IL-1β、TNF-α对大鼠肝星状细胞MMP13基因表达的调节

为了解白介素－1β（IL-1β）,肿瘤坏死因子α（TNF－α）对大鼠肝星状细胞间质胶原酶（MMP13）基因表达的影响,在培养的肝星状细胞系中加入IL－1β、TNF-α于不同的时间点收集细胞,提取总RNA,用逆转录定量PCR方法测定MMP13的基因表达水平。结果表明,IL－1β组肝星状细胞MMP13基因表达水平在8,24,48h三个时间点均明显高于对照组,24h达高峰,为对照组的3倍;TNF－α组肝星状细胞MMP13的基因表达水平在8,24,48,72h均明显高于对照组,48h达高峰,为对照组的4倍。上述结果提示IL－1β、TNF-α可增强肝星状细胞MMP13基因的表达。     

芪参活血颗粒对CLP大鼠血清内毒素及脾脏TH1/TH2表达的影响

目的:本实验主要研究脓毒症大鼠血清内毒素水平及脾脏TH1/TH2表达变化以及芪参活血颗粒对二者影响的研究。方法:采用盲肠结扎穿孔(CLP)的方法造成脓毒症模型,造模成功后随机分组,造模后3、24、72h腹腔静脉取血。采用基质显色法检测血清中内毒素含量,采用FACS流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞TH1/TH2的表达。结果:结果表明脓毒症大鼠血清内毒素水平明显升高,芪参活血颗粒能明显降低血清内毒素水平,脓毒症大鼠早期TH1/TH2明显升高,后期明显下降,芪参活血颗粒能明显降低早期TH1/TH2的比值,升高晚期脾淋巴细胞TH1/TH2表达。使促炎与抗炎达到平衡。结论:芪参活血颗粒能减低脓毒症血清内毒素水平,调节TH1/TH2比值,是很好的免疫调节剂。     

高频喷射通气在低氧血症治疗中的应用——附42例病例分析

目的：在于总结分析内科急性感染并发低氧血症时,应用高频通气（HFJV）治疗的情况。方法：为通过对42例重症感染伴有低氧血症病例的临床资料的分析。结果：为其中30例（71％）取得了良好的效果。结论：高频通气治疗可有效的提高血氧分压,且操作简单,无创伤,对部分病人可免做气管切开,值得推广应用于低氧血症的治疗。     

以腺相关病毒为载体的小干扰RNA对肝星状细胞中金属蛋白酶组织抑制因子的抑制作用

目的 观察以腺相关病毒（AAV）为载体含有针对大鼠金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-1具有较强抑制作用的小干扰RNA（siRNA）感染大鼠星状细胞系HSC-T6后TIMP-1的表达抑制作用。方法 针对大鼠TIMP-1mRNA基因序列挑选一段22bp片段，在体外构建为短发夹siRNA（short hairpin siRNA，shRNA）表达载体后，将其包装为重组AAV并感染大鼠肝星状细胞系HSC-T6后，于感染后30d及90d应用荧光定量PCR方法及Westem blot方法分别检测TIMP-1 mRNA及蛋白质表达情况，同时通过PCR技术以感染后细胞的基因组DNA为模板扩增外源基因验证其长效表达。结果 经PCR、酶切及序列测定证实含有siRNA-TIMP-1基因的重组AAV载体质粒已成功克隆。将重组质粒包装成病毒后感染HSC-T6细胞，与对照组细胞相比，感染后30d及90d细胞TIMP-1 mRNA水平明显降低（P〈0．01），感染后30d TIMP-1蛋白表达水平较对照组细胞相比下降约60％，而感染后90d，TIMP-1蛋白表达几乎下降90％。PCR结果显示在重组病毒感染后90d细胞基因组DNA中仍可扩增出外源基因，证实外源基因可长期表达。结论 重组病毒rAAV／siRNA-TIMP-1／neo可长期有效地抑制TIMP-1基因的表达。     

Fas介导的肝脏实质细胞和非实质细胞的凋亡

细胞凋亡是近年医学研究的热点,已经证明它在人类多种组织存在并与许多疾病有关.对肝脏凋亡的研究发现在肝脏主要的细胞中,包括肝细胞、枯否细胞、内皮细胞和星状细胞等,由Fas途径介导的凋亡占非常重要的地位.加强对它的研究对于暴发性肝衰竭、病毒性肝炎、肝硬化、自身免疫性肝病以及肝脏肿瘤的发病机制和治疗有很大意义.     

