人脐带间充质干细胞治疗急性肝功能衰竭大鼠的疗效

目的 探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对急性肝功能衰竭大鼠的治疗效果.方法 腹腔注射D-氨基半乳糖(D-gal)和脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肝功能衰竭.将造模成功的大鼠经腹腔或尾静脉移植hUCMSCs,同时将注射0.9%氯化钠溶液的大鼠作为对照组.在第0、1、2、3、5、7天分别检测ALT、TBil和Alb,第7天处死大鼠,观察其肝脏组织病理学改变.统计学方法采用Fisher确切概率法、非配对t检验和Mann-Whitney U检验.结果 腹腔或尾静脉移植hUCMSCs组大鼠存活率与对照组相比,差异均无统计学意义(Fisher确切概率法,均P=1.00).腹腔移植hUCMSCs组大鼠移植后2 d ALT、TBil、Alb分别为(804.9±88.0)U/L、(17.4±2.7)μmol/L、(20.9±0.8)g/L,对照组分别为(1294.3±171.4)U/L、(32.3±5.5)μmol/L、(16.1±0.9)g/L(t=2.640,P=0.020;r=2.529,P=0.025;t=-3.833,P=0.002).尾静脉移植hUCMNCs组肝功能指标改善情况与腹腔移植组相似.腹腔和尾静脉移植hUCMSCs组肝组织损伤程度比对照组轻(U=4.500,P=0.005;U=4.500,P=0.008),肝细胞分裂相指数也有显著提高(U=4.000,P=0.005;U=5.500,P=0.013).结论 经腹腔或尾静脉移植hUCMSCs均可促进急性肝功能衰竭大鼠ALT、TBil、Alb等指标恢复正常,新生肝细胞增殖活跃,同时明显改善肝组织损伤病理分级.

Abstract：

Objective To study the therapeutic effects of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUCMSCs) on acute liver failure ( ALF) induced by D-galactosamine (D-gal) and lipopolysaccharide (LPS) in rats. Methods The ALF model was obtained through intraperitoneal injection of D-gal(300 mg/kg)and LPS (20μg/kg)in Wister rats. The hUCMSCs were transplanted after intoxication. All rats were divided into four groups, and each group received either hUCMSCs or 0.9% NaCl solution through intraperitoneal or tail-intravenous injection. To evaluate the liver function of each group, the levels of alanine aminotransferase (ALT), total bilirubin (TBil) and serum albumin (Alb) were measured on the day of hUCMSCs transplantation and the following 1, 2, 3, 5 and 7 days. All rats were then sacrificed to examine the liver histology at day 7. Analyses were done by using Fisher's exact test, unpaired t test and Mann-Whitney U test. Results There were no significant differences of survival rates among four groups (Fisher's exact test, both P = 1. 00). The levels of ALT, TBil and Alb in group receiving hUCMSCs intraperitoneally were (804. 9 ± 88. 0) U/L,(17. 4±2. 7) μmol/L and (20. 9±0. 8) g/L, respectively after 2 days of injection, whereas in the corresponding control group, those were (1294. 3± 171. 4) U/L, (32. 3±5. 5) μmol/L and (16. 1±0. 9) g/L, respectively, which indicated that hUCMSCs transplantation significantly improved the liver function (t = 2. 640, P =0.020;t=2.529, P = 0. 025;t= - 3. 833, P = 0. 002). Both of hUCMSCs-transplanted groups showed no significant differences. Liver histological data showed that transplantation of hUSMSCs through either intraperitoneal or tail-intravenous injection alleviated liver damage (U=4. 500, P = 0. 005;U=4. 500, P = 0. 008) and the mitotic index also increased in hUCMSCs-transplanted groups (U=4. 000, P = 0. 005; U=5. 500, P = 0. 013). Conclusions The levels of ALT, TBil and Alb can rapidly normalize in ALF rats after injected with hUCMSCs either intraperitoneally or tail-intravenously. hUCMSCs application raises the mitotic index, enhances hepatocellular regeneration and improves histological status.     

乙型肝炎病毒感染母婴的传播阻断

母婴传播是HBV感染的主要途径,我国30%～50%慢性乙型肝炎患者是通过母婴传播途径感染的[1-2].因此,阻断母婴传播是控制乙型肝炎流行的关键手段.     

