子宫颈癌发生发展中维甲酸受体-β基因启动子甲基化状态的研究

目的 研究维甲酸受体-β(RAR-β)基因在子宫颈癌发生、发展中的表达变化,分析其差异表达与甲基化的关系及临床意义.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测四种子宫颈癌细胞株、38例子宫颈浸润癌、30例子宫颈上皮内瘤变组织、10例正常子宫颈组织中RAR-β基因的表达,Western blotting对RAR-β蛋白进行定量检测,分析蛋白水平上的RAR-β表达的变化,并与正常子宫颈组织的RAR-β表达情况进行对照.应用甲基化特异性PCR(MSP)对细胞系和组织的RAR-βDNA进行甲基化分析,同时分析RAR-β基因的表达与子宫颈癌临床病理参数的关系.结果 子宫颈癌细胞系、子宫颈上皮内瘤变组织和子宫颈癌组织中RAR-β基因的表达缺失或下降,并与正常子宫颈组织中的RAR-β表达情况进行对照,差异具有统计学意义(P＜0.05).蛋白的表达检测也得到相同的结果.MSP检测发现3种子宫颈癌细胞株、11例癌组织、1例CIN Ⅰ级、5例CIN Ⅱ～Ⅲ级RAR-β第1外显子甲基化表现,甲基化者RAR-β表达均下降.RAR-β基因甲基化状态在不同的病理分级中差异有统计学意义(P=0.037),在不同的I临床分期(P≈1.000)及有无淋巴转移中差异无统计学意义(P≈1.000).结论 RAR-β基因的表达缺陷在子宫颈癌的发生中起重要作用,而启动子区异常甲基化是导致基因表达缺陷的主要原因.     

Expression of Cyclooxygenase-2 in Ovarian Cancer Cell Lines

Summary： To investigate the expression of cyclooxygenase-2 （COX-2） in ovarian cancer cell lines, RT-PCR and immunocytochemistry were used to detect the expression of COX-2 in 5 ovarian cancer cell lines. The expression of COX-2 mRNA and protein was detected in all 5 cell lines. It is suggested that COX-2 is expressed in ovarian cancer cell lines, which provides a Basis for the chemoprevention of ovarian cancer.     

血小板源性生长因子对体外培养子宫肌瘤细胞增殖的影响

目的: 研究血小板源性生长因子 (Platete-DerivedGrowthFactor, PDGF) 对体外培养的子宫肌瘤细胞和子宫平滑肌细胞增殖性核抗原 (PCNA) 和细胞内前胶原α1多肽的表达的影响。方法: 用基因重组人PDGF-AB (10ng/ml) 作用体外培养的子宫肌瘤细胞, 以邻近正常子宫肌层细胞作对照, 用RT-PCR法从mRNA水平检测在有无PDGF-AB作用下, PCNA、前胶原α1多肽 (Ⅰ、Ⅲ) 表达的差异; 用免疫组化SABC法从蛋白水平显示PDGF对PCNA表达的影响。结果: 两种细胞受PDGF-AB刺激后, PCNA、collagenα1 (Ⅰ) 表达均有增加, 但两者在肌瘤细胞中表达的增加显著高于子宫平滑肌细胞 (P<0. 01); 而collagenα1 (Ⅲ) 在子宫肌瘤细胞和子宫平滑肌细胞中的变化无显著性差异。结论: PDGF在体外可同时促进子宫肌瘤细胞增殖和细胞外基质分泌的增加, 从而使肌瘤组织不断增长。     

妊娠高血压综合征患者血浆AM、ET-1、CGRP的变化及临床意义

目的 :探讨肾上腺髓质素 (AM)、内皮素 - 1(ET- 1)、降钙素基因相关肽 (CGRP)在妊高征发病中的作用及其临床意义。方法 :采用放射免疫法测定 5 5例妊高征患者及 30例正常妊娠妇女血浆 AM、ET- 1、CGRP浓度。结果 :1妊高征患者血浆 AM、ET- 1显著高于正常妊娠组 (P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,CGRP浓度则明显下降 (P<0 .0 5 ) ,妊高征各组间比较差异具有显著性 (P<0 .0 5 ) ;2妊高征患者血浆 AM、ET- 1与平均动脉压 (MAP)呈显著正相关 (r=0 .76 ,P<0 .0 1;r=0 .6 2 ,P<0 .0 5 ) ,CGRP与 MAP则呈负相关 (r=- 0 .5 4 ,P<0 .0 5 ) ;3妊高征患者血浆 AM浓度与 ET- 1浓度呈正相关 (r=0 .72 ,P<0 .0 5 )与 CGRP浓度呈负相关 (r=- 0 .6 5 ,P<0 .0 5 )。结论 :AM、ET- 1及 CGRP共同参与妊高征的病理生理过程 ,联合检测其血浆浓度可以作为监测 PIH病情的重要指标     

