α1,2-岩藻糖转移酶基因转染增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewis y抗原的表达

目的将人α1,2-岩藻糖基转移酶（α1,2-FT）基因转染卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ并探讨细胞表面Lewisy及其他相关糖脂抗原的变化。方法采用PCR方法克隆人α1,2-FT基因编码区HFUT-H,构建表达载体pcDNA3.1（-）-HFUT-H,利用磷酸钙法将其转染入卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ,建立α1,2-FT基因稳定高表达细胞株RMG-Ⅰ-H。通过酶活性测定证明转染前后细胞系α1,2-FT活性的改变,采用薄层层析、薄层层析免疫染色方法测定转染前后细胞脂质及糖脂,特别是Ⅱ型寡糖的变化。结果基因转染后细胞RMG-Ⅰ-H中H-1抗原及Lewisy抗原显著增加,特别是Lewisy抗原为转染前的20倍;而Ⅰ型糖链Lewisb显著减少。转染前后细胞膜上的主要脂质成分胆固醇和磷脂质的含量没有变化,且中性糖脂质也没有明显变化。结论α1,2-FT基因转染增加α1,2-FT活性的同时,增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewisy抗原的表达;RMG-Ⅰ Lewisy高表达细胞系的建立为研究Lewisy抗原与卵巢癌生物学行为提供了细胞模型。     

脑缺血再灌注损伤后炎症反应与赛来昔布的脑保护作用

目的：细胞间黏附分子1及白细胞浸润参与了脑缺血再灌注损害过程，观察赛来昔布对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的脑梗死体积、脑缺血坏死区周边细胞间黏附分子1和白细胞浸润的影响，探讨其是否具有脑保护作用。方法：实验于2003-12／2004-02在大连医科大学附属第二医院中心实验室进行。SD大鼠36只随机分为3组：赛来昔布组(n=16)、安慰剂组(n=16)及假手术组(n=4)，其中赛来昔布组和安慰剂组按脑缺血再灌注2，4，6，24h分为4个亚组(n=4)。手术前10min赛来昔布组用赛来昔布灌胃(0．25mg／g,以3mL生理盐水溶解)，安慰剂组安慰剂灌胃，剂量相同，然后参照改良的Longa-Zea线栓法制作大脑中动脉闭塞及再通模型，假手术组仅做颈部正中切口暴露右侧颈总动脉后缝合皮肤。观察大鼠大脑中动脉闭塞2h再灌注2，4，6，24h4个时相点梗死体积，缺血区白细胞计数，并应用免疫组织化学法染色观察细胞间黏附分子1阳性微血管数。结果：36只大鼠进入结果分析。①赛来昔布组再灌注后2，4，6，24h的梗死体积明显小于同时段安慰剂组[(4．8l&;#177;0．13)％，(8．22&;#177;0．25)％，(11．83&;#177;0．62)％，(15．93&;#177;0．42)％，(6．56&;#177;2．07)％，(10．12&;#177;2．37)％，(13．53&;#177;1．47)％，(17．86&;#177;2．78)％，P&;lt;0．05]。②假手术组细胞间黏附分子1阳性表达为(0．63&;#177;0．62)个，未见白细胞浸润。脑缺血再灌注后，脑缺血坏死区周边微血管内皮细胞细胞间黏附分子1达及白细胞浸润增多，并于24h达高峰，此时细胞间黏附分子1表达及白细胞浸润赛来昔布组低于同期安慰剂组[(43．00&;#177;1．41)，(6．25&;#177;1．26)，(59．50&;#177;2．25)，(6．75&;#177;1.8)个，P&;lt;0．01]。结论：赛来昔布可缩小脑缺血再灌注后的脑梗死体积，抑制局灶性脑缺血再灌注时炎症反应，非特异性地起到脑保护作用。 黏附分子l；白细胞     