“从天而降”的丙肝

病例一:孕前检查,发现丙肝病毒感染小芹夫妻俩结婚三年了,打算要个宝宝,于是便去医院进行孕前捡查。意想不到的是,小芹的体栓报告提示她感染了丙肝病毒。她苦思冥想,一直想不出到底何时、何地、何故被感染。“从天而降”的丙肝对小芹来说确实是一个不幸的消息;但从另一个角度来看,小芽又是“幸运”的,因为她的痼情还没有进展到十分严重的程度。     

慢性乙型肝炎患者HBe系统与HBV DNA前C区基因突变的分析

目的研究HBV DNA前C区基因突变与HBe系统的关系.方法对88例慢性乙型肝炎患者进行HBVDNA基因检测(PCR法)、分子克隆及序列分析.结果88例患者中,血清HBV DNA阴性22例,阳性66例.从阳性患者中检出野生株感染22例,占33.3%;突变株感染44例,占66.7%.44例突变株感染者中38例属1898位点及/或1901位点突变,占86.4%;其他形式突变6例,占13.6%;66例血清HBV DNA阳性中,CHB 49例,LC 17例,突变株感染检出率分别为69.3%、58.8%,两者经统计学处理无显著性差异(P＞0.05).在HBe系统中,HBV DNA阳性患者属HBeAg(+)者44例,其中突变株检出率为75.0%(33/44),属抗HBe(+)者20例,其中突变株检出率为50.0%(10/20),两者经统计学处理有显著性差异(P＜0.05).结论①在HBe系统中,HBeAg(+)患者的突变株检出率高于抗HBe(+)患者(P＜0.05),提示其位点突变株在HBeAg(+)中占优势,与以往文献报道中关于1896位点突变株主要存在于抗-HBe(+)患者中的结论不尽相同.因此,应考虑HBeAg(+)患者也存在病毒突变的可能.②HBV慢性感染过程中,CHB患者与LC患者的突变株感染检出率无显著性差异(P＞0.05),表明在1898及/或1901位点的突变株感染与肝脏损害程度无平行关系.     

中西医结合联合灌肠疗法治疗乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭的临床研究

目的观察中药口服联合大黄乌梅合剂高位保留灌肠结合西医常规疗法治疗乙型肝炎慢加急性肝衰竭的临床疗效。方法将50例乙型肝炎慢加急性肝衰竭患者随机分为试验组(25例)和对照组(25例),对照组给予西医常规治疗,试验组除西医常规治疗外,同时给予大黄乌梅合剂高位保留灌肠(4周)和中药辨证治疗(8周);观察临床疗效,治疗前、治疗4周、治疗8周的肝功能、凝血功能、NH3以及治疗期和随访期病毒载量的变化情况。结果试验组总有效率为52%,对照组为40%,组间疗效差异有统计学意义(P0.05)。两组治疗4周后ALT、TBil、PT、PAT差异有统计学意义(P0.05,P0.01),治疗8周后ALT、TBil、Alb、PT、PAT差异有统计学意义(P0.05,P0.01),随访48周HBV DNA阴转、病毒耐药复发两组差异有统计学意义(P0.05)。结论中西医结合联合灌肠疗法治疗乙型肝炎慢加急性肝衰竭临床疗效良好,远期HBV DNA病毒阴转率高,复发率低。     

慢性乙型肝炎患者HBV DNA前C区突变株的分析

ＨＢＶＤＮＡ基因经聚合酶链反应 (ＰＣＲ )、分子克隆及序列分析等检测手段可发现其突变 ,以前核心区尤为显著。我院与复旦大学医学院附属中山医院 ,复旦大学遗传学研究所于 1999年 3月对 1996年 6月～ 1997年 10月收集的 5 9例慢性乙型肝炎的标本作前Ｃ区基因分析研究 ,现报告如下。材料与方法一、病例选择1996年 6月～ 1997年 10月我院住院及门诊随访的慢性乙型肝炎患者 5 9例 ,男 46例 ,女 13例 ,年龄 7～ 70岁 (2 5～ 5 0岁占 86 % ) ,其中肝炎后肝硬化 18例。诊断按 1995年 5月北京第五次全国传染病与寄生虫病学术会议修订的标准。二…     

连续性血浆透析滤过在急性肝衰竭治疗中的临床疗效评价

目的观察连续性血浆透析滤过(continuous plasma dialysis-filtration,CPDF)治疗后,急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)伴脓毒血症患者血浆细胞因子的动态变化。方法对2010年1月~2013年12月在我院重症肝炎科接受CPDF治疗的21例患者,分别在CPDF治疗前及治疗开始后1 h、2 h、6h采血,用酶联免疫吸附法测定标本的TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10浓度,并进行统计学分析。结果各种细胞因子浓度均随CPDF时间延长而明显降低,在治疗2小时各项细胞因子的浓度与治疗前比较有显著性差异(P0.05)。在CPDF进程中,各细胞因子的筛系数和清除率在60min后均有不同程度下降,但在2小时后无明显变化。结论 CPDF治疗能有效持续地清除急性肝衰竭伴脓毒血症患者的血浆促炎细胞因子。     

