LY294002与Exendin-4体外诱导人胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞

目的：探讨磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 -kinase,PI3K）抑制剂LY294002与胰升血糖素样肽-1（glucagon-like peptide-1,GLP-1）拟似物Exendin-4体外诱导人胚胎干细胞（human embryonic stem cells,HESc）分化为成熟胰岛素分泌细胞的影响。方法：利用“五步法”包括：HESc体外培养;拟胚体（embryoid bodies,EBs）形成;筛选巢蛋白阳性细胞;扩增巢蛋白阳性细胞;第5阶段分别加入PI3K抑制剂LY294002为实验组（LY组）和GLP-1拟似物Exendin-4为对照组（Ex组）诱导HESc定向分化。光镜下观察各阶段细胞分化特点,细胞免疫荧光染色鉴定胰岛样细胞特异蛋白表达。结果：C肽、胰高血糖素、生长抑素单染细胞阳性率及胰岛素/生长抑素、胰岛素/C肽双染细胞阳性率Ex组均高于LY组：C肽（85.7±2.1）% vs. （74.5±2.7）%,P=0.005;胰高血糖素（38.1±3.4）% vs.（27.2±2.4）%,P=0.018;生长抑素（75.4±3.7）% vs.（31.3±4.7）%,P=0.000;胰岛素/生长抑素（21.5±2.2）% vs. （3.5±0.9）%,P=0.000;胰岛素/C肽（87.5±2.4）% vs. （76.7±3.1）%,P=0.013。结论：在无血清培养体系下,LY294002较Exendin-4诱导HESc分化的胰岛素分泌细胞更加成熟。     

毫火针针刺结筋病灶点联合常规针刺治疗疼痛期肩周炎临床研究

[目的] 观察毫火针针刺结筋病灶点联合常规针刺治疗疼痛期肩周炎患者的临床疗效。[方法] 64例疼痛期肩周炎患者随机分为治疗组和对照组,每组32例。对照组给予常规针刺,治疗组在常规针刺基础上加用毫火针针刺结筋病灶点,两组疗程均为14 d。观察并比较两组治疗前后McGill疼痛问卷（SF-MPQ）量表、Constant-Murley量表以及简明健康状况调查表（SF-36）评分、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平变化情况,并评估临床疗效。[结果] 两组患者治疗后SF-MPQ量表评分明显低于治疗前（P<0.05）,Constant-Murley量表评分及SF-36量表评分均明显高于治疗前（P<0.05）,血清TNF-α、IL-6水平均明显低于治疗前（P<0.05）。治疗组对SF-MPQ量表、Constant-Murley量表、SF-36量表评分及TNF-α、IL-6水平的改善均明显优于对照组（P<0.05）。治疗组临床总有效率为93.75%,明显高于对照组75.00%（P<0.05）。[结论] 在常规针刺基础上加用毫火针针刺结筋病灶点治疗疼痛期肩周炎能有效减轻疼痛,改善关节活动功能,提高患者生存质量,降低炎性指标,提高临床疗效。     

颈部透明层厚度、心脏三尖瓣反流和静脉导管血流联合Z评分对胎儿先天性心脏病的诊断效能分析

目的研究颈部透明层厚度（NT）、心脏三尖瓣反流（TR）和静脉导管血流（DV）联合胎儿心脏测量参数Z评分对胎儿先天性心脏病的诊断效能。 方法采用2015年1月至2020年2月在内蒙古医学院附属医院进行孕早期新生儿筛查的6 217例孕妇作为研究对象,根据引产与分娩共确证胎儿患有先心病分为观察组和对照组,分别对两组胎儿的NT、TR、DV以及心脏测量参数Z评分进行比较。分析NT、TR、DV与Z评分的联合对胎儿先天性心脏病的诊断效能。 结果观察组胎儿的NT、TR、DV异常率均高于对照组（χ²=1 953.577、1 805.085、1 339.066,均P＜0.001）。在以双顶径的预测中,观察组胎儿的主动脉Z评分低于对照组（0.012±0.001 vs 0.023±0.002,t=84.259,P＜0.001）,肺动脉Z评分高于对照组（0.035±0.002 vs 0.025±0.003,t=38.623,P=0.000）;在以股骨长的预测中,观察组胎儿的主动脉Z评分（0.022±0.003 vs 0.037±0.004,t=38.172,P＜0.001）以及肺动脉Z评分（0.031±0.005 vs 0.039±0.003,t=12.474,P＜0.001）低于对照组;在以实际孕周的预测中,观察组胎儿的主动脉Z评分（0.013±0.001 vs 0.022±0.002,t=68.939,P＜0.001）以及肺动脉Z评分（0.014±0.002 vs 0.019±0.003,t=19.312,P＜0.001）低于对照组。NT、TR、DV与Z评分联合诊断胎儿先天性心脏病的灵敏度为93.44%,显著优于单独诊断;NT、TR、DV与Z评分联合诊断胎儿先天性心脏病的受试者工作特征曲线下面积为0.892,显著高于单独检测（95%CI：0.654~0.912,P＜0.001）。 结论NT、TR、DV联合胎儿心脏测量参数Z评分对胎儿先天性心脏病具有积极的诊断意义。     