左外耳道耵聍腺腺瘤1例

患者男性 ,33岁。主因外耳道疼痛、流黄色液体、听力下降 1个月并逐渐加重就诊。查体 :左外耳道深部肿物与周边相连 ,1 5ｃｍ× 1 0ｃｍ× 1 0ｃｍ大小 ,表面较光滑 ,无充血 ,可见少量黄色渗出液 ,触痛明显。ＣＴ示左侧外耳道骨性部分可见一软组织密度肿物 ,边界清楚 ,内缘与鼓膜外侧相连。纯音测听 :左耳传导聋。病理检查　巨检 :灰粉色不整形软组织一块 ,大小1 2ｃｍ× 1 0ｃｍ× 0 8ｃｍ ,切面实性 ,质软 ,易碎。镜检 :瘤样增生的耵聍腺 ,腺体大小不等 ,形状不一 ,呈圆形、椭圆形 ,分支状或条索状 ,腺泡内衬柱状或立方状上皮细胞 ,胞浆…     

急性心肌梗死时伴恶心呕吐的临床意义探讨

目的探讨急性心肌梗死(AMI)时伴恶心、呕吐的临床意义。方法选取AMI患者152例,根据是否存在恶心、呕吐症状,分为研究组及对照组,对比分析两组患者的临床资料。结果研究组的TNI、CKMB、BNP测量峰值以及心律失常、心力衰竭、心源性休克发生率和住院死亡率均较对照组高(P<0.05)。结论心源性呕吐是AMI患者梗死面积大、并发症多、病死率高的重要预测指标。     

张庆萍面部围刺法结合体针治疗黄褐斑经验介绍

中医治疗黄褐斑立足整体、着眼于人体脏腑经络、气血阴阳,审证求因、辨证施治。张教授在黄褐斑的治疗上主张辨病和辨证结合,病机围绕肝脾肾三脏,通过面部围刺结合体针调理肝脾肾,调节机体阴阳,平衡全身气血以祛瘀生新。笔者从选穴思路、治疗思路、典型医案3个方面介绍张庆萍教面部围刺法结合体针治疗黄褐斑的经验,可供临证学习参考。     

术中125I粒子植入联合术后化学治疗中晚期食管鳞癌

目的 探讨术中125I粒子植入联合术后化学治疗治疗胸段中晚期食管鳞癌(ESCC)的安全性及疗效.方法 前瞻性队列研究,入组时间为2000年1月至2005年12月.根据ESCC术前CT分期标准,南京医科大学附属南京第一医院肿瘤外科和盐城市肿瘤医院胸外科298例Ⅱ～Ⅲ期胸段ESCC患者通过计算机随机数字法分为术中125I粒子植入联合术后化学治疗组(A组,98例)、术后放射化学治疗组(B组,100例)及单纯根治术组(C组,100例).三组均行食管癌根治术.再根据术后pTNM分期标准,最终实际入组Ⅱb～Ⅲ期胸段ESCC患者233例,三组分别为78例、75例、80例.依据治疗计划系统(TPS)所确定的剂量,A组于术中直视下植入125I粒子.选用0.5 mCi的125I粒子10～22粒,总活度在5～11 mCi,肿瘤匹配周边剂量60～70 Gy,术后通过影像学手段(CT、X线片)行粒子验证和质量评估.观察患者术后并发症,通过CT监测肿瘤影像学、局部复发情况,随访术后1、3、5、10年生存率.结果 A组术后粒子验证无移位、脱落,质量评估满意.A、B、C组局部复发率分别为11.5%、13.3%、38.8%,比较差异有统计学意义(P＜0.05).3组并发症比较差异无统计学意义(P＞0.05).3组1年生存率对比差异无统计学意义(P＞0.05),A、B、C组3、5、10年总体及无进展生存率分别为64.8%,37.7%,25.1%;63.3%,36.9%,24.9%;43.6%,25.0%,12.6%)及63.5%,37.4%,15.1%;62.5%,36.6%,14.4%;42.5%,25.6%,6.2%;3组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 术中125I粒子植入联合术后化疗与术后放化疗治疗中晚期食管鳞癌疗效相当,是简单、安全、有效的方法,可降低局部复发率、延长患者生存期.