慢性乙型重型肝炎患者外周血单个核细胞衍生的树突状细胞表型与功能

目的 通过检测慢性乙型重型肝炎(CSHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)衍生的树突状细胞(MoDC)经聚肌胞苷酸刺激后表型变化及细胞因子分泌情况,了解MoDC的免疫调节功能及其在慢性乙型肝炎(CHB)重症化中的作用.方法 采集CSHB组患者37例、CHB组患者20例和健康对照者20例的外周血,分离PBMC,免疫磁珠细胞分选法获得纯化的PBMC,体外培养诱导为未成熟树突状细胞(iDC),聚肌胞苷酸刺激为成熟树突状细胞(mDC).流式细胞术检测iDC及mDC细胞表面人类白细胞DR抗原(HLA-DR)、CD83、CD86、CD80的平均荧光强度(MFI);ELISA测定聚肌胞苷酸刺激后12、24、48 h的MoDC培养上清液中IL-12、IL-6、TNF-α分泌水平.多组间比较采用单因素方差分析,并进行方差齐性检验.结果 3组iDC表面HLA-DR、CD83、CD86、CD80的MFI比较,差异无统计学意义.CSHB组患者mDC表面HLA-DR、CD83、CD86、CD80的MFI与CHB组、健康对照组比较,显著低下(F值分别为59.73、13.95、34.80和73.02,均P＜0.05).聚肌胞苷酸刺激12、24、48 h时IL-12分泌量为:健康对照组＞CHB组＞CSHB组(F值分别为151.34、126.65、72.76,均P＜0.05),其中24 h时分泌量最高,分别为(48.2±7.6)、(56.7±11.8)、(97.8±16.2)ng/L.IL-6在上述3个时间点的分泌量为:CSHB组＞CHB组＞健康对照组(F值分别为92.50、86.89、64.57,均P＜0.05),其中12 h分泌量最高,分别为(1698.3±340.4)、(965.8±231.7)、(697.8±213.6)ng/L.TNF-α在上述3个时间点的分泌量为:CSHB组＞CHB组＞健康对照组(F值分别为58.66、122.36、44.73,均P＜0.05),24 h表达量分别为(19 672.7±4214.7)、(9946.1±2586.5)、(6659.2±955.8)ng/L.结论 CSHB患者MoDC成熟障碍,表现为IL-12分泌低下,而IL-6及TNF-α分泌亢进,可能是加剧肝脏炎性反应致重型肝炎的重要因素.     

重型肝炎并发真菌感染的细胞免疫状态

重型肝炎由于肝功能严重受损,免疫功能紊乱,极易并发真菌感染,进一步加重肝脏负担,甚至危及患者生命.本文对慢性重型肝炎并发真菌感染患者的细胞免疫情况进行分析.     

肝衰竭评分模型与ICU通用评分法对76例病毒性肝炎乙型慢加急肝衰竭患者院内死亡判别力的比较

目的:比较各类肝衰竭评分模型及ICU专用评分法对病毒性肝炎乙型慢加急肝衰竭患者院内死亡判别力.方法:将76例病毒性肝炎乙型慢加急肝衰竭患者分为存活组(n=42)及死亡组(n=34),分别采用肝衰竭评分模型及ICU专用评分,即MELD,SMSVH与APACHEⅡ,APACHEⅢ,对所选患者予回顾性病情评估,并通过受试者工作特征(ROC)曲线进行分析.结果:死亡组评分显著高于存活组(MELD:38.19±8.09 vs 24.12±7.16;SMSVH:5.29±1.36 vs 4.19±1.09;APACHEⅡ:15.47±4.06 vs 10.79±2.56:APACHEⅢ:73.50±17.79 vs 60.02±10.06;均P<0.01).各评分法ROC曲线下面积均大于0.7,从大到小依次为:MELD (0.906)、APACHEⅡ(0.848)、APACHEⅢ(0.770)、SMSVH(0.749).结论:MELD评分法对病毒性肝炎乙型慢加急肝衰竭患者院内死亡判别力最佳.