腹腔镜与开腹结直肠癌根治术对腹膜结构损伤的前瞻性对照研究

目的探讨腹腔镜与开腹结直肠癌根治术对腹膜结构损伤的差异。方法将符合纳入标准的50例结直肠癌患者分为腹腔镜组（LO组,27例）和开腹组（CO组,23例）,前瞻胜比较两组手术时间、术中失血量、淋巴结清除数及其阳性数目、肠管切除长度、肿瘤距两端切缘距离和切缘病理学：采用光镜和扫描电镜观察两种手术方式对腹膜结构损伤的程度。结果L0组手术时间比CO组短[（150．6±39．5）min比（183．0±39．2）min,P〈0．05],失血量显著少于CO组[（80．0±75．2）ml比（234．5±235．3）ml,P〈0．01]。两组切除标本长度、肿瘤距两端切缘距离、清除淋巴结总数及淋巴结阳性数目差异均无统计学意义（P〉0．05）。两组标本切缘均为阴性。光镜观察：CO组肠管浆膜完整性受损程度、系膜脂肪细胞与间皮细胞覆盖脱失程度、红细胞及炎性细胞聚集程度均较LO组严重（P〈0．01）;扫描电镜观察：CO组结直肠浆膜覆盖完整性受损程度、间皮改变程度和基底膜暴露程度均较LO组严重。结论在达到同等根治切除清扫程度下．腹腔镜结直肠癌根治术比传统开腹手术对腹膜结构损伤轻。     

弓形虫多表位基因植物表达载体的构建

目的构建弓形虫多表位基因(TGMG)植物表达载体。方法①将TGMG亚克隆人pBAC55构建中间载体pB35MG,再将其中E35S/TGMG/NOS3′结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pC35MG。②将番茄果实特异性启动子E81.1插入pB35MG构建中间载体pB35E1MG,再将其中E35SE81.1/TGMG/NOS3′结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pC35E1MG。③将番茄果实特异性启动子E82.2插入pB35MG构建中间载体pBE2MG,再将其中E82.2/TGMG/NOS3′结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pCE2MG。测序鉴定pB35MG、pC35E1MG、pCE2MG中的TGMG序列。④pC35MG、pC35E1MG、pCE2MG转化根癌农杆菌LBA404。结果重组质粒用酶切鉴定均得到预期片段,pB35MG、pC35E1MG、pCE2MG测序结果正确。结论成功构建TGMG中间载体pB35MG、pB35E1MG、pBE2MG,以及植物表达载体pC35MG、pC35E1MG、pCE2MG。并将3种植物表达载体导入根癌农杆菌。     

捻转血矛线虫含内含子序列的遗传标记研究

驱虫药的广泛使用所带来的普遍抗性,致使圆线虫感染的控制受到严重威胁。基因图谱将有助于这种抗药基因的解读。作者曾对捻转血矛线虫的3种核DNA标记——AFLP(扩增片段长度多态性)、微小卫星、转     

遗传性混合型高脂血症小鼠的自发性动脉粥样硬化

目的为探讨高甘油三酯血症对动脉粥样硬化的影响,建立了脂蛋白脂肪酶和载脂蛋白E双基因缺陷的混合型高甘油三酯和高胆固醇血症动物模型。方法比较了双基因以及载脂蛋白E基因缺陷小鼠的血浆甘油三酯,总胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇的水平,并对整条主动脉和主动脉流出道进行了动脉粥样硬化病变定量检测。结果发现双基因缺陷小鼠血浆甘油三酯是载脂蛋白E基因缺陷小鼠的3.8倍(5.904±0.505比1.536±0.860g/L),血浆总胆固醇也略有增加,但高密度脂蛋白胆固醇则无明显差异。两种小鼠的主动脉全长及流出道均有明显的粥样硬化,斑块面积占全部动脉的37.2%±10.7%比44.6%±18.1%,但之间无显著差异。结论载脂蛋白E基因缺陷合并脂蛋白脂肪酶缺陷虽然可以出现血浆甘油三酯增高,但动脉粥样硬化病变并没有加重。这可能与血管壁局部脂蛋白脂肪酶的活性相应降低而对动脉粥样硬化抑制作用有关。     

重症急性胰腺炎54例治疗体会

1992～2002年，我们收治重症急性胰腺炎(SAP)患者54例。现将其治疗体会总结如下。     

谢晶日治疗胃黏膜异型增生的经验

<正>胃黏膜异型增生(亦称不典型增生)具有较高的癌变倾向,有效治疗胃黏膜异型增生可大大降低胃癌的发生率。现代医学尚未发现有效治疗此病的药物,而中医通过辨证论治在阻断和逆转胃癌前病变中疗效显著。谢晶日教授为黑龙江省名中医,博士生导师,业医近40载,医术精湛,治病千万。谢师在临床中善于运用肝脾理论治疗各种疑难杂症,巧妙运用经方、验方加时方,尤在治疗胃黏膜异型增生方面积累了独特的经验。笔者有