带有HBV基因的腺相关病毒为载体的重组病毒感染树突状细胞的研究

目的探讨腺相关病毒（Adeno-associated virus，AAV）为载体的含有HBV—S、C或X基因的重组病毒（rAAV—HBV—S，C，X）感染正常人树突状细胞的效率。方法分别构建含有HBV-S、C和x基因的从v质粒，在293细胞中包装成重组病毒，测定病毒滴度。从正常人外周血中分离出单核细胞进行体外培养，在培养的第1天分别用rAAV—HBV—S、C、X和作为对照的293细胞裂解液感染刺激单核细胞，感染后的单核细胞在GM-CSF、IL-4和TNF-α作用下继续培养7d获得成熟的树突状细胞。用RT-PCR及流式细胞仪细胞内染色检测HBV基因的RNA和蛋白的表达。结果重组rAAV—HBV—S、C、X的病毒滴度可以达到10^7拷贝／ml，用重组病毒分别感染树突状细胞。与对照组相比，感染的树突状细胞可表达相应的HBV基因RNA，流式细胞仪检测显示约90％的树突状细胞有相应HBV蛋白的表达。结论rAAV-HBV可有效感染树突状细胞，提示可以通过该途径刺激树突状细胞提呈抗原。     

以腺相关病毒为载体的小干扰RNA对肝星状细胞中金属蛋白酶组织抑制因子的抑制作用

目的 观察以腺相关病毒（AAV）为载体含有针对大鼠金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-1具有较强抑制作用的小干扰RNA（siRNA）感染大鼠星状细胞系HSC-T6后TIMP-1的表达抑制作用。方法 针对大鼠TIMP-1mRNA基因序列挑选一段22bp片段，在体外构建为短发夹siRNA（short hairpin siRNA，shRNA）表达载体后，将其包装为重组AAV并感染大鼠肝星状细胞系HSC-T6后，于感染后30d及90d应用荧光定量PCR方法及Westem blot方法分别检测TIMP-1 mRNA及蛋白质表达情况，同时通过PCR技术以感染后细胞的基因组DNA为模板扩增外源基因验证其长效表达。结果 经PCR、酶切及序列测定证实含有siRNA-TIMP-1基因的重组AAV载体质粒已成功克隆。将重组质粒包装成病毒后感染HSC-T6细胞，与对照组细胞相比，感染后30d及90d细胞TIMP-1 mRNA水平明显降低（P〈0．01），感染后30d TIMP-1蛋白表达水平较对照组细胞相比下降约60％，而感染后90d，TIMP-1蛋白表达几乎下降90％。PCR结果显示在重组病毒感染后90d细胞基因组DNA中仍可扩增出外源基因，证实外源基因可长期表达。结论 重组病毒rAAV／siRNA-TIMP-1／neo可长期有效地抑制TIMP-1基因的表达。     

血清促炎、抗炎因子在急性感染患者中的动态变化及中药干预的影响

目的 :了解促炎、抗炎细胞因子在急性感染患者中的动态变化 ,并探讨中药 912液的治疗作用。方法 :采用鲎试剂基质偶氮显色定量法及酶联免疫吸附法 ,对 4 0例急性感染患者 (随机分为两组 ,普通治疗组 2 0例 ,中药 912液加普通治疗组 2 0例 )测定治疗前后血浆内毒素、血清促炎因子 (TNFα、IL 6)、抗炎因子 (sTNF RI、IL 4、IL 10 )的水平。结果 :急性感染患者早期即出现内毒素血症 ,促炎因子 (TNFα、IL 6)及抗炎因子 (sTNF RI、IL 4、IL 10 )均呈现不同程度的升高 ,两者水平变化基本平行 ,尤以IL 6、sTNF RI、IL 4、IL 10明显 ;TNFα、IL 6、sTNF RI与APACHEⅢ评分呈明显正相关。经治疗随病情好转 ,内毒素及炎症介质呈现不同程度的下降 ,而中药 912液加普通治疗组内毒素及TNFα、IL 6、IL 10下降幅度显著 ,优于普通治疗组 (P <0 0 5)。结论 :内毒素、促炎因子及抗炎因子在急性感染中起重要作用 ,可作为评估感染性疾病病情严重程度的指标 ,中药 912液使内毒素、TNFα、IL 6、IL 10水平下降 ,抑制sTNF RI下降 ,促进疾病恢复     

百草柔肝胶囊逆转肝纤维化和早期肝硬化的临床研究

目的：观察百草柔肝胶囊对慢性乙型肝炎肝纤维化及早期肝硬化的治疗效果。方法：用百草柔肝胶囊治疗慢性乙型肝炎患者４２例及早期肝硬化患者１０例，疗程０．５年。治疗前、中、后分别采血进行血清化生化检测、肝纤维化指标检测呼治疗前后肝组织活检。结果：临床症状改善率达７５．０￣９１．７％，ＡＬＴ复常率达６８．８％。血清纤维化指标透明质酸、Ⅳ型胶原、层连蛋白值随病程延长明显下降。肝脏病理组织学炎症计分由治疗前的     

