右美托咪定抑制NF-κB核易位减轻大鼠创伤性脑损伤神经炎症北大核心CSCD

目的探究右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)调节创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后小胶质细胞(microglial,MG)极化及神经炎症的机制。方法42只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(sham组)、TBI组、TBI+DEX组(又分为治疗1 d、3 d和7 d组)、TBI+NF-κB抑制剂(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)组和TBI+DEX+PDTC组,每组6只。采用改良Feeney自由落体法制备大鼠TBI模型,造模后1 h腹腔注射PDTC 100 mg/kg、2 h腹腔注射DEX 100μg/kg,直至取材。于取材前采用改良的神经功能缺损评分法(modified neurological severity score,mNSS)评价大鼠神经功能,ELISA检测血清炎症因子,取大鼠损伤皮质通过Western Blot检测MG M1和M2表型标记物及MyD88、NF-κB p65蛋白表达,免疫荧光染色观察损伤皮质处NF-κB p65在MG中的表达及入核情况。计量资料多组间比较采用单因素及双因素方差分析。结果与Sham组相比,TBI组mNSS评分显著升高,DEX组mNSS评分明显低于TBI组,差异有统计学意义(P<0.05);ELISA和Western Blot检测TBI组血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素(interleukin,IL)-1β水平及MG M1表型标记物(IL-1β和TNF-α)升高,抗炎因子IL-10和M2型标记物(精氨酸酶-1和IL-10)表达下降(P<0.05);DEX降低血清TNF-α及IL-1β的水平,提高IL-10水平,并促进MG M2表型极化(P<0.05)。此外,DEX组MyD88表达下调,NF-κB p65核易位被抑制,该效应可被PDTC增强。结论DEX可通过抑制NF-κB核易位调节TBI大鼠MG活化,减轻神经炎症。     

牡蛎中单核细胞增生李斯特菌PCR快速检测方法的建立

目的 建立一种无需前增菌快速检测牡蛎中单核细胞增生李斯特菌的PCR方法。方法 利用β-环糊精和膨润土包被活性炭处理牡蛎样品，去除聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)反应抑制因子，以单核细胞增生李斯特菌特异基因inlB为靶基因，建立无需样品前增菌的PCR快速检测方法。同时验证该方法的特异性、灵敏度及实用性参数，并评估该方法所用试剂在冷冻保存后的稳定性与实用性。结果 建立的PCR方法对130株目标菌和63株非目标菌的检测特异性为100%,灵敏度达10 CFU/25 g。该方法无需前增菌，4 h即可完成检测。PCR方法和国标方法对实际样品中单核细胞增生李斯特菌的检出率(均为13%)和活菌检测率(均为100%)一致，即符合率100%。此外，该方法所用试剂在-20℃冷冻条件下可稳定保存至少1年。结论 建立的PCR方法特异性强、灵敏度高，可快速、准确检测出牡蛎中的单核细胞增生李斯特菌。