是MRSA分子分型的有效工具,对从基因水平阐述隐含的耐药机制及MRSA的耐药性变迁具有重要价值     

rIFNα-2b对小鼠脾脏NK细胞活性的影响

目的　研究重组干扰素 α- 2 b(r IFNα- 2 b)对小鼠脾脏 NK细胞杀伤活性的影响 ,了解该干扰素的生物学活性。方法　采用皮下给药的体内实验及 3 H- Td R掺入抑制法检测小鼠脾脏 NK细胞活性。结果　 r IFNα- 2 b能显著提高小鼠脾脏 NK细胞杀伤活性 ,且呈剂量依赖性 ,其高、中、低剂量各组的 NK活性分别为 65 .19± 17.5 6、44 .19± 14.30、35 .46± 17.49,与空白对照及阴性对照均有显著性差异。结论　 r IFNα- 2 b能提高 NK细胞活性 ,并有剂量依赖性。     

参乌胶囊及其有效成分二苯乙烯苷对老年大鼠海马神经元突触体素表达的影响

目的观察由首都医科大学宣武医院药物研究室自行研制的抗老年性痴呆中药新药参乌胶囊(Shen-wu capsule,SW)及其有效成分何首乌二苯乙烯苷(tetrahydroxystilbene glucoside,TSG)对于老年大鼠海马神经元突触结构和突触体素表达的影响,阐明其防治神经元退行性变的机制。方法选用老年SD大鼠,从21月龄始,分别灌胃给予SW(0.8 g/kg、1.6 g/kg)和TSG(0.03 g/kg、0.06 g/kg)至24月龄。以6月龄大鼠为青年对照,未给药24月龄大鼠为老年对照。应用通道式水迷宫试验检测大鼠学习记忆能力,用电子显微镜观察脑海马神经元突触超微结构,用免疫组织化学染色检测海马神经元突触体素(synaptophysin,SYP)的表达。结果与6月龄青年对照组大鼠相比,24月龄老年大鼠通道式水迷宫试验错误次数明显增多(P<0.01);给予SW和TSG的老年大鼠在高剂量组可见水迷宫错误反应次数显著减少,与老年对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。电子显微镜结果显示,24月龄老年大鼠神经元突触数量明显减少;而给予TSG大剂量灌胃组突触数量增多,并可见类似于突触球的结构。免疫组织化学染色结果可见24月龄大鼠SYP染色明显变浅,累积光密度值低(P<0.01);而灌胃给予SW和大剂量TSG组大鼠SYP表达量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论参乌胶囊及其有效成分二苯乙烯苷对于老年大鼠的神经元突触靶位具有较好的疗效,本结果为其在临床用于延缓衰老、改善认知功能提供了实验基础。     

生脉注射液联合健择加顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的观察生脉注射液联合健择加顺铂方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床效果及其减毒增效作用。方法将52例晚期非小细胞肺癌患者随机分为中药加化疗组和单纯化疗组各26例。化疗组予健择1000mg／m^2第1、8天30min静滴，顺铂75mg／m^2第1天静滴，21d为1个周期；中药加化疗组于化疗前3d生脉注射液60ml加入5％GS500ml静滴。每天1次连用3周，两个周期后按照WHO实体瘤近期客观疗效评定标准进行评价。结果中药加化疗组和单纯化疗组近期有效率为46．15％和42．31％，中药加化疗组的Karnorfsky评分增加9例，单纯化疗组增加3例，中药加化疗组体重明显增加，外周血白细胞及血小板下降和贫血发生率明显较单纯化疗组低。结论生脉注射液能提高健择加顺铂方案化疗患者的生存质量，改善临床症状，减轻化疗后骨髓抑制。     

单用不同剂量托吡酯与卡马西平治疗老年癫痫发作的疗效比较

目的:观察单用不同剂量托吡酯及卡马西平治疗老年癫痫病人的临床疗效和不良反应,探讨单用托吡酯更安全、更有效的给药方法。方法:老年癫痫病人120例,分为卡马西平组,31例,服用卡马西平(200～ 600 mg·d~(-1));单用托吡酯组,89例病人按服药剂量不同又分为,低剂量组47例(托_1组,100～200 mg·d~(-1)),高剂量组42例(托_2组,300～400 mg·d~(-1)):结果:托_1,组总有效率81％,托_2组总有效率74％;卡马西平组总有效率77％,3组比较无显著差异(P>0．05)。托_2组不良反应发生率(57％)高于托_1组(34％)(P<0．05)。托吡酯组主要不良反应为感觉异常、胃纳差、头痛、嗜睡头晕和体重减轻。结论:单用较小剂量托吡酯(100～ 200 mg·d~(-1))治疗老年癫痫发怍,疗效好,不良反应少而且轻。     

LC-MS/MS法测定人血浆中的非索非那定及其药动学研究

目的:建立人血浆中非索非那定的LC-MS/MS测定方法,并研究其在健康人体内的药动学特征.方法:以格列吡嗪为内标,血样经甲醇沉淀法提取,采用Agilent ZORBAX SB-C18(100 mm×2.1 mm,3.5 μm),以甲醇-10 mmol·L-1醋酸铵水溶液(70∶ 30)为流动相,流速0.20 ml·min-1;质谱选择性检测非索非那定和内标格列吡嗪离子对分别为m/z 502.1 →466.2,446.0→321.1.20名健康受试者分成两组,分别进行低、中单剂量和多剂量给药的药物动力学试验.结果:非索非那定的线性范围为1.0 ～ 600.0 ng· ml-1(r=0.997 6,n=5),定量下限为1.0 ng·ml-1,提取回收率＞87.6％,日内和日间RSD≤8.5％.非索非那定的t1/2为(9.29～ 11.14)h,MRT为(7.95 ～8.24)h;多剂量给药后Css.max为(206.89±123.23)ng·ml-1,AUCss为(1122.98±646.60)ng·h·ml-1,DF为(1.81±0.36).结论:该法灵敏、简便、快捷、准确、重现性好,适用于非索非那定血药浓度测定及人体药动学研究.