干眼颌下腺移植术后泪液蛋白分析

目的分析自体颌下腺游离移植治疗严重干眼术后分泌的泪液蛋白成分及其与正常泪液的异同。方法收集自体颌下腺游离移植成功后的8例患者的泪液,测定其总蛋白含量及淀粉酶、表皮生长因子(EGF)、分泌性免疫球蛋白A(SIgA)等主要蛋白成分的含量,同时通过不连续的SDS-PAGE蛋白电泳观察其形成的蛋白电泳条带,并与正常人的泪液对比。结果自体颌下腺游离移植后分泌的泪液总蛋白含量明显低于正常泪液(P<0.05),SIgA含量接近正常泪液(P>0.05),EGF含量高于正常泪液(P<0.05),而其所含的淀粉酶浓度则远高于正常泪液(P<0.05)。SDS-PAGE蛋白电泳显示颌下腺移植术后分泌的泪液与正常泪液具有相似的电泳条带及相近的蛋白成分。结论自体颌下腺游离移植术后分泌的泪液具有与正常泪液相近的蛋白成分,但其总蛋白含量较低,淀粉酶含量较高。     

应用原瓶黏附分选表皮干细胞的方法学特点

目的:探索一种简单易行的方法分离表皮干细胞,为组织工程学的进一步研究奠定基础。方法:实验于2005-07/12在中山大学眼科中心国家眼科学重点实验室完成。健康3个月龄恒河猴2只,分离与培养猴表皮细胞,获取第2～4代的细胞,消化后,将细胞重新放回原瓶中,培养箱中静置20min,获得的贴壁细胞即为快吸附的表皮细胞。①于光学显微镜下观察分选前细胞和快吸附细胞。②对20min快吸附的表皮细胞进行整合素α6和CD71流式细胞仪检测,以未经吸附分选的细胞作为对照。③20min快吸附的表皮细胞和分选后未黏附细胞分别制作3组细胞爬片,进行整合素β1、K15、和K10的免疫组织化学染色。④20min快吸附的表皮细胞和分选后未黏附细胞进行K15、整合素β1和K1(K10对应角蛋白)的mRNA反转录聚合酶链反应的检测。结果:①分选后的细胞体积较小,核浆比例较大。②流式细胞仪的结果显示快吸附细胞以干细胞为主(α6briCD71dim为82.5±1.641),也含有少量的短暂扩增细胞(α6briCD71bri为4.9±2.125),有丝分裂后细胞及终末细胞则检测不到(α6dim)。③免疫组化可见快吸附细胞呈K15和整合素β1阳性,K10阴性;分选后未黏附细胞K10为阳性,而K15和整合素β1均为阴性。④反转录聚合酶链反应示吸附分选后的快吸附细胞高表达K15和β1整合素,K10没有表达;而分选后剩余的细胞只表达K10。结论:原瓶黏附分选方法是一种简单可行的分选表皮干细胞的方法。     

原发性青光眼的皮肤纹理学研究

对18例原发性开角青光眼、44例原发性闭角青光眼病人和90例同种族正常人进行了调查、比较,结果显示青光眼病人与对照组间差异有显著性,两组病人间无显著性差异,提示原发性青光眼病人皮纹学的进一步研究,将有助于该病的普查、筛选,甚或提供诊断该病的参考依据。     

异种显微板层角膜移植术的实验研究

板层角膜移植术是目前临床常用的角膜移植手术 ,最大优点是术后排斥反应发生率低和手术不进入前房 ,但由于徒手剖切植片和植床 ,致术后界面瘢痕和散光较重。因此 ,术后视力不佳。显微板层角膜移植术是一种全新的板层角膜手术 ,术后界面瘢痕极轻[1,2 ]。由于手术损伤小、术后反应轻 ,降低了诱发排斥反应的可能性 ,为应用异种角膜材料创造了条件。鉴此 ,我们将异种角膜基质引入该手术 ,设计了异种显微板层角膜移植术 ,并进行了动物实验 ,报道如下。材料和方法一、实验动物及实验分组新西兰白兔 3 0只 ,由中山大学实验动物中心提供。新鲜猪眼球…     

内高频电灼法治疗慢性泪囊炎

内高频电灼法治疗慢性泪囊炎王智崇，陈冬，程普斋，吕志明，晁储璋慢性泪囊炎是眼科常见病，鼻泪管阻塞为其直接病因，治疗仍以手术为主。我们用自制的泪道治疗仪，采用内高频电的法治疗该病，收到满意效果。一、仪器的构成由高频电治疗仪（主机）和泪道成型探针（探针）...     

