脑出血不同时机灶周细胞凋亡的研究

目的观察不同时间点血肿周围的细胞凋亡性改变程度。方法以乳猪自体血脑叶出血为模型,获取不同时间点的血肿周围脑组织,用原位杂交和TUNEL试剂盒检测灶周细胞的Bax基因的转录和细胞凋亡程度。结果Bax阳性细胞数于24h达高峰,3h与6h间差异无显著性意义(P=0．986);细胞的吸光度3h与6h、12h间差异均无显著性意义(P＞0．05),24h与3h、6h、12h间差异均有显著性意义(P＜0．05)。凋亡阳性细胞计数24h达高峰(P<0．001),3h与6h之间差异无显著性意义(P=0．999);凋亡阳性细胞面积3h与6h组间和12h、24h、48h间差异均无显著性意义(P＞0．05)。结论脑出血急性期灶周继发性神经元凋亡在3～6h内较轻,在24～48h明显加重,为减轻细胞凋亡,宜尽早采取有效的干预措施。     

人淀粉样前体蛋白基因与绿色荧光蛋白融合基因筛选系统的建立

目的 构建携带人淀粉样前体蛋白（APP）的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）载体。以利于初步筛选对APP mRNA水平作用的药物。方法 将pEGFP质粒和携带野生型APP695亚型的pXCJL经Hind Ⅲ酶切，连接．PCR初筛，酶切鉴定。进一步经测序证实。携带野生型人类APP751亚型cDNA的pCDNA3．1质粒用XbaⅠ酶切．Klenow酶填平．再用HindⅢ酶切．回收APP751片段；质粒EGFP用SmaⅠ和Hind Ⅲ酶切。将目的基因APP751片段与EGFP载体片段连接生成重组质粒．酶切鉴定．测序证实。构建好的重组质粒转染COS-7细胞．观察EGFP的表达情况。结果 APP695和APP751重组质粒上的EGFP在COS-7细胞内得以表达。结论 构建的APP—EGFP融合基因重组质粒．有助于方便、快速地初筛出作用于APP mRNA水平的药物。     

饥饿状态引起大鼠海马细胞DNA损伤

目的研究饥饿状态对海马细胞DNA的损伤。方法分别运用单细胞电泳(彗星实验)和缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞核DNA单链及双链损伤,半胱天冬酶3(caspase3)活性片段免疫组化检测海马细胞caspase-3激活;结合神经元尼(氏)体染色和苏木素伊红(HE)染色了解海马神经元形态和数目变化。结果经受饥饿状态1周的动物可见海马细胞DNA单链损伤,海马各区caspase-3活性片段免疫反应阴性,但TUNEL法检测到一种具非典型凋亡特征的阳性显色;经受饥饿状态2个月的动物,DNA单链损伤持续存在,海马CA1区caspase-3活性片段免疫组化见广泛细胞浆阳性表达,海马其他区域仅有零星阳性细胞,但TUNEL检测无阳性细胞。神经元尼(氏)体染色示,饥饿状态1周和2个月海马神经元部分尼(氏)体溶解消失。HE染色示,经受饥饿状态1周和2个月的动物,海马CA1区锥体层细胞数减少(P<0.05)。结论饥饿状态可造成大白鼠海马细胞染色体DNA损伤及部分细胞死亡。     

脑出血后白细胞浸润与血小板CD62p、CD42b表达关系的临床研究

目的 研究脑出血患者血肿周围脑组织的白细胞浸润及其与血小板CD62p、CD42b表达的关系。方法 37例行微创手术的脑出血患者，手术前用流式细胞术(FCM)检测血小板CD62p、CD42b的表达，手术过程中取引流出的血肿周围脑组织进行HE染色，观察白细胞浸润，并对两者进行相关性分析。结果 脑出血后4h，血肿周围已出现白细胞浸润，脑出血后48—72h白细胞浸润达到高峰；白细胞浸润与血小板CD62p的表达呈正相关性(rCD62p＝0．74，P＜0．01)，与血小板CD42b的表达呈负相关性(rCD42b＝-0．51，P＜0．01)。结论 脑出血后血小板活化，活化的血小板可能参与了血肿周围的白细胞浸润。     