Abstract：

Objective To evaluate the safety and efficacy of 125I radioactive seeds implantation combined with postoperative chemotherapy as a treatment option for thoracic advanced esophageal squamous cell carcinoma(ESCC). Methods A prospective cohort study was carried out between 2000and 2005. According to preoperative CT staging criteria,298 patients in phase Ⅱ-Ⅲ of ESCC, who had were admitted to Oncology Center Surgery of Nanjing First Hospital Affiliated to Nanjing Medical University and Thoracic Surgery of YanCheng Oncology Hospital, were randomly divided into three groups: intraoperative 125I seeds implantation combined with postoperative chemotherapy (group A, 98cases), postoperative chemoradiotherapy (group B, 100 cases) and surgery alone (group C, 100cases). All patients received radical resection of esophageal cancer. According to pTNM staging criteria after operation, 233 patients in phase Ⅱb-Ⅲ of ESCC were finally enrolled in the study (78 in group A, 75 in group B, and 80 in group C). With 0. 5 m Ci of single seed, total activity of 5-11 mCi and matched peripheral dose in 60-70 Gy, 10-22 125I seeds were implanted into the target of patients in group A under direct vision in accordance with treatment planning system. The validation and quality assessment of radioactive seeds were demonstrated according to CT scan or X-ray imaging. The postoperative complications were observed. The local recurrence of the cancer was demonstrated using CT scan. The survival rate of patients was followed up for 1-,3-,5- and 10 years. Results The satisfied quality assessment of 125I seeds was observed. There was no displacement or loss of seed. The local recurrence in group A, B and C was 11. 5%, 13. 3% and 38. 8%, respectively, with statistical significance (P ＜ 0. 05). There was no significant difference among three groups with respect to complications and 1-year survival (P＞0. 05). However, the overall survival rate 3-, 5- and 10-years was 64.8%,37. 7% and 25. 1% in group A respectively; 63.3%, 36.9% and 24.9% in group Brespectively; 43. 6i%, 25.0%, and 12.6% in group C, respectively (all P＜0. 05). The 3-,5- and 10-year progression free survival rates were 63.5 %, 37.4 % and 15.1% in group A respectively; 62.5 %,36.6% and 14. 4% in group B respectively; 42.5%, 25.6% and 6.2% in group C respectively (all P＜0. 05). Conclusions It is a safe, effective and simple method for intraoperative 125I seeds implantation combined with postoperative chemotherapy in treatment of advanced ESCC, which may reduce the local recurrence and improve survival rates in patients with ESCC.     

ERCP在腹腔镜胆囊切除术后胆管并发症诊治中的应用

目的探讨内镜逆行胰胆管造影（ERCP）在腹腔镜胆囊切除术（LC）后胆管并发症诊治中的应用价值。方法对96例LC术后胆管并发症者行ERCP检查,并根据检查结果给予相应处理。结果本组ERCP显示,胆管残余结石70例,45例采用括约肌切开术（EST）,25例采用乳头气囊扩张术（EPBD）,结石排出67例;胆总管部分狭窄17例,行胆管扩张和内镜逆行胆管内引流术（ERBD）,术后随访1a狭窄解除12例;胆总管完全横断5例,2例行ERBD,黄疸减退后均行外科胆管空肠Roux—en—Y吻合;胆瘘4例,3例经EST治疗后症状减轻,避免手术,1例症状无改善接受手术治疗。结论对Lc术后胆管并发症者行ERCP,有助于明确病因,并指导相应的治疗。     

微小RNA-223及其标靶基因c-myc在肝癌发病中的作用

目的 探讨微小RNA-223(miR-223)对原癌基因c-myc的调控及其在肝癌发病中的作用.方法 通过实时定量聚合酶链反应和Western blot检测正常肝脏组织、癌旁组织、肝癌组织及肝癌HepG2细胞、胎肝L02细胞中miR-223和c-myc的mRNA和蛋白质表达水平.构建miR-223模拟物(mimics)上调肝癌细胞HepG2中miR-223表达后,实时定量聚合酶链反应和Western blot 检测HepG2细胞中c-myc表达水平的变化.分别用独立样本t检验和单因素方差分析进行两组及多组数据间的比较,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 miR-223在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0.055±0.015、0.030±0.008和0.020±0.016,肝癌组织低于正常肝组织(t=-0.031,P＜0.05).miR-223在HepG2细胞中的表达较L02细胞下调(0.005±0.003比0.011±0.006,t=12.74,P＜0.01).c-myc mRNA在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0.029±0.023、0.136±0.071和0.425±0.026,肝癌组织高于正常肝组织(t=-0.317,P＜0.05);c-myc蛋白在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0.137±O.015、0.299±0.033和0.439±0.027,差异有统计学意义(F=103.35,P＜0.01).miR-223 mimics转染HepG2细胞后,c-myc蛋白在空白组、转染组和阴性对照组的相对表达量分别为0.423±0.041、0.116±0.015和0.432±0.034,转染组较其他两组明显降低(F=94.93,P＜0.05).结论 miR-223在肝癌组织中表达下调,丧失其对c-myc表达的抑制而导致c-myc异常高表达可能是肝癌发生的重要机制.

