EFFECT OF VL AND VH CONSENSUS SEQUENCE-SPECIFIC PRIMERS ON THE BINDING AND EXPRESSION OF A MINI- MOLECULE ANTIBODY DIRECTED TOWARDS HUMAN GASTRIC CANCER

Objective. To construct ScFv and Fab from murine anti-gastric cancer monoclonal antibody(mAb) 3H11.Methods. At first,3H11 ScFv and Fab were constructed with Ⅴ genes PCR amplified by degenerate primers for FR1 .The bacterial expressed 3H11 Ab fragments showed no antigen binding activity.Then,phage antibody library and random mutated library were constructed from 3H11 hybfidoma cells and panning selection was performed. Again the i-dentification of positive clone was failed. Finally the N-terminal sequences of Ⅴ regions were resumed to 3H11 original sequences by site-directed mutagenesis via PCR.Restdts. Binding activity to gastric cancer cells was detected only from N-terminal sequence corrected 3H11 ScFv and Fab, though the expression of the Ab fragments was not affected. Correction of either VL or VH N-terminal se-quences could partially resume the antigen binding activity. Conclusion. Sequence changes of Ⅴ region N terminal introduced by PCR may seriously affect antigen binding without affecting the expression of antibody.     

喉癌组织恶性度与颈淋巴结转移关系

采用五因素评点法对４０例喉鳞癌进行组织学和临床方面的研究。结果表明，组织恶性度与Ｔ分期无相关性，浸润方式弥散及恶性度高（评分≥１１）的肿瘤发生颈淋巴结转移率显著高于有完整肿瘤边界者及恶性度低（评分≤１０）者。提示喉癌组织恶性度在预测颈淋巴结转移上有实用价值，可临导临床治疗方案的选择。     

软坚冲剂治疗乳腺增生症的临床观察

近5年来,我们自拟软坚冲剂为主治疗乳腺增生症,并于治疗前后测定血清雌二醇(E_2)、血液流变学以及做乳腺B超检查,取得了良好的临床疗效,现将结果报告如下。1 临床资料共观察86例患者,均为绝经期前女性,年龄17～52岁,多数在21～40岁。病程最短半月,最长26年,其中1年以内者54例。全部患者均有不同程度的乳房胀痛或刺痛,均可们及数量不等的结节状、索条状或片状增生,76例增生见于外上象限,35例增生见于两个或两个以上象限,78例患者乳痛症状在月经前期发生或加重,月经后消失或减轻。79例患者有性急易怒,情志不舒的肝郁证候。全部病例均经彩色B型超声波检查,排除恶性病变,结合临床诊断为乳腺增生症。     

中药挥发性成分的透皮促渗作用

透皮治疗系统(transdermal therapeutic system，TTS)或称经皮给药系统(transdermal drugdelivery system)是指在皮肤表面给药后药物以一定速率通过皮肤经毛细血管吸收进入体循环而产生药效的一类制剂，具有可避免首过效应、减少给药次数和避免口服给药引起血药浓度“峰谷”现象等优点，因此已成为国内外药物制剂研究的重点。     

132例鼻窦内窥镜手术体会

我院自2003年4月-2004年3月共完成鼻窦内窥镜手术132例,现报告如下:     

慢性再生障碍性贫血中西医结合优化治疗方案临床研究

目的评价补肾方联合雄激素及免疫抑制剂治疗慢性再生障碍性贫血（CAA）的临床疗效,以确立中西医结合治疗CAA的优化治疗方案。方法将39例CAA患者随机分为3组,对照组（16例）采用司坦唑醇片联合环孢素A（CsA）,试验一组（11例）辨证采用补肾Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号方治疗,试验二组（12例）在对照组基础上加用补肾Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号方治疗,疗程6个月。分别观察各组临床疗效及治疗前后患者外周血清促红细胞生成素（EPO）、干扰素-γ（IFN-γ）水平的变化情况。结果 3组在临床疗效、外周血象改善方面差异无统计学意义（P〉0.05）,但试验二组在贫血症状及中医证候的改善方面明显优于另外2组（P〈0.05）,并能显著降低IFN-γ水平（P〈0.05）。结论补肾方联合雄激素及免疫抑制剂治疗CAA在临床疗效、改善症状及提高血常规计数方面均优于单用中药或单用西药治疗。     

当归补血汤促进小鼠骨髓移植后造血组织重建的研究

目的:探讨当归补血汤对小鼠同基因骨髓移植(BMT)后骨髓造血组织重建的影响。方法:建立典型同基因BMT小鼠模型,随机分成BMT模型对照组和BMT+当归补血汤组,另取正常小鼠外周血及骨髓作空白对照。分别给以生理盐水、当归补血汤10g·kg^-1·d^-1灌胃治疗。于BMT后第1,11,22天观察外周血细胞、骨髓单个核细胞(BMMNC),镜下观察小鼠骨髓切片。结果:BMT+当归补血汤组第11,22天外周血白细胞、红细胞、血小板、BMMNC水平均显著高于BMT模型对照组(P<0.05或P<0.01),骨髓造血组织学情况也明显好于对照组。结论:当归补血汤有促进造血组织重建的作用。     

抗人胃癌3H11人-鼠嵌合抗体的构建及表达

为了降低抗人胃癌鼠单抗3H11的免疫原性,以利于该单抗在临床中的应用。我们构建并表达了3H11的人-鼠嵌合抗体,将3H11的轻、重链可变区基因分别插入到含有人k链及IgGl重链恒定区基因的真核细胞表达载体中,构建了3H11人-鼠嵌合抗体轻、重链表达载体。应用Lipofectin方法先将嵌合轻链表达载体转染到Sp2/0细胞中,经用含霉酚酸的选择培养基筛选及克隆化培养,获得稳定分泌3H11人-鼠嵌合轻链的转染细胞株。再将嵌合重链表达载体转染该细胞系,用含有组氨醇的选择培养基筛选,获得组氨醇抗性细胞株,经亚克隆后得到可稳定分泌人k链和人IgGl的转染细胞系,经ELISA检测该细胞系所分泌的上清含有可与人胃癌细胞系803结合的人IgG抗体活性,RT-PCR结果显示该细胞株有人-鼠嵌合抗体mRNA的转录,证明已获得分泌3H11人-鼠嵌合抗体的细胞系。     

反相高效液相色谱法测定五味清浊散中胡椒碱含量

建立了高效液相色谱法测定五味清浊散中胡椒碱含量的方法。平均回收率为１０２．０％（ＲＳＤ为０．４６％），最低检出浓度为０．０３μｇ／ｍｌ，被测组分线性范围是１．８７５～３０μｇ／ｍｌ，ｒ为０．９９９９。     

配制缓释制剂中固体分散技术的应用现状

固体分散体(SolidDispersion,SD)是由药物与载体混合制成的高度分散的固体分散体系。自从1961年Sekiguchi等犤1犦首次采用熔融法将难溶性药物与水溶性材料制成固体分散体,提高了难溶性药物的溶出速度以来,固体分散技术的研究应用领域不断拓展。近年来,人们用水不溶性聚合物、肠溶性材料、脂质材料等为载体制备缓释固体分散物,从而使固体分散研究进入新的发展阶段。本文按载体材料的不同,对缓释制剂中固体分散技术应用情况简介如下。1乙基纤维素(EC)固体分散体EC固体分散体常采用溶剂蒸发法制备,将药物与EC溶解或分散于乙醇等有机溶剂中…