下调血清高迁移率族蛋白1水平对急性出血坏死性胰腺炎大鼠全身毛细血管渗漏的影响

目的 观察丙酮酸乙酯(EP)对急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)大鼠全身毛细血管渗漏(SCL)的影响,探讨下调血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平在AHNP治疗中的作用.方法 采用胰管逆行灌注人工胆汁的方法复制大鼠AHNP模型.随机分为正常对照组(Normal组,n=8)、假手术组(Sham组,n=8)、AHNP组(n=16)、EP组(n=16).EP组建模12 h开始使用EP治疗.建模24 h取材,检测与水分渗漏相关的肺系数、肺湿/干比、腹水量.使用伊文氏蓝(EBD)尾静脉注射,检测与蛋白渗漏相关的腹水、肺、胰腺、空肠、回肠、耳廓组织EBD含量;Western blot法检测血清中HMGB1的含量.结果 建模后24 h,EP组血清HMGB1浓度明显低于AHNP组[(87±16)ng/ml vs.(154±22)ng/ml,P＜0.05].EP组大鼠腹水量、肺系数、肺湿/干比明显低于AHNP组,均P＜0.05.EP组大鼠胰腺、空肠、回肠和耳廓组织EBD含量明显低于AHNP组.结论 下调血清HMGB1水平可有效减轻AHNP大鼠SCL的程度.     

复发及残余肝胆管结石的外科治疗

目的　探讨复发及残余肝胆管结石的治疗效果。方法　对我院 1993年 6月～ 2 0 0 1年6月收治的 10 5例复发及残余肝管结石的结石部位、病理情况、手术方式、治疗效果及随访结果等资料进行回顾性分析。结果　根据结石分布部位及胆管狭窄程度等采取肝叶切除 (5 2 .4%,5 5 /10 5 )、肝段切除 (13.2 %,14/10 5 )、胆肠吻合 (2 4.8%,2 6 /10 5 )、Ⅰ～Ⅲ级肝管切开引流加胆总管探查 (9.5 %,10 /10 5 )。所有病例随访 6月～ 8年 ,彻底治愈者 79%(83/10 5 ) ,效果优良者 94.2 %(99/10 5 )。结论　对于复发及残余肝胆管结石患者 ,应根据结石的部位、狭窄的程度等采取相应的治疗方法。肝叶及肝段切除是复发及残余肝胆管结石的较好外科治疗方法。胆肠吻合应掌握严格的适应证。Ⅰ～Ⅲ级肝管的多处切开引流加术中、术后胆道镜亦为有效方法之一。     

胰腺癌细胞株PANC-1中肿瘤干细胞生物学行为的研究

目的:研究人胰腺癌细胞株PANC-1中肿瘤干细胞的生物学特性。方法:将PANC-1细胞进行培养，以CD44和CD24作为细胞表面标志。利用流式细胞仪，从该细胞株中分离出细胞亚群。将所得到的有CD44-CD24-, CD44+CD24+ 表面标志的PANC-1细胞和未分选的PANC-1细胞置于含有10 ng/mL成纤维细胞生长因子、20 ng/mL上皮生长因子和ITS（胰岛素、转铁蛋白和硒混合溶液）无血清DMEM/F12（1∶1）培养基中，以MTT法检测不同亚群细胞体外增殖活性；通过裸鼠体内接种成瘤实验，鉴定各亚群细胞体内增殖能力；通过ABC法检测成瘤组织和PANC-1细胞株中CD44和CD24的表达。结果:PANC-1细胞系中CD44+和CD24+ 的表达分别为5.1%～17.5%和21.8%～70.1%，CD44+CD24+ 的表达为0.9%～3.5%；与CD44-CD24-亚群比较，CD44+CD24+ 亚群生长缓慢，第7天才出现指数生长的趋势，增殖能力较低，倍增时间更长，而前者第5天已出现指数生长的趋势。裸鼠皮下植入5×103个CD44+ CD24+亚群细胞，4周即可见明显的新生肿瘤块(2/8)，而植入1×105个D44-CD24-亚群细胞，12周也难形成种植瘤。前者体外成瘤能力比后者至少强20～50倍（P<0.05或P<0.01）；所形成的肿瘤和PANC-1细胞系无组织学差异。结论:CD44和CD24可作为分选PANC-1中肿瘤干细胞的表面标志；分选出的CD44+CD24+ 亚群细胞具有肿瘤干细胞的初步特征。     