瘦素在妊娠期高血压疾病母体血浆以及胎盘中的表达

目的 探讨瘦素(leptin)在正常妊娠以及妊娠期高血压疾病母体血浆以及胎盘中的表达.方法 采用前瞻性的研究方法,对孕早期血压正常的180例孕妇,保留妊娠10～14、20～24、30～34周以及终止妊娠后24 h母体血浆、胎盘,根据随访结局分为子痫前期组(4例重度、6例轻度),妊娠期高血压组(12例)和正常妊娠组(22例,选自158例正常妊娠).用ELISA法测定不同时间段母体血浆瘦素浓度,采用免疫组织化学法检测瘦素在胎盘组织中的定位和表达;采用QF-RT-PCR法检测胎盘中瘦素mRNA的表达水平.同时选取15例未孕健康妇女作为未孕对照组.结果 正常妊娠孕妇母体血浆瘦素浓度随妊娠的进展逐渐升高;妊娠期子痫前期组的血浆瘦素浓度明显高于同期正常妊娠组,差异均有极显著性意义(P<0.01),而妊娠期高血压组与正常妊娠组比较差异均无显著性意义(P>0.05);终止妊娠后24 h所有病例母体血浆瘦素水平急剧下降,接近正常未孕水平.瘦素表达分布于胎盘绒毛合体滋养细胞、细胞滋养细胞;瘦素蛋白和mRNA表达强度在正常妊娠、妊娠期高血压、子痫前期依次上升,差异均有极显著性意义(P<0.01).结论 子痫前期患者母体血浆瘦素水平在妊娠早期就已经明显升高,随着病情加重,胎盘分泌的瘦素逐步增加,是预示妊娠期高血压疾病病情严重程度的敏感信号分子之一.     

慢性肺心病急性期的中西医结合治疗及护理

目的总结中西医结合治疗及护理慢性肺心脏病急性期的临床疗效。方法将310例慢性肺心病急性发作期患者随机分为对照组103例,给予西医常规治疗及一般护理;治疗组207例在西医常规治疗基础上采用辨证运用中药及加强护理,比较两组疗效。结果治疗组有效148例（94.3%）,对照组有效124例（81.55%）;治疗组疗效明显高于对照组（P〈0.05）。结论慢性肺心病急性发作期患者采用中西医结合治疗及加强护理可明显提高疗效。     

神经激肽B和内皮素1与妊娠期高血压疾病发病的关系

目的 探讨神经激肽B(NKB)和内皮素1(ET-1)与妊娠期高血压疾病(HDCP)发病的关系.方法 选择2005年3-7月在华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科行产前检查的22例HDCP孕妇作为研究对象,其中,妊娠期高血压12例为妊娠期高血压组,子痫前期10例为子痫前期组;同期22例正常孕妇为对照组.分别采用酶联免疫吸附试验测定3组不同孕周孕妇血浆中NKB和ET-1的水平,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(SP)检测NKB在胎盘组织中的定位和表达,采用RT-PCR技术检测胎盘组织中的NKB mRNA和ET-1 mRNA表达.结果 (1)子痫前期组孕10～14周、孕20～24周、孕30～34周孕妇血浆中NKB和ET-1的水平分别为(35.6±5.2)、(17.9±4.3)μg/L,(39.5±4.3)、(22.7±3.6)μg/L,(47.1±3.3)、(27.5±3.5)μg/L;对照组分别为(22.9±3.3)、(10.7±5.3)μg/L,(30.2±3.4)、(13.2±4.1)μg/L,(34.6±4.3)、(16.6±4.8)μg/L,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);妊娠期高血压组与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(2)各组孕妇胎盘组织中的绒毛合体滋养细胞、绒毛血管内皮细胞及间质细胞的胞质内均可观察到NKB蛋白阳性染色颗粒,其中以合体滋养细胞的分布为主.子痫前期组胎盘组织中的NKB蛋白表达水平(0.244±0.020)显著高于对照组(0.160±0.012),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).而妊娠期高血压组NKB蛋白表达水平(0.162±0.019)与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).(3)子痫前期组孕妇胎盘组织中的NKB mRNA(0.97±0.36)和ET-1 mRNA(0.90±0.36)表达水平显著高于对照组(分别为0.78±0.54、0.65±0.47),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);而妊娠期高血压组(分别为0.80±0.40、0.70±0.32)与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).(4)子痫前期组孕妇血浆中NKB水平与ET-1水平呈正相关关系(r=0.79,P<0.05).结论 子痫前期患者在孕早期(孕10～14周)临床症状出现之前,其血浆中NKB和ET-1水平即已显著升高,胎盘组织中NKB和ET-1表达水平也明显升高.子痫前期患者体内NKB和ET-1水平变化与HDCP的发病密切相关.     