高频喷射通气在低氧血症治疗中的应用——附42例病例分析

目的：在于总结分析内科急性感染并发低氧血症时,应用高频通气（HFJV）治疗的情况。方法：为通过对42例重症感染伴有低氧血症病例的临床资料的分析。结果：为其中30例（71％）取得了良好的效果。结论：高频通气治疗可有效的提高血氧分压,且操作简单,无创伤,对部分病人可免做气管切开,值得推广应用于低氧血症的治疗。     

脓毒性休克患者的病死率和危险因素研究

目的探讨三级甲等医院的ICU脓毒性休克患者的病死率及死亡危险因素。方法采用多中心、前瞻性临床研究的方法，对2003-2005年333例脓毒性休克患者的临床资料，应用卡方自动交互检测对其死亡危险因素进行统计学分析。结果脓毒性休克病死率高达73．3％。其中男性155／211例（73．5％），女性89／122例（73．0％）。死亡组的年龄、APACHEⅡ评分、收缩压、舒张压、平均动脉压和24小时尿量与存活组有显著差异。随着功能障碍器官数目的增加，病死率逐渐升高。平均动脉压〈45mmHg者预计死亡概率高，〉60mmHg死亡概率降低。结论脓毒性休克患者平均动脉压是影响预后的重要指标，应用多巴胺的基础上应用多巴酚丁胺或去甲肾上腺素对患者的预后无影响。     

肝移植治疗原发性胆汁性肝硬化的远期效果观察

目的 观察肝移植治疗原发性胆汁性肝硬化(PBC)的远期效果.方法 对15例接受了肝移植的终末期PBC患者进行长期随访,中位随访时间为70个月(38～86个月),记录并总结随访期间患者的相关资料,分析肝移植术后患者的预后、新发疾病以及术后远期存活率.结果 15例PBC患者共接受原位肝移植16例次,其中1例因原发性移植肝无功能进行了2次肝移植.术后患者均采用环孢素A(或他克莫司)+霉酚酸酯+激素的三联免疫抑制方案,部分患者使用了熊去氧胆酸.术后2周时,患者肝功能指标基本恢复正常,乏力、皮肤瘙痒及黄疸等症状缓解,患者的生存质量明显改善.术后有4例患者出现新发疾病(26.7%),1例为乙型肝炎病毒感染,2例为自身免疫性肝炎,1例为结肠癌,经治疗后2例好转,2例治疗无效死亡.肝移植术后,患者无PBC复发,1、2和5年的存活率分别为100%、100%和86.7%.结论 肝移植可提高终末期PBC患者的生存质量和存活率,但一些少见的新发疾病对患者的远期存活率影响较大.     

α—干扰素的不良反应

干扰素 (ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ,ＩＦＮ )是细胞对病毒感染和各种合成及生物诱生作用反应而分泌的一类蛋白质 ,具有抗病毒、抗增殖、诱导分化及调节免疫等作用。按照其分子结构和抗原性的不同 ,可分为α、β、γ等不同型别 ,其中 ,ＩＦＮ -α有许多不良反应 ,其中大部分不良反应为轻度或自限性 ,而 5% - 8%为严重的不良反应 ,需要减量或停药[1] 。现将ＩＦＮ -α的不良反应综述如下 ,以指导临床用药。1　流感样症状应用ＩＦＮ 3个小时后 ,几乎所有的患者都发生流感样症状 ,包括发热、寒战、出汗增多、头痛、肌痛、关节痛、疲乏及恶心、厌食…     

硒力口服液对黄曲霉素B_1诱发实验性大鼠肝癌的作用

本研究应用黄曲霉素B1（AFB1）诱发Wistar大鼠肝癌前病变的短期动物模型，以定量γ-谷氨酸转肽酶（γ－hT）阳性灶为指标，观察了天然有机硒化合物──晒力口服液对AFB1诱癌作用的影响。在两硒预防组中，以硒力6PPm浓度的饮用水自由饮用，分别投药于诱癌之始动阶段及试验全程，作用时间各为4周及8周。结果表明：硒力口服液能明显抑制AFB1诱发的γ-hT变异肝细胞灶和结节数（P<0．001），且以AFB1即全程给药效果优于仅对诱癌始动阶段的阻断，其抑癌效应与投药时间成正比。     

巨细胞病毒感染导致亚急性肝衰竭一例

患者女性,43岁,干部,因“皮肤黄染,乏力,发热3周”于2005年5月30日入院。3周前无明显诱因出现尿色加深,如浓茶样,大便正常,皮肤黄染,乏力,腹胀,厌食油腻,当地医院化验血清转氨酶和胆红素明显升高(见表1)。给予复方甘草酸苷注射液以及白蛋白、新鲜血浆等治疗,乏力、纳差、黄疸等