Abstract：

Objective To investigate the regulatory role of microRNA-223 (miR-223) on c-myc and its role in hepatocarcinogenesis.Method miR-223 and c-myc mRNA expressions in normal tissue,paraneoplastic tissue,liver cancer tissue and liver cancer cells were tested with microRNA microarray and quantitative real-time PCR (qRT-PCR).C-myc protein expression was detected by Western blot.MiR-223mimic was transfected into HepG2 cells and the expression changes of c-myc mRNA and protein were tested with qRT-PCR and Western blot respectively.Results MiR-223 was down-regulated by 61.53% and 30.77% respectively in hepatocellular carcinoma and adjacent tissues as compared to normal liver tissues and the expression of miR-223 was also decreased in HepG2 cell as compared to fetal liver cells L02,whereas the expressions of c-myc mRNA and protein increased in paraneoplastic and HCC tissues compared with normal liver tissues.It prompts that the expressions of miR-223 and c-myc are negatively correlated.No obvious difference found among c-myc mRNA expressions after miR-223 mimics transfection.Conclusions The cmyc abnormal high-expression may play a dynamic role in hepatocarcinogenesis due to the miR-223 downregulation.     

Wntl／β-catenin与食管鳞状细胞癌临床病理及预后的相关性研究

目的探究Wntl／β-catenin信号通路与食管鳞状细胞癌（ESCC）的临床病理及预后凶素的相关性。方法用实时定量PCR（RT-PCR）和免疫组织化学技术分析70例ESCC（包括癌组织与癌旁非癌组织）中Wntl／β-eatenin的表达情况,统计分析其与临床病理及预后的关系。结果癌组织中Wnt1 mRNA水平（1．9934±1．9888 vs 5．0．8863±0．6658,P=0．0000）和蛋白质水平（0．3830±0．0947 vs．0．2721±0．1474,P=0．0000）均较癌旁组织中显著高表达;WntlmRNA表达与病理分期和淋巴结转移及预后相关（P〈0．05）,但蛋白质水平未显示相关。癌组织中β-cateninmRNA水平（0．2854±0．1298w．0．8863±0．6658,P=0．0000）和蛋白质水平（0．2835±0．0844135．0．2352±0．0670,P=0．003）较癌旁组织中显著高表达,B—eateninmR—NA表达与病理分期、淋巴结转移及预后相关（P〈0．05）,但蛋白质水平并未显示相关。在蛋白质水平上,Wntl和β-catenin表达水平兀相关性。结论Wntl／β-catenin在ESCC组织中显著高表达。可能成为判断ESCC分期和预后的重要分子标记物。且Wntl／β-ateninmRNA表达水平与ESCC临床病理分期、淋巴结转移呈逆相关,mRNA的异常表达者预后不佳．但可能不是独立预后因素。     

卵磷脂胆固醇酰基转移酶缺陷症LCATG179R突变的初步研究

 目的 研究1个新近发现的卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)突变型LCATG179R对其编码蛋白正常功能的影响。方法 构建LCAT cDNA野生型和突变型表达载体,通过在HEK293细胞中瞬时表达,测定细胞合成的LCAT的活性,并通过实时定量PCR测定内质网应激相关基因的表达情况。结果 成功构建载体,野生型LCAT酶活力明显高于突变型LCATG179R,且表达突变型LCATG179R的细胞的内质网应激相关基因表达量明显升高。结论 LCAT突变型G179R会导致该酶的活力降低,可能与该突变型蛋白的异常结构有关。携带此种基因突变的患者有患LCAT缺陷症的可能。