STR-PCR和FISH在监测异性别异基因造血干细胞移植后嵌合状态中意义的比较

本研究比较短串联重复序列PCR（STR—PCR）和荧光原位杂交（FISH）两种方法在异基因造血干细胞移植后血细胞嵌合状态监测中的意义。对38例接受异性别异基因造血干细胞移植的患者,采用STR—PCR和FISH定量测定移植后14、28天和3个月的骨髓或外周血细胞嵌合状态。结果表明,14天时STR—PCR和FISH同时检测的30例中分别有14例和8例达到完全嵌合（CC,P〉0．05）。28天时两者同时检测的31例中分别有26例和15例达到CC（P〈0．01）。3个月时两种方法共同监测的24例中分别有22例和17例达到CC（P〉0．05）。连续监测3个月以上的28例患者中14倒发生移植物被排斥或复发,其中9例由FISH首先检出（P〈0．05）。结论：FISH检测比STR—PCR更为准确地反映移植早期造血细胞嵌合状态,有助于监测移植物被排斥和疾病复发。     

骨髓增生异常综合征异常克隆与细胞形态的关系

尽管细胞遗传学异常逐渐成为骨髓增生异常综合征(MDS)诊断、分型、预后判断的要素之一,血细胞发育异常的细胞形态学改变仍然是诊断MDS的一个必要条件,无论是FAB分型还是WHO分型都是在细胞形态学的基础上进行的[1].MDS的细胞遗传学、分子生物学特征已日益清晰,但是MDS异常克隆与造血细胞形态改变的关系仍不清楚.我们应用标尺定位Wright-Giemsa染色的骨髓细胞涂片,通过荧光原位杂交(FISH)技术,探讨MDS异常克隆与细胞形态(病态造血细胞与非病态造血细胞)的关系.     

免疫性血小板减少性紫癜发病机制的研究进展

免疫性血小板减少性紫癜（ITP）是机体免疫系统异常致使血小板破坏过多、生成减少,导致外周血中血小板减少的出血性疾病。近几年来研究结果表明ITP是一种异质性疾病,体液免疫、细胞免疫异常及血小板生成障碍共同参与其发病过程。     

基于UDI实现医疗器械供应链全程追溯管理

目的 基于医疗器械唯一标识(Unique Device Identification,UDI)及信息化技术对医疗器械产品供应链上的全链条数据通查通识,以加强医疗器械全生命周期管理,实现医疗器械供应链的全程追溯,保证民众用械安全.方法 试点选取覆盖高值耗材、低值耗材、体外诊断试剂、骨科耗材的产品线,应用医疗器械全程追溯信...     

流式细胞术分析户尘螨致敏的嗜碱性粒细胞活化试验及其临床意义

目的建立流式细胞术（FCM）分析嗜碱性粒细胞活化试验（BAT）的方法并评估其在过敏性疾病诊断中的意义。方法以CD63/CD203c/CD45抗体组合,建立用FCM分析户尘螨致敏的嗜碱性粒细胞脱颗粒的方法。以皮肤点刺试验（SPT）作为金标准方法,将FCM检测活化嗜碱性粒细胞与荧光酶联免疫吸附试验（FELISA）测定特异性IgE（sIgE）结果作比较,分析其临床应用价值。结果以CD45和CD203c联合设门,可以得到纯的嗜碱性粒细胞;CD63是活化嗜碱性粒细胞的最佳标志;Spearman相关系数显示,sIgE的Unicap分级与活化嗜碱性粒细胞呈中度相关;FCM检测活化嗜碱性粒细胞与FELISA测定sIgE结果在户尘螨过敏性疾病诊断中的差异无统计学意义（P〉0.05）,但前者的敏感度、符合率、阳性预测值以及阳性似然比各项指标都优于后者。结论通过FCM分析CD63的表达来确定活化嗜碱性粒细胞是诊断速发型超敏反应的一种有效、安全的体外检测方法。     

成人骨髓间充质干细胞的鉴定与体外BrdU标记

背景:目前尚未发现骨髓间充质干细胞独有的标志分子,给其鉴定带来一定困难.BrdU标记不存在放射性污染,有研究认为在不受到紫外线照射的条件下,BrdU标记后对细胞功能无损害.目的:探讨成人骨髓间充质干细胞体外鉴定和标记的方法,并观察其生物学特性.设计、时间及地点:细胞观察,于2007-06/12在解放军兰州军区兰州总医院完成.材料:成人骨髓来自5例健康志愿者.BrdU为美国Sigma公司产品.方法:采集成人骨髓10mL,密度梯度法分离单个核细胞,加入含10%胎牛血清的DMEM培养基,调整细胞密度为2×108L-1进行扩增培养.取第3代骨髓间充质干细胞,加入成骨诱导培养基,行碱性磷酸酶染色;加入成脂诱导培养基,行油红O染色;加入终浓度为5,10,15μmol/L BrdU溶液,孵育12,24,48,72,96h后行免疫细胞化学染色.主要观察指标:倒置光学显微镜下观察细胞生长及增殖情况,流式细胞仪鉴定细胞表型,成骨及成脂诱导分化结果.BrdU阳性标记率及标记后细胞生长情况.结果:[1]体外培养的成人骨髓间充质干细胞形态均一,为梭形或纺锤形的成纤维细胞样外观;表达CD44和CD71,不表达CD34和HLA-DR;可定向诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞.[2]大部分骨髓间充质干细胞标记后核抗BrdU染色阳性,随着标记浓度的升高和标记时间的延长,BrdU阳性率逐渐增高,终浓度10μmol/L BrdU标记72h后阳性率达90%以上,且连续传9代均可检测到BrdU阳性细胞.第3代骨髓间充质干细胞90%处于G0/G1期,BrdU标记后88.62%处于G0/G1期,标记前后细胞生长周期无明显变化.结论:通过形态学特征、表面标记和多向分化潜能可以鉴定体外分离培养的细胞为成人骨髓间充质干细胞;BrdU标记可用于成人骨髓间充质干细胞移植入体内后存活、生长和分化的动态示踪观察;BrdU最佳标记浓度和时间分别为10μmol/L和72h.     

幼淋巴细胞白血病并发颅内出血一例并文献复习

1 病例资料 女,56岁.因头晕、胸闷、全身酸困不适1个月入院,既往无特殊病史.查体:全身浅表淋巴结未触及肿大,心肺阴性,脾大,肋缘下2横指.血常规示:白细胞120×109/L,原始淋巴细胞0.598,成熟淋巴细胞0.373,血红蛋白116 g/L,血小板60×109/L;骨髓细胞学检查示:原始淋巴细胞0.065,幼稚淋巴细胞0.655,成熟淋巴细胞0.135,原幼淋巴细胞大小不等,以大细胞为主,胞浆量较丰富,呈灰蓝色,可见空泡,细胞核染色质较均匀,可见凹陷与折叠.     

内脂素、YKL-40在2型糖尿病中的炎症作用

众所周知2型糖尿病(T2DM)的发病机制与多种因素有关,近年来提出了T2DM是一种自然免疫和低度炎症性疾病的观点[1],其可能是由细胞因子介导的炎症反应,是一种先天的免疫性疾病,炎症在T2DM的发病机制中起媒介作用,T2DM和慢性亚临床炎症状态有很强的关联性.越来越多的证据证明炎症在胰岛素抵抗(IR)和胰岛B细胞损伤的发生过程中起至关重要的作用,这种由细胞因子介导的急性时相反应属先天性免疫反应,是一种慢性亚临床非特异性免疫介导的炎症,包括非特异性的炎症细胞、炎症细胞分泌的炎症因子和肝脏产生的急性反应物质,后两者常被称为炎症标志物.氧化应激与炎症交互影响,通过转录水平调控,并通过多种信号机制损害胰岛素的信号转导,导致糖尿病的发生.     

免疫性血小板减少性紫癜的免疫学发病机制

近年ITP发病机制的研究扩展到细胞免疫及血小板生成障碍等方面。细胞免疫及抗血小板抗体介导巨核细胞质量异常在ITP的发病机制中亦发挥重要作用。目前认为体液免疫、细胞免疫异常及血小板生成障碍参与了ITP的发病过程。