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162.
目的制备可特异性地识别肿瘤抑制蛋白质P53的单克隆抗体。方法应用重组人野生型P53蛋白为免疫抗原,采用经典的细胞融合技术制备单克隆抗体。亲和层析纯化抗体蛋白;ELISA测定抗体滴度。纯化的抗体作用于含有不同p53基因型的MDA-MB-231〔p53(mutant)〕和〔H1299,p53(null)〕肿瘤细胞系,Western印迹、免疫组化和免疫荧光染色法检测抗体与内源性P53蛋白的结合特异性。结果对筛选到的3株单克隆抗体1P15,2P37和3P40,进行了亲和层析技术纯化。SDS-PAGE结果显示,纯化后的3株抗体纯度均在90%以上;ELISA滴度测定结果显示,3株单抗的滴度均在1∶6000以上。免疫印迹结果表明,3株抗体在p53检测中具有较高的灵敏度,其中3P40的灵敏度最高,可以达到5 ng。Western印迹、免疫组化以及免疫荧光染色结果显示,抗体与细胞内源性P53蛋白的结合特异性,说明3P40可以特异性地结合细胞总蛋白提取物以及细胞中内源性P53蛋白,而在检测不表达P53蛋白的细胞系样品时,没有非特异性结合。结论成功制备3株对P53具有高亲和力的单克隆抗体,其中3P40的抗体滴度和灵敏度最佳。 相似文献
163.
目的 统计分析智齿冠周炎患者的病因,为智齿冠周炎患者进行健康教育指导提供依据.方法 随机统计来我院门诊就诊的300例智齿冠周炎患者,观察智齿冠周炎发生的原因及其处理办法,并对结果进行统计分析.结果 智齿冠周炎患者中以智齿垂直阻生最多见,占总数的70.33%,其中78.67% 患者智齿远中有龈瓣.结论 智齿垂直阻生且远中有龈瓣是引起智齿冠周炎的主要病因,护士应向患者多进行健康教育宣传,可建议患者预防性切除智齿远中龈瓣,减少智齿冠周炎的发生. 相似文献
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双抗体夹心酶联免疫法检测不同样品中的蓖麻毒素 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 应用酶联免疫吸附分析方法(ELISA)检测待测样品中的蓖麻毒素。方法 用蛋白 G亲和层析柱纯化蓖麻毒素单克隆抗体(4C13,3D74,5E4和5H6),以3D74及辣根过氧化物酶(HRP)标记的4C13建立的双抗体夹心ELISA对含有蓖麻毒素的多种样品进行检测。结果 抗蓖麻毒素的单克隆抗体经亲和层析纯化后具有较高的蛋白纯度,应用HRP标记的4C13与3D74建立双抗体夹心ELISA,对于溶解于磷酸缓冲液中的蓖麻毒素标准品的检测灵敏度可达2.5 μg·L-1;对于土壤、面粉、牛奶、咸菜汁、雪碧、可乐和腐乳汁中的蓖麻毒素样品检测的灵敏度为2.5~5.0 μg·L-1;与磷酸缓冲液样品相比较,含有相同浓度蓖麻毒素的小鼠和人血清样品ELISA的阳性结果明显减弱。结论 双抗体夹心酶联免疫法能够有效用于含有蓖麻毒素样品的检测分析。 相似文献
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以不明原因发热为首发表现的恶性淋巴瘤48例临床分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨以不明原因发热(FUO)为首发表现的恶性淋巴瘤(ML)的临床病理特点及诊断方法与策略.方法 回顾性分析48例以发热为首发表现的ML患者的临床和病理资料.结果 (1)ML的热型多样;(2)临床表现除发热外以乏力、盗汗及体质量减轻最常见.病理类型:霍奇金淋巴瘤3例(6.2%),非霍奇金淋巴瘤45例(93.8%);B细胞淋巴瘤 30例(62.5%),T细胞淋巴瘤18例(37.5%);(3)按照Ann/Arbor分期(Cotswolds修订)标准,本组48例ML患者中,Ⅰ期1例(2.1%),Ⅱ期2例(4.2%),Ⅲ期25例(52.1%),IV期20例(41.6%).结论 以发热为主要表现的ML临床表现复杂、多变,确诊依靠病理,在影像技术引导下对病灶行穿刺活检寻找组织学依据十分重要.必要时可行剖腹探查或脾切除术.ML是恶性肿瘤引起FUO最常见的原因,大多数FUO患者经过全面检查和认真分析可以明确诊断. 相似文献
167.
目的:建立青霉胺片的有关物质检测方法,并分析国产青霉胺片的有关物质质量及存在的问题。方法:建立HPLC-ELSD法检测31批次青霉胺片和6批次青霉胺原料的有关物质,色谱柱为GRACE Apollo C18(250 mm×4.6 mm, 5μm),流速0.6 mL·min-1,柱温25℃,进样量20μL。采用二维色谱柱切换HPLC-MS~n法推测6个杂质的化学结构并分析其来源,并采用ADMET Predictor软件对这6个杂质进行毒性预测。结果:青霉胺片的有关物质个数和含量均远高于原料。推测的6个杂质中,青霉胺二硫化物为已知杂质,其余5个为未知杂质,所有杂质均为降解杂质。ADMET Predictor软件毒性预测结果显示4个杂质的毒性均较青霉胺大,2个杂质的毒性与青霉胺相当。结论:建立的HPLC-ELSD法可有效检测青霉胺片的有关物质。制剂中的杂质主要来源于制剂的生产过程。青霉胺片有关物质的风险比较大,根据各杂质的毒性预测结果,建议制剂生产企业应高度重视制剂生产的各个环节。 相似文献
168.
本研究基于生理药代动力学理论,建立和验证盐酸莫西沙星的体内药代模型,计算不同剂型在体内包括静脉血及肺、脾等不同器官的药物浓度-时间曲线,通过相应药代动力学参数结果与相关病原菌的最小抑菌浓度的比较,量化评价本品种及其制剂的有效性水平。结果表明,盐酸莫西沙星制剂在相应器官的抗感染有效性水平基本一致,品种制剂的生理药代动力学模型可以更为准确地描述抗感染药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程,适用于这类药物的有效性评价工作,为相应科研与科学监管工作提供有力的研判依据。 相似文献
169.
目的研究卵巢腺癌、浆液性或黏液性囊腺瘤及正常卵巢组织肿瘤相关巨噬细胞(TAM)和肥大细胞(MC)计数及其临床病理意义。方法43例卵巢腺癌、15例浆液性囊腺瘤、15例黏液性囊腺瘤和10例正常组织标本常规制作石蜡包埋切片,TAM和MC染色方法为EnVisionTM免疫组化法。结果卵巢腺癌TAM和MC计数明显高于浆液性或黏液性囊腺瘤及正常组织(P<0.01);浆液性或黏液性囊腺瘤TAM、MC计数明显高于正常组织(P<0.01);组织学分级G1、临床分期Ⅰ Ⅱ,无淋巴结转移和未侵犯周围组织器官的腺癌病例TAM、MC计数明显低于组织学分级G3、临床分期Ⅲ Ⅳ、淋巴结转移和侵犯周围组织器官病例(P<0.05),卵巢腺癌TAM计数和MC计数呈密切正相关(r=0.42,P<0.01)。结论TAM和MC计数可能是反映卵巢腺癌发生、进展、生物学行为及预后的重要标志物。 相似文献