一氧化氮对急性出血坏死性胰腺炎肝脏中Toll样受体2/4 mRNA表达的影响

目的探讨一氧化氮(NO)对于急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)时肝脏中T o ll样受体2/4(TLR 2/4)mRNA表达的影响。方法采用牛磺胆酸钠(TAC)逆行胰胆管注射制备AHNP肺损伤大鼠模型。动物分为假手术组、胰腺炎组和L精氨酸(L A rg)治疗组。假手术组于术后6 h,胰腺炎组和L A rg组分别于术后3、6、12 h取静脉血和肝组织,测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(A ST)、淀粉酶和肝组织NO,逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法检测不同时间点肝组织肿瘤坏死因子α(TNFα)、TLR 2/4mRNA表达变化。结果与假手术组比较,胰腺炎组大鼠3 h肝组织TLR 2/4 mRNA表达开始增高〔(1.970±0.362)×10-3,(175.000±0.111)×1-0 3比(1.150±0.725)×10-6,(11.450±1.724)×10-4,〕12 h表达达峰值〔(2.940±0.316)×1-0 3,(2 673.000±88.380)×1-0 3,P均<0.01〕;血清淀粉酶ALT、A ST 3 h后即升高,肝损伤加重,肝组织TNFαmRNA表达升高,NO浓度逐渐降低(P<0.05或P<0.01);给予L A rg治疗后,NO浓度升高(P<0.05),TLR 2/4 mRNA表达降低〔3 h:(0.351±0.153)×1-0 3,(135.000±22.310)×1-0 3;6 h:(2.100±0.535)×10-3,(187.000±26.850)×1-0 3;12 h:(2.620±0.208)×1-0 3,(1 959.000±270.000)×10-3;P<0.05或P<0.01〕,血清淀粉酶、ALT、A ST均降低,肝损伤减轻,肝组织TNFαmRNA降低(P<0.05或P<0.01)。结论AHNP时,肝组织内TLR 2/4 mRNA表达上调,肝组织损伤加重;NO可以明显抑制AHNP肝组织TLR 2/4 mRNA的表达。     

胃原发性淋巴瘤

本文对我院1965年～1987年经手术探查,病理检查证实为胃恶性淋巴瘤的14例病例进行回顾性分析.由于本病缺乏典型病史和症状,X线检查表现多样,内镜检查活检深度有限,术前常易误诊,本组误诊率72％,对如何提高诊断率进行了讨论。本病治疗应争取以手术为主的综合治疗。影响术后效果的因素包括病变分期,肿瘤的恶性程度及是否进行化疗及放疗。     

重症急性胰腺炎外科综合治疗的现状与思考

重症急性胰腺炎(SAP)作为一种特殊类型的外科急腹症,自从确立外科在其治疗中的主导地位的近半个世纪以来,大致经历了从早期手术引流、针对胰腺坏死感染手术到针对特殊病例早期手术等三个主要的历史阶段.在我国,自从2000年中华医学会外科学分会胰腺外科学组制定<重症急性胰腺炎诊疗草案>以来[1],已逐渐形成我国SAP综合治疗的个体化方案.现对SAP外科综合治疗的现状以及对若干相关问题的思考阐述如下.     

武汉市高等医科院校附属医院临床医师队伍建设现状分析

通过文献研究、问卷调查和关键知情人深度访谈,分析武汉市4所高等医科院校附属医院临床医师队伍建设现状,发现临床医师队伍总体结构不尽合理;“近亲繁殖”现象较严重;“医师博士化”造成高职低就,组织中的上升空间受限;各职称临床医师的工作满意度之间差异较大等问题。提出了完善人才引进机制,有效发挥团队的作用,建立有效的人才激励机制等建议。     

胰液端粒酶活性与K-ras检测对胰腺癌的诊断价值

目的　检测胰腺癌和慢性胰腺炎患者胰液中K ras基因突变和端粒酶活性 ,探讨端粒酶活性与K ras基因突变联合检测对胰腺癌患者诊断价值。方法　收集 2 4例胰腺癌和 14例慢性胰腺炎患者胰液 ,K ras基因突变采用聚合酶链反应 -限制性酶切片段长度多态性 ( polymerasechianreaction -restrictionfragmentlengthpolymorphism ,PCR -RFLP)检测 ,端粒酶活性检测采用端粒末端重复序列扩增技术 (telomericrepeatamplificationprotocol ,TRAP)。 结果　胰腺癌中K ras基因突变率为 87.5 % ( 2 1/2 4) ,慢性胰腺炎中K ras基因突变率仅为 2 1.3 % ( 3 /14 ) ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ;在 2 4例胰腺癌中端粒酶阳性检出率为 83 .3 % ( 2 0 /2 4) ;而 14例慢性胰腺炎胰液中端粒酶阳性检出率为 2 8.6% ( 4 /2 4) ,差异同样具有显著性 (P <0 .0 1)。K ras基因突变与端粒酶活性检测诊断胰腺癌的特敏感性分别为 87.5 % ,83 .3 % ;两者联合检测诊断胰腺癌的敏感性为 85 .5 % ,特异性达到 85 .7%。结论　联合检测胰液中K ras基因与端粒酶活性可提高胰腺癌诊断的敏感性和特异性 ,对胰腺癌筛查、诊断与鉴别诊断有一定临床意义     

顺序特异性引物法检测人胰腺癌细胞株PCNA-1的K-ras基因点突变的方式

胰腺癌具有发病隐匿，症状不典型，病情发展快，生物恶性程度高，预后差等特点。胰腺癌的切除率一般只在20％左右，五年生存率低于5％。本研究旨在采用顺序特异性引物法（SSP）对胰腺癌细胞株的K-ras基因点突变方式。