急性期脑出血灶周水肿的磁共振弥散加权成像临床初步研究

目的应用磁共振弥散加权成像(DWI)探讨急性期脑出血血肿周围水肿性质及形成机制。方法对满足检查条件的连续发病2周内的44例脑出血患者进行DWI成像,测量血肿周围1cm区域和水肿区表观弥散系数(ADC)的变化情况,对水肿区相对ADC与水肿体积做相关分析。结果44例脑出血患者血肿周围均存在水肿,40例患者血肿周围ADC升高,水肿区ADC较对侧对称区域升高58．6%差异有非常显著性意义(P＜0．001),血肿周围1 cm区域较对侧对称区域ADC升高24．1%;水肿区相对ADC与绝对水肿体积和相对水肿体积呈正相关(P=0．003)。另4例患者血肿周围水肿区ADC降低。结论急性期大部分血肿周围水肿ADC升高,血管源性水肿是其主要的发生机制;少数患者血肿周围水肿ADC下降,提示细胞毒性水肿占主导地位,患者病情多危重,预后不良。     

对比研究经颈动脉和立体定位注射骨髓间充质干细胞治疗缺血性脑卒中

目的探讨安全高效移植骨髓间充质干细胞(mensenchymal stem cells,MSCs)治疗脑缺血的方法.方法采用连续传代培养的方法纯化MSCs,Brdu标记后分别经颈动脉(1×104/μl,200 μl)和立体定位(1×105/μl,10 μl)注射至大鼠脑缺血2 h再灌注1 d模型,各自设立对照组,观察术后神经功能评分以及脑部Brdu阳性细胞的分布.结果经颈动脉注射组较立体定位注射组爬杆实验评分低(P＜0.05),Brdu阳性细胞存活多,迁移范围更广.结论 MSCs具有卒中后脑保护作用,而经颈动脉的给药方式优于立体定位注射.     

血管性痴呆的实验研究

血管性痴呆 (vasculardementia,VD)是因脑血管疾病所致的智能及认知功能障碍的临床综合征。随着世界人口老龄化 ,脑血管病的发病率逐年升高 ,并发血管性痴呆也随之升高。VD不仅严重损害患者健康 ,影响患者的生命质量 ,也给社会和家庭带来沉重的负担 ,引起了世界各国的普遍关注。它是老年医学领域中的一个重要课题。因此近年来关于血管性痴呆的实验研究日渐增多 ,并取得了一定的成绩。但由于造模方法不同如双侧颈总动脉结扎 (2VO)、4血管结扎 (4VO)、缺血再灌注、卒中倾向高血压大鼠 (stroke pronesponta neouslyhyertensiverats,SHRSP…     

高效液相色谱-库仑电化学检测法对多种脂溶性维生素及营养物质的分析

[目的]建立快速分析多种脂溶性维生素及营养物质的检测方法，准确分析多种脂溶性维生素及营养物质的水平。[方法]采用美国ESA公司的高效液相色谱—库仑电化学检测器(HPLC—CoulArray Detector)及天津医科大学和天津大学共同研制的血清脂溶性维生素提取试剂盒。[结果]对多种脂溶性维生素A(视黄醇)、维生素D2(麦角钙化醇)、维生素D3(胆钙化醇)、维生素E(α—生育酚和γ—生育酚)、维生素K1(叶绿醌)、类胡萝卜素(α—胡萝卜素和β—胡萝卜素)、类维生素A(维生素A棕榈酸盐)、生育酚乙酸酯和营养物质辅酶Q10(泛醌)进行同时检测。[结论]多通道EC—HPLC检测脂溶性维生素，因其操作简便，灵敏度高，准确性强，可作为临床对脂溶性维生素分析的可靠方法。     

神经元的凋亡和生存与神经疾病

神经元的凋亡和生存与神经疾病李震中，张苏明，白欣立综述阮旭中校近年国外有关文献认为神经元死亡中除细胞坏死以外，还存在另一种细胞死亡形式──凋亡或细胞程序性死亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ＰｒｏｇｒａｍｍｅｄＣｅｌｌＤｅａｔｈ，ＰＣＤ），即在某些生理或病理性...     

脑缺血半暗带病理损伤机制的研究进展

随着局灶性脑缺血损伤机制研究的不断深入,近年来对脑缺血半暗带的病理生理意义有了进一步的认识,其特殊的临床意义已使其成为脑缺血研究的一个焦点.本资料就缺血半暗带的病理损伤机制等方面进行综述.