蛋白激酶C亚型在小鼠胚胎干细胞中的表达研究

[目的]研究5种蛋白激酶C(PKC)亚型PKC_α、PKC_β、PKC_γ、PKC_δ和PKC_ε在小鼠胚胎干细胞(ES细胞)株ES-BALB/c的表达情况。[方法]ES-BALB/c细胞株用普通ES细胞培养液培养,分别种植于预置有盖玻片的6孔板和直径100mm的培养皿,培养2d和4d后分别进行PKC亚型免疫组织化学和Western印迹检测。[结果]免疫组化发现PKC_α在ES-BALB/c细胞有广泛的棕黄色的阳性表达,以细胞浆和细胞核最甚,而PKC_β、PKC_γ、PKC_δ和PKC_ε4种亚型无明显表达;Western印迹发现PKC_α出现一条蛋白印迹条带,分子质量约为84ku,而PKC_β、PKC_γ、PKC_δ和PKC_ε4种亚型无蛋白印迹条带。[结论]PKC_α在ES细胞阶段即有表达,在将来的细胞分化阶段可能有非常重要的作用,而PKC_β、PKC_γ、PKC_δ和PKC_ε4种亚型在ES细胞阶段没有表达。     

胃复安引起视力障碍2例

例1 男44岁住院号46173 因胃部胀痛,于1986年9月22日下午两点,肌注胃复安20mg,半小时后,病人恶心、呕吐。此时胃部胀痛消失。23日上午,病人发现双眼视物模糊,步态不稳。傍晚时,视力模糊加重,24日早晨醒后,双目失明。既往身体健康,无癔病史。于1986年9月24日入院。体格检查:体温正常,血压120/75mmg全身情况良好,血常规正常。脑电图和蝶鞍片均正常。双眼视力手动。眼压右17.30mmg,左15.88mmHg。眼球各方向运动轻度受     

显微板层角膜移植术后神经再生的观察

目的：了解不同位置,不同深度角膜损伤后,角膜神经恢复的特点和过程。方法：以显微板层角膜移植术和显微板层角膜层间置换术为模型,通过光学显微镜、透射电子显射镜和扫描电子显微镜观察了术后３周￣８个月角膜神经恢复情况。结果：显微板层角膜移植术后２个月创缘神经以再生成环或以芽生的方式进入植片,术后３个月可见粗大神经从周边长入植片,术后６个月上皮下丛形成,术后８个月上基本恢复。显微板层角膜层间置换术术后３周切     

体外诱导胚胎干细胞定向分化为神经细胞的初步研究

目的 初步研究诱导胚胎干细胞ES－D3细胞系向神经细胞定向分化可能性,为青光眼等视网膜视神经疾病的治疗提供可能的途径。方法 以Buffalo大鼠肝细胞培养上清进行胚胎干细胞ES－D3细胞系培养,参照Bain等方法进行改良,以视黄酸对ES－D3细胞进行分化诱导,1d后加入阿糖胞苷,相差显微镜下观察细胞生长情况。结果 加入视黄酸后1d,相差显微镜下可见散在1个、2个或多个突起的神经样细胞。加入视黄酸后2d、阿糖胞苷后第1d,可见大量1条、2条或多条突起的神经样细胞,并相连成网络结构。结论 视黄酸辅以阿糖胞苷在体外可成功诱导胚胎干细胞ES－D3细胞系成为神经样细胞,并形成网络,结合我们裸鼠眼内接种ES－D3细胞分化为神经细胞样细胞研究结果,胚胎干细胞定向分化及移植,可望成为青光眼等视网膜视神经疾病治疗的一个新的途径。     

鼻泪管阻塞的治疗现状

鼻泪管阻塞是眼科的常见病 ,有先天性和后天性两大类 ,易发展为急、慢性泪囊炎 ,以手术治疗为主 ,目的是重建或恢复泪液的引流通路 ,近年来 ,随着激光、内窥镜技术、高分子材料及其他医疗器械的不断发展和完善 ,其治疗手段有了长足的进步。一、外路泪囊鼻腔吻合术 ( externaldacryocystorhinostomy,EXT- DCR)EXT- DCR是治疗慢性泪囊炎的经典手术 ,190 4年由 Toti首创 ,之后 ,Kuhnt ( 1914)、 Ohm ( 192 0 )等许多学者相继对其进行了研究、改进 ,目前 ,EXT- DCR的手术成功率已达 85%以上〔1、2〕,若同时联合硅胶插管成功率可达到 98…