子宫内膜癌中增殖细胞核抗原表达和S-100阳性朗格汉斯细胞浸润及其临床意义的评估

目的 探讨子宫内膜癌增殖细胞核抗原(PCNA)的表达和肿瘤微环境中S-100蛋白阳性的朗格汉斯细胞(LC)的浸润情况及其临床意义.方法 采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)法对10例正常增殖期子宫内膜组织和72例子宫内膜癌组织PCNA的表达及S-100蛋白阳性LC浸润情况进行了检测,分析其与子宫内膜癌临床病理特征的关系.结果 PCNA在子宫内膜癌组织中的表达阳性率和阳性指数评分均高于正常子宫内膜,差异有极显著性意义(P<0.01); S-100蛋白阳性的LC在正常子宫内膜组织中未见浸润,在子宫内膜癌组织中浸润阳性率为81.9%,差异有极显著性意义(P<0.01); PCNA阳性指数评分在高分化、低手术分期和肌层浸润深度≤1/2的子宫内膜癌组织中低于中低分化、高手术分期和子宫肌层浸润深度>1/2的子宫内膜癌组织,差异有极显著性意义(P<0.01);S-100蛋白阳性的LC在高分化、低手术分期和肌层浸润深度≤1/2的子宫内膜癌组织中浸润多于中低分化、高手术分期和子宫肌层浸润深度>1/2的子宫内膜癌组织,差异有极显著性意义(P<0.01);PCNA阳性指数评分与S-100蛋白阳性LC的浸润呈负相关(r=-0.471,P<0.01).结论 癌组织微环境中LC浸润反映机体抗肿瘤的免疫反应,PCNA的阳性表达和缺乏LC浸润可能与子宫内膜癌不良预后有关.     

血浆血栓烷B2不同孕期对子痫前期的预测价值

目的:研究孕妇血浆TXB2在子痫前期以及正常妊娠中的变化并探讨不同孕期对子痫前期的预测价值。方法:采用前瞻性、双盲的研究方法,对180例孕前血压正常的孕妇,在妊娠10+0~14+6、20+0~24+6、30+0~34+6周3个时间段母体血浆中的TXB2水平进行测定,观察孕妇孕期病情变化并随访妊娠结局。结果:①180例孕妇发展为子痫前期10例(子痫前期组),其中4例重度子痫前期、6例轻度子痫前期;170例妊娠结局正常(正常妊娠组)。②180例孕妇血浆中TXB2的水平随着妊娠的进展,进行自身配对比较均逐渐上升,不同阶段之间比较,差异有显著性意义(P=0.000<0.01)。③在妊娠10+0~14+6周子痫前期组母体血浆TXB2水平与正常妊娠比较,差异有上升的趋势,但差异无统计学意义(P=0.486>0.05);20+0~24+6、30+0~34+6子痫前期母体血浆TXB2与正常妊娠组比较,其值均明显上升(P=0.016、0.002,P均<0.05)。④母体血浆中TXB2水平在妊娠20+0~24+6、30+0~34+6周2个阶段对子痫前期均有预测价值,ROC曲线下面积分别为0.724(95%CI0.617~0.830)和0.797(95%CI0.674~0.920),应用ROC曲线计算2个阶段的最佳切入值分别为3 750 ng/ml和4 400 ng/ml,它们预测子痫前期的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、比数积(OR)分别为80%、69.5%、13.3%、98.33%、9.11和90%、68.82%、13.84%、99.13%、19.86。结论:子痫前期母体血浆TXB2水平在临床症状出现前很长一段时间就异常升高,20+0~24+6、30+0~34+6周母体血浆TXB2水平对子痫前期有早期预测价值,妊娠30+0~34+6周的预测价值优于妊娠20+0~24+6周。