缬沙坦抗大鼠肝纤维化疗效及机制的研究

目的 研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体拮抗剂缬沙坦对大鼠肝纤维化模型的疗效及机制。 方法 制备二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化模型,同时缬沙坦灌胃20 mg·kg1·d1.共8周,肝组织进行常规HE及Masson三色染色。AngⅡ水平采用放射免疫法测定。大鼠肝组织Ⅰ型胶原(colⅠ)及金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)mRNA的水平以逆转录多聚酶链反应方法检测。 结果 缬沙坦可明显改善大鼠肝纤维化的程度。模型组肝组织AngⅡ水平(Pg/0.2g肝重)、col-Ⅰ和TIMP1 mRNA水平分别为186.0±80.7、0.827±0.094和0.924±0.110,缬沙坦组分别为62.6±7.7、0.587±0.037和0.541±0.026,缬沙坦可降低肝脏AngⅡ的水平及Col-Ⅰ和TIMP1 mRNA的水平,F值分别为19.420、31.897和29.622,P值均<0.01。 结论 缬沙坦具有良好的抗肝纤维化作用,可能为治疗肝纤维化和早期肝硬化提供一新的方法。     

肝脏纤维化程度的超声二维图像诊断研究

根据超声二维图像在肝纤维化（或肝硬化）时的各种特异性改变，与１９９５年５月中华传染病寄生虫病会议制定的肝脏纤维化程度的病理分期标准［１］比较，综合评价其对肝纤维化或肝硬化特别是早期肝硬化的诊断能力，以期为临床诊断提供客观的半定量指标。资料与方法１研...     

血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA在胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型的表达及复方861的干预作用

研究胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型血管紧张素Ⅱ 1型 (AT1)受体mRNA表达以及复方 86 1的治疗作用。给雌性Wistar大鼠进行胆管内逆行性注入硬化剂加胆管结扎导致胆管阻塞 ,制备胆管阻塞性肝纤维化模型。术后随机分为模型组和复方 86 1治疗组 (9g/kg)。并设假手术组作为正常对照组。治疗组于术后 7天开始给予复方 86 1灌胃 ,共 4 9天。以RT -PCR法观察肝纤维化模型肝组织AT1受体mRNA表达水平及复方 86 1的干预作用。胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型组AT1受体mRNA为 1 0 38± 0 0 6 4 ,明显高于正常对照组 (0 6 88± 0 0 5 7,P <0 0 1) ;复方86 1组的AT1受体mRNA为 0 70 5± 0 14 2 ,明显低于模型对照组 (P <0 0 1)。胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型AT1受体mRNA明显增高 ,提示AT1受体可能参与肝纤维化形成 ,而复方 86 1可使它表达减少。     

丁酸钠诱导体外培养的大鼠肝卵圆细胞分化为成熟肝细胞

目的探讨分化刺激剂丁酸钠对体外培养的大鼠肝卵圆细胞分化的影响。方法从喂养含0．1%乙硫氨酸的胆碱缺乏性饮食4～6周的人鼠肝脏中分离出盱卵圆细胞,用免疫细胞化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法对其进行鉴定。用0．75mmol/L酸钠处理大鼠肝卵圆细咆后．姬姆萨染色观察细胞表型改变,western blot检测细胞白蛋白的表达水平。结果免疫细胞化学结果显示分离出的细胞既表达成熟肝细咆的标志物白蛋白,也表达胆管细胞的标志物细胞角蛋白19,RT-PCR结果显示这些细胞还表达干细胞的标志物c-kit,但不表达造血干细胞的标志物CD34,表明这些细胞是大鼠肝前体细胞——肝卵圆细胞。0．75mmol/L丁酸钠能诱导大鼠肝卵圆细胞出现明显的表型改变,细胞变大,变圆,核浆比减小,且双核细胞数增多,约占总细胞数的50%左右,同时western blot的结果显示0．75mmol/L丁酸钠能够提高大鼠肝卵圆细胞白蛋白的表达水平。。结论分化刺激剂丁酸钠能诱导体外培养的大鼠肝卵圆细胞向成熟肝细胞分化。     

超声积分法对肝硬化的早期诊断

探讨早期肝硬化的影像学特征。102例慢性肝炎患者行B超、CT检查及肝穿刺活组织病理学检查，将超声、CT图象特征同病理组织学标准进行对照分析。随纤维化分期的加重，综合肝实质回声、肝表面、肝脏边缘、肝静脉、脾脏面积等5项参数的超声总积分值逐渐升高。以超声总积分大于l0分为界值，诊断肝硬化的敏感性为86．1％，特异性为95．5％。肝脏CT图象的形态学观察诊断肝硬化患者的特异性为100％，敏感性为48．5％。综合多项超声参数而成的超声总积分对诊断早期肝硬化有较高的敏感性和特异性。CT诊断早期肝硬化虽然特异性较高,但